紫外分光光度计验收细则

UV-2550验收方案参照JJG178-2007及本企业对紫外可见分光光度计的一些技术要求，验收主要侧重下几方面：一、 紫外可见风光光度计的测试原理溶液中待测物分子中的价电子能选择性吸收紫外或是可见光，从基态跃迁到激发态，形成紫外可见吸收光谱。根据紫外可见吸收光谱中的吸收峰和摩尔吸收系数，进行定性分析。从光源辐射出的光经过波长选择器形成单色光，当单色光通过样品时，被样品中具有特征吸收的化合物吸收，吸光度和样品浓度的关系符合朗伯-比尔定律。见下式：0A=log-00=KEKbtr式中：A一吸光度K一线性吸收系数00—入射辐射光通量0切一透射辐射光通量b一光路长度c一溶液中待测物浓度当光路长度和吸收系数一定时，吸光度与溶液待测物浓度成正比。二、 试剂蒸馏水（国标规定的实验室用三级水标准）；重铬酸钾，碘化钠，亚硝酸钠，高氯酸均为分析纯；各标准溶液的配制：1、 10g/L的碘化钠溶液：称取已干燥过的的碘化钠5.0g（秤准至土0.1g）于烧杯中,用蒸馏水溶解，然后移入500mL容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀并避光保存。2、 50g/L的亚硝酸钠溶液：称取已干燥过的的亚硝酸钠25.0g（秤准至土0.1g）于烧杯中，用蒸馏水溶解，然后移入500mL容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀并避光保存。3、 60.00mg/L的重铬酸钾溶液：称取已干燥过的的重铬酸钾60.00mg，移入1L容量瓶中,用蒸馏水溶解，然后加入1ml1.0mol/l的高氯酸溶液，用蒸馏水稀释至质量为1000.0g，摇匀并避光保存。三、验收标准及方法步骤为了便于描述仪器性能指标，将仪器的检定波长划分为三段，A段（190〜340nm）、B段（340〜900nm）、C段（900〜2600nm）。一般仪器性能可分为I、II、m、W四个等级，为快速可靠地检定仪器，可按以下顺序进行检定：基线平直度，噪声，波长准确度和重复性，最小普带宽度，吸收池配套性，杂散光，透射比准确度和重复性。一）基线平直度1、验收标准表1基线平直度指标级别A段B段C段I±0.001±0.001±0.002II±0.002±0.002±0.005m±0.005±0.005±0.010W±0.010±0.010±0.0202、验收方法设置仪器光谱带宽为2nm，中等扫描速度，采样间隔1nm，样品和参比皆为空白（蒸馏水）在200〜850nm范围内进行光谱扫描，测量图谱起始点的吸光度与偏离起始点的最大吸光度之差即为基线平直度。二）噪声和漂移1、验收标准：表2仪器噪声及漂移的要求级别透射比为0%的噪声透射比为100%的噪声漂移I<0.05<0.1<0.1II<0.1<0.2<0.2m<0.2<0.5<0.5W<0.5<1.0<1.02、验收方法：1）设置仪器扫描参数：定波长扫描：（A阶扫描波长：250nm；B阶扫描波长：400nm）；光谱宽带：2nm；时间采样间隔：1s；光度测量方式：透光比；记录范围：99%〜101%。2）步骤:噪声检定：将每个测量波长处设置的参比光束和样品光束皆为空气空白，调整仪器的透光比为100%，扫描2min，读出图谱上最大值和最小值之差，即为透光比为100%的噪声；在样品光路中插入挡光板并调整仪器透光比为0%，扫描2min，读出图谱上最大值和最小值之差，即为透光比为0%的噪声。（波长切换时允许见光稳定5min）漂移检定：将每个测量波长处设置的参比光束和样品光束皆为空气空白，调整仪器的透光比为100%，扫描30min，读出图谱上最大值和最小值之差，即为透光比为100%的基线漂移。三）波长准确度及重复性1、验收标准:表3波长最大误差（nm）级别A段B段C段I±0.3±0.5±1.0II±0.5±1.0±2.0m±1.0±4.0±4.0W±2.0±6.0±6.0表4波长重复性（nm）级别A段B段C段I<0.1<0.2<0.5I<0.2<0.5<1.0m<0.5<2.0<2.0W<1.0<3.0<3.02、验收方法：以重格酸钾标准溶液为标准物质，检定仪器在紫外区的波长准确度及重复性。1）设置仪器扫描参数：温度：25°C；检定波长：（n=257nm，透射比：13.7%）；扫描范围:（200〜350nm）；光谱宽带：2nm；慢速扫描；采样间隔：小于仪器波长重复性指标（＜0.1s）；光度测量方式：透光比；记录范围：99%〜101%。2） 步骤：选择氘灯，根据仪器扫描参数进行设置，在检定波长257nm处用空气作为参比，调整仪器的透光比为100%，在样品光路中插入挡光板并调整仪器透光比为0%。然后将重格酸钾标准溶液插入样品光路中，得出标准物质的检定吸收波长。重复上述操作测3次，得出相应的吸收波长。注：也可用波长波准物质和相应的滤光片进行校准。3） 计算结果：将每个测量波长按照下式（1）计算波长示值误差：△人=人一人n式中：人一波长示准值（nm）兄—3次测量的平均值（nm）按照是（2）计算波长重复性：=匕一、式中："max'"mm一分别为3次测量波长的最大值和最小值（nm）。四） 最小谱带宽度1、 验收标准：仪器的最小光谱带宽的误差不超过标称光谱带宽的土20%。2、 验收方法：仪器参数设置及操作步骤与波长准确度一至，区别在于：重复3次操作，得出标准物质的光谱图，选择"=257nm处特征光谱，测定其半峰宽度，即为最小谱带宽度，即为d（nm）。结果判定：只要彳2X100<±20，即可视为合格。五） 吸收池的配套性检测1、验收标准：表5吸收池配套性要求（%）吸收池类型波长配套性误差石英220nm0.5玻璃440nm0.52、验收方法：

同一光径的石英吸收池中，装蒸馏水于220nm处测定，将一个吸收池的透射比调至100%或95%，测定其他各池的透射比，其差值即为吸收池的配套性。六）杂散光1、验收标准表6杂散光的技术要求2、验收方法采用杂散光测定标准物质：碘化钠标准溶液（或是截止滤光片）于220nm（氘灯），亚硝酸钠标准溶液（或是截止滤光片）于360nm（钨灯），10nm标准石英吸收池，蒸馏水做参比，光谱带宽2nm，测定其透射比。七）透射比最大允许误差及重复性1、验收标准：表7透射比的最大允许误差（nm）级别A段B段I±0.3±0.3II±0.5±0.5m±1.0±1.0W±2.0±2.0表8透射比的重复性（nm）级别A段B段I<0.1<0.1II<0.2<0.2m<0.5<0.5

<1.0<1.0<1.0<1.02、验收方法用重格酸钾标准溶液和标准石英吸收池，分别在235nm、257nm、313nm、350nm测定透光比，重复测3次。注：也可用紫外区中性滤光片测量。3、结果：按照式（3）计算波长示值误差：AT=T-Tn式中：T—透射比示准值n兄-3次测量的平均值按照是（4）计算波长重复性：5广上-Tmn式中：lax'Im—分别为3次测量波长的最大值和最小值。紫外可见风光光度计检定记录记暴*号' 年月日畏检堆位室温联系电话相对湿度役器型号制啻厂出「削号供器类别证书细号、基线平直度（nm）彼长瓶网测定值A段g段、噪音和漂移（%）项目匿时比。％UOoiin)AlftM+三、 波长准确度和重复性（nm）四、 最小谱带宽度（nm）五、 吸收池配套性fitK/nm