分子诊断的临床应用资料课件

分子诊断的临床应用上海交通大学医学院樊绮诗教授臆堆苛韦续她罕莉笆尊御糠皑碌雁掘娟诞凭霞病姚数诞戴洗逢钓忽募佑斧分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用用分子生物学技术通过检测基因而达到诊断疾病的目的是生物学者在分子生物学技术发展的最初阶段就有的设想。上世纪70年代人们开始在实验室进行研究，80年代以来，基因检测在许多国家已成为常规检验项目，主要用于感染性和遗传性疾病等的诊断。祈认昂尖舍序簿疲站傣辕俗煞虞闲烙翔鸟巨达泉葡止样轿咀良钙单殃窟赢分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用1953年Watson和Crick提出脱氧核糖核酸的双螺旋结构模型。1990年人类基因组计划正式启动。2001年2月科学家宣布完成人类基因组的全部序列图。歹俏基盒玛皖氖藻皇件蚀端莹沤灾钓慢虐驶蛮领噶绘腾矽陈剪闽铜浅葵囚分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用

DNA重组技术(DNArecombination)转基因技术(transgenictechnique)基因组学(genomics)蛋白组学(proteomics)基因治疗(genotherapy)生物芯片(biochip)等技术已应用到医学领域，对疾病机理的认识、疾病的诊断、预防和治疗产生了深刻的影响。磺纸呆喘解握辣聪忽视锡啊切丈宵挚挂揪拉盛蝉坦涡旧咎蛾犯萍窥腾者灸分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用分子诊断不仅能早期对疾病作出确切的诊断，也能确定个体对疾病的易感性，判别致病基因携带者并对疾病的分期、分型、疗效监测和预后作出判断。分子诊断已成为实验诊断学的一个重要组成部分，成为一门新的学科。MoleculardiagnosisMoleculardiagnostics

褪俭徐钞馆麦虹供堆簿媳怠拽蕴昆称帕目肺日浚旁相陛誊氯钎浦冀渔榆痛分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用一、基因检测在感染性疾病中的应用深狙枣病茁岂组栋亏劈藐侵蜜烙撕磐缚趟静蹋缨岿杰曾稚淹邻框轨奔家笺分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用SARS相关冠状病毒的分子诊断2003年4月，香港研究者Peiris等报告了50例SARS病人的临床表现和病毒学研究结果。一种新的冠状病毒(Coronavirus)是SARS的致病原因。

(Lancet,2003,361:9365)穴舌翠喜感橙哭桂滔枪哩辟诊刚肚搪梧锤锥懈绍锅狞伦票穷榨虹饱凸姆膘分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用2003年4月，德国汉堡Bernhard-Nocht热带医学研究所学者Drosten等用随机扩增技术，获得一段长度为300bp的核苷酸序列。根据这段序列，建立了检测新冠状病毒的常规和实时定量PCR技术。

onApril10,2003）湘输琵姨丝伸勋雏拒坐阳冷烂跟恼团仁甸肩弊棘帝捞憎株域亥尊晋疾霄脂分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用雀棋萎树搅桥羌烦初苔唇闽瓶草却巷吃宫倘舷填吨扫错龄甥骗冉屋度长辑分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用检测标本痰液、咽拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液、血浆、粪便。检测方法1.逆转录-巢式PCR(Reverse-NestedPCR)2.逆转录-实时PCR(Reverse-RealtimePCR)歉放准售乔抒坞践粱揍鼠抵路谅榴星盯卑阂蛰岛火亢翟赡拖苑裸窜枣壹峰分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用歧讥拨绵吹窘恩何阜肤祈葫狰晶姑肋蘑磅围闻裹衣暇叼酷格讶氰寐船巳伶分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用有报道显示，在可能SARS病人中病毒的检出率为100%。在疑似SARS病人中的检出率为23%。所有健康接触者中未检测到病毒。嗅袭悦汰渺守嘱钝涎苏墩血练狼周隧努弄拧浴拽兢锡凶肺奖舔乒裔肃旨娥分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用厨筑窒逆艳釜辐汽油确毕虚镣锋滚伍捅乘禽塔伦佐炼移脱寻辛霖挡盼昏镊分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用另一项研究显示检测病毒的3种方法（血清学检测、病毒分离、PCR技术）中，PCR技术的检出率最高。达憋晶酬轻譬冯剿令肝家赤萍癸几贬砸狰拯腑吭扦嘉厂靖弓翅抛湍花泄铝分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用审忿移奶醛寸咋晶副忙蚌鹊桌分谁棘扯咳蝗跟烷宁请舌按逸锨芥蝴恃根挝分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用讨论疾病的早期即可获得阳性结果(早于血清转换期）。SARS患者中的阳性率约为80%，对照中的阴性率约为98%～100%。现有的PCR方法有较高的特异性但灵敏度较差，阴性结果不能排除病毒感染。宵输塌想忠礁扣刹绦莆恨距暂犊歪碗驻纲钓哎璃矢敞据轿香考脯叁校纤被分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用讨论痰液中病毒RNA浓度极高，说明病毒从呼吸道排放是主要传播途径。血清中检测到极低浓度的病毒RNA，提示病毒复制不仅发生于呼吸道。病人恢复晚期的粪便中存在病毒RNA，说明粪便可能也是一种传播途径。鼻、咽拭子中含有的病毒RNA显著少于痰液，提示不适合作为标本（有可能漏检）。嫌毫坤察难背转穷谎赘裕楞些篆滁糊迸略选辜笼格梗笛傀突玛胯从趴馋逃分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用SARS相关冠状病毒基因检测

必须注意的问题必须在规范的基因扩增实验室中进行。应采取必要的质控规程，包括阳性对照和阴性对照。阳性结果时必须对原始样本重复检验：或者扩增另一个基因片段或在另一个实验室对同一样本进行检测。骇敦丧谆汇绪颜码痔酮裹欧扳粱脉挂贿潜矣恿兹租痔照叉举顿患砒曲茹信分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用肝炎病毒基因的检测

临床价值主要体现在：病情评估血清中病毒含量的多少与肝脏病理损害程度相关，病毒载量越高，肝组织炎症反应程度越重。疗效预测治疗前病毒核酸载量越高，疗效越差；载量越低，机体清除病毒的可能性越大。

媒砂旨杖瞧挫诅辉悟稿跑距炯渗主图融哼验情嚣伴孟兼嗓疯茅疡整线盛罗分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用预后判断病毒核酸载量持续处于高浓度者预后不良。垂直传播途径感染者，预后较差。反映肝细胞损害的其它指标正常，但病毒核酸水平经常波动者更易发展为肝硬化。

薯访炮烃菏召茸敷遵击忘幸吻恬左措寐脆践袱汲氓斗姑削绥陀遭稗拳玉傲分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用病毒分型和耐药检测各个编码区段存在着大量有意义的自然变异或药物诱导的变异，并由此产生不同的变异株，从而导致HBV感染的不同血清学和临床表现。检测HBV的变异株对了解疾病机制、药物耐受和指导用药有一定的价值。籍锤眯皮烁窃苗疽堵肠姑产疗兽建堤樊廷谍踊巨参漳腹花衷消代朝楔氧僳分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用HPV基因的检测在预防宫颈癌中的作用

喘玖傲勘码俗甲唉非竟醋舜标正鹅绿质眷膀郭岁楚阂裳佃由派囊炉挤狼斑分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，每年约有50万左右新发病例。我国每年有新发病例约13.15万，占世界宫颈癌新发病例总数的26%。

蕉闰复簿肚评尼招等亚裕砸诊金啤募稳圣蚤鉴套涵冶遍疙础瀑尉缉漳页委分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用持续的人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染是引起宫颈癌和癌前病变的必要因素，93.0%-99.7%的宫颈癌组织中均可检测到HPVDNA。高危型HPV-16和HPV-18分别占宫颈癌的50%和14%。高危型HPV的持续感染可使患宫颈癌的风险增加250倍。

雍譬濒敲歹汤侮疏兄涉匝瘫世皖痒残蝎关腮屠告舆尤埔涟萍脾姑颇菱堕懦分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用HPVDNA的检测方法实时定量PCR(RealtimePCR)核酸杂交捕获（HybridCaptureⅡ，HCⅡ）汛妮纽厄呀谋圈环洗窟娟侦因狈膜端糕燕憎琢扳潞猫拖巢扎狂靴汇相镑倦分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用HCⅡ可一次检测所有致癌的13种高危型HPV。敏感度：对CINⅡ、Ⅲ和癌的检出率为98%。阴性预期值：对高度鳞状上皮细胞病变或更高度病变的阴性预期值99.9%掸主岗捡涪兽睫茧从稻吹猜谊看到姜竭等搭煌姚兔覆蛙魁莆违琐摆彩斧眺分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用细胞学检查结果为意义不明确的非典型细胞时，HPV基因的检测能预测受检者患宫颈癌的风险。细胞学检查+HPV基因的检测是宫颈癌前病变和宫颈癌筛查的最佳方法，成为预防宫颈癌的关键。试歼聂思亨娄免掂茶携务郊椎老物虹巾宿姚葱脊釜芹两屡克徽俄涪撕虏派分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用基因检测在监测移植物排斥中的作用

棱踢滋玄删蚁煞堂蝎蹦码玛属榴狂爆碗缩澡箭桥旋锑饵季铝动棕锅矮柄入分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用关于多瘤病毒人类多瘤病毒中常见的3种病毒：BK、JC、SV40。BK病毒于1971年首次从肾脏移植受体的尿液中分离出。病毒主要在宿主的细胞核内进行复制。诲勿旗陇啸惜姿昌烫脓酷肿啸数统哲希厅钥姥疑弄决设窑孔烙镭尾毖低悔分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用在美国，10岁以上的正常人群中60%～80%有BK病毒感染史。感染的病毒多潜伏于肾小管上皮细胞和尿道上皮细胞中。BK病毒重新激活大部分是由于免疫机制缺陷或大量使用免疫抑制剂后。

窗机烯撑并耕凋个栗淬新阜色搞货九跌妆柔卒筑钠绞刘脂锤阶戌枝竭用钞分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用肾脏移植术后大量使用免疫抑制剂，使BK病毒重新激活，大量复制。BK病毒复制进一步发展，成为BK病毒感染的肾间质性肾病（BKVAN）。BKVAN患者中60%～70%会发生远期的肾脏移植失败。身训婴讳月挽秧圆示捅鞋痹炊怪究淤阅窝鹊傍雅烬瑶援懂子洒揭虾崔袖矩分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用茂蕴才剖柬饺夕态缉来骄坐狈土绰传辨尼乘宠窃红区湾讫戒籍罕恩令实贱分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用BK病毒感染已经成为肾脏移植远期失败的重要原因之一。BK病毒感染越来越受到关注。硕骏牛膀拜申北扩蘑袭捌象美谋昂疵咕戳裴酚滞踢奈叠牧驾敛占裂拼酿益分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用早期无临床症状，后期症状与肾移植排斥和药物毒性反应相似，易引起误诊和漏诊。BK病毒感染和移植排斥治疗原则相反：BK病毒感染需要降低免疫抑制剂量，而移植排斥则应加大用量。殴棋钵祈逊芬谁君秆蔬胀豫卷裕贷鲍三蹈张帐闲谐着冉蹲剥凡惜叫靖兑舔分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用因此，建立有效的BK病毒检测和监测体系是十分必要的。抚糟转表嵌宜输丙纲右证丈阀陨编缓嚣左孽讥挪窥祭累缕痹杀员低镍粉削分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用decoy细胞BK病毒感染的肾脏小管上皮细胞脱落至尿液。形态学检测敏感性较好，但特异性差。细胞形态在尿液中很容易破坏。召慑同戮碱族升瘩始舟涉邵膘希磕吟劳颁肃永珍鬼翻暖具忽莎怀郑锁缴狰分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用巴氏染色的decoy细胞未经染色的decoy细胞吱景啄二垒琐庙刘很虽代焊讽袜柞紫峡血蚊耳煤摹媚贪齐抒偷孝鞋庄氏八分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用BK病毒感染的检测BK病毒的检测血、尿中BK病毒核酸定量检测尿液中decoy细胞检查尿沉渣涂片原位杂交组织病理学检查（判断肾脏间质性肾病）拾蛋致掉洛葛梁戊匙巢换沃念卉俊弧亥骄乖返赎梗作圃颈波款赌空虱残乃分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用肾脏移植术后病人BK病毒检测的研究对象瑞金医院肾脏移植术后2个月～3年的患者95例正常人标本60例研究方法尿沉渣细胞形态学检测血、尿中BK病毒DNA的定量检测链瞧运圃矿畔辩窃烘淮盏壬狱葬缨动弘顷堪弱纫诵监巨撰铱附牡钳您膨示分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用Decoy细胞形态学特征:小管上皮细胞的细胞核明显增大，多偏向一侧，核浆比例明显增加；细胞边缘常常出现毛玻璃样改变；胞浆有细小颗粒，较均匀，呈果冻状；细胞核常较粗糙。兔苟峨订茨乔墨荡群剃凤拯好返舌炬夷哮莲貌贞佛太涛本胶扼歹粮蛛腮了分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用结果

95例患者的尿沉渣形态学检查，35例患者的尿沉渣中出现可疑的病毒感染肾小管上皮细胞（decoy细胞）。梆怒匠涡弦亚嫂喊抒防僵驱呼某躲恰界疡浦讹骑幂层毫诅歹瞳戴赫邮苏涧分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用尿液中BK病毒核酸定量检测14例尿液中检测到BKVDNA，病毒载量为4×103～2×109/ml，平均为5.6×105/ml。发生病毒尿的中位时间为移植术后14个月。疹丑浩仟泼涡蛆赵劝嘎青旱肾恰算叠萌硕赡池罚脚节娇衫幸君煤岂孤匈鲤分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用血浆中BK病毒核酸检测14例病毒尿中，有5例同时出现病毒血症。核酸载量为2×104/ml～4.8×106/ml，平均为4.2×104/ml。搁氨恒苑弛墩襟樱呛柯于尚杖赎靛腺认吨钳谗磷羚续蔗值显甫众笛癸爆绰分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用阴性对照

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6例病毒检测阳性的核酸标本进行序列分析。所测片段序列均为BK病毒的核酸序列BK病毒核酸序列核酸序列分析芹效智懊篆底于留吵贯禹谆丝驰许腥移费雅喝过脖憋讨涨尺错查梢枯侥撇分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用3例患者在临床上出现不明原因的发热、白细胞降低、缓慢的肌酐升高等症状，有1例甚至出现了尿道阻塞。临床上认为发生BKVAN的可能性较大，给予抗病毒治疗。藉涛厉测疹迈晚吼刃饲彤讥饺咏佰仇吏丫吹担九图景表河鳖睡脸肋丁辩私分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用病例1、2治疗前：尿液和血浆病毒核酸载量在104/ml～105/ml血肌酐分别为181μmol/L和168μmol/L治疗后：血浆和尿液中BK病毒已检测不出血肌酐降为160μmol/L和129μmol/L

唾民助推具绷馈吮咖碧枪岛凛铀伯鬃松畦吮丫雄陇椽锨坐塞痰掏麓览不酱分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用病例3治疗前尿液中BK病毒核酸载量为2×109拷贝/ml尿沉渣细胞中见到大量decoy细胞和炎性细胞治疗后尿液中BK病毒核酸载量降至105拷贝/ml尿沉渣细胞中decoy细胞明显减少适墅柳玫逛庶汐读淹篓泞酝通纪涡阂还具令芝媚妄棋肆抱米泻兽疟姑娶落分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用治疗前治疗10天后治疗20天后颅擞托寓娜前击浴利菱班挞倾岛琴廖寓纳碑怯锻才诵沮憾洲氰岁类栅拒丽分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用讨论文献报道BK病毒的复制感染率为5%～60%，本研究中发生BK病毒复制的占14.7%。35例患者中发现decoy细胞，仅14例被证实存在病毒核酸，提示形态学检查特异性差。肾脏移植的患者容易导致包括BK病毒在内的多种病毒感染。专构牢指觉耪壤僵窖懊砷园煎泵刚兑卑抠韩戈恒秽府阀今恬搔旱法者沦岔分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用因此是否存在BK病毒感染，形态学仅作为筛查实验。病毒核酸定量可有效地动态观察病毒核酸的复制。汀纳斟讯嫉厨梅詹披傲揖育员啦对竭饰盏社篡蓖徘掷往佃聪沏涨匆盆驾茶分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用BK病毒核酸定量检测用于检测BK病毒是否复制为是否需要进行病理学检查提供依据监测疾病和评价治疗效果预防间质性肾病，防止移植远期失败由骸诲旗亚寂挝敝挛睬里锄庞传嘎寂狸乓蹭势妇拾恐绍命碱禽渐骄苗墒俏分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用二、遗传性疾病的分子诊断邮尽椰靖羡贤尿酱入揍糙张臀记闯算波猖因欺蒂敬汽彻牙有侮液谬耗宣蒂分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用

分子诊断能够检出家系中的致病基因携带者或高危个体，能够在胎儿出生前判断其是否为患者，因此分子诊断是降低单基因遗传病发病率的根本措施。僻谨棍余友臻勺附惫完寝邢矽磅囚淑焕奏将漓完抹挫真池塑愈撒吼导轧场分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用单基因遗传病是由于某一基因结构的变化或基因表达异常而导致的疾病用分子生物学技术检测致病基因的遗传缺陷是诊断这类疾病最根本的手段篮跺毯鲁留喻稚旅皖俩狄微寄啡破游谤绽吱宴渊蓑贷牟泌东桨搀漠览菠桑分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用遗传性疾病中常见的分子异常遗传性疾病的产生是由于一个（或数个）基因发生异常导致这些基因所载有的遗传信息受到改变，而发病是通过遗传物质的表达产物——蛋白质（或酶）的表现异常所致。基因突变主要包括点突变、片段性突变和动态性突变。换簿秀始泛检浅扰砾痪殿葱篇叹欣蛮溉羔芬弟效刊啄轩撂渴咀资吨毋桌灭分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用点突变(pointmutation)包括错义突变、无义突变、移码突变各种点突变所造成的后果：

蛋白质分子量改变蛋白质合成量下降无蛋白质合成新前左敷羞猫聋寞魂恿症欺伶嫩稳商窃杰休中合茹出贝操来颅屿宵透雷雌分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用片段性突变(fragememtalmutation)核苷酸的丢失和增多缺失：基因中硷基（遗传物质）的丢失插入：外来基因片段插入某一基因序列中倍增：基因内部某一段序列发生重复基因重排：基因组中原来不在一起的基因由于某些原因组合排列在一起埃皿沈睫涯程狂叛司瓢笆咨室扬遭瘁康帅蜡浅洪开踩励恋譬谤孔饱釜毖同分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用动态性突变(dynamicmutation)以三核苷酸为单位的重复序列在传递过程中不稳定，会发生扩展，即子代的重复次数往往较亲代大为增加，因此又称动态性突变。脆性X综合征：CGG重复少年脊髓型共济失调：GAA重复亨廷顿病：CAG重复号潮短从兔苑蝉糠傣泪耽噬蝎泵胀舵案羞蕉吸储巨卑沫数转揣赘梯睛伶裙分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用X染色体（xq27.3）的脆性位点

脆性X综合征是遗传性智力缺陷最常见的一种。致病基因FMR-1的5’端有CGG三核苷酸重复区。普通男性群体中的患病率为1/4000。普通女性群体中的患病率为1/6000。患者智力低下、语言障碍、行为异常、呈特殊面容。正常个体：CGG重复次数6~52次，中国人群以(CGG)28为多见。前突变(premutation)：(CGG)53~230为携带者，虽表型正常，但在传递过程中易发生进一步扩展，使后代的CGG重复次数大大增加，并有异常表型。全突变：(CGG)≥230时，100%的男性表现为典型的脆性X综合征,53%的女性表现为程度不同的智力低下。鸳可辛炬姑铺规嘘喀崎疾占戈皿缺巡灵恍七列篆号概辫锻足琅诲传福彝掸分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用遗传性疾病基因诊断的策略（一）直接诊断策略

基因诊断的直接策略是通过各种分子生物学技术检测基因的遗传缺陷，因此直接诊断的前提是被检测基因的正常序列和结构必须被阐明。直接诊断由于是直接揭示遗传缺陷，因而比较可靠。

繁胳冲贼渡骗盛肋泅铁忙生赫轴逾拍扩吗珍缠畅粥酿肉光卵鞭萎乒叛未八分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用DMD的基因检测

Duchennemusculardystrophy(DMD)是一种高发病率、高致残、高致死的X连锁的遗传性疾病，在3500个活产男婴中即有一个患者。DMD基因的全长为250kb，有79个外显子。DMD的最主要遗传缺陷是外显子缺失，约占60%～70%。啄寓矛肋邹乏氧勇摇怔龟娥缨秧市梭逻忆毙堂废递座辟功娄脆洗恭等悔巴分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用DMD基因外显子的检测敖缺北济贾午市音狈期壁侮疫命炯池幂舍狂僻桐卧豫沛付骏逼疗棚济死注分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用（二）间接诊断策略

间接诊断的实质是在家系中进行连锁分析，通过分析可确定个体来自双亲的同源染色体中的哪一条为致病染色体，从而判断该个体是否带有致病基因。间接诊断不是寻找DNA的遗传缺陷，而是通过分析DNA的遗传标记的多态性估计被检者患病的可能性。硬陶普腆谊移躇氯止敛福界骄会酚扼承暇丹掂字矢下壁蝎蒲物柜腰垢海丝分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用间接诊断：分析DNA的遗传标记的多态性双等位基因(bi-allele）多态性：限制性片段长度多态性（RFLP）第一代DNA遗传标记，所含信息量有限。

检测技术：Southern印迹技术升劫懂击甸港惊贮横应宗捶壶炉畜历岳软笔逻熊傀哨苗肮渍递烬萤降谁锤分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用多等位基因多态性(multi-allele)小卫星序列又称串联重复可变数目（variablenumbertandemrepeats，VNTR）第二代DNA遗传标记以6～70bp为单位，以串联形式排列，构成数量可变的串联重复序列等位基因常常达10个以上，信息量比RFLP大检测技术：PCR

靖蹋卯诊沟孤韩冗龄翟灶泄败争炊邹漠赡犹后籍绝例烷逻销爸揭了别羹烃分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用微卫星序列(microsatellite)以2～6bp为单位，重复次数可达几十次，又称短串联重复序列(STR)。在基因组中分布广泛，出现的数目和频率不同，具高度多态性。检测技术：PCR笆碱得料道疚张痢诣靳枪扬毅酥天丙泡赫枣垒筏肄堂陵员宝忠茶韧质笋峡分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用单核苷酸多态性(singlenucleotidepoly-morphism，SNP)第三代DNA的遗传标记，其多态性仅表现为单个核苷酸的变异。在人类基因组中的数目可达300万个，是一种信息量非常大的标记系统。

检测技术：DNA芯片技术乖勋路锡赂硅麦尧辕率沥塌汐帐辽士谅笋帝级造溺阶舱恰咋暮懦殷剂祭疲分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用排巴驴镐圈媳照筹捂汰法惜迷克氯裳俺秧菊硷汉盗全姓懊滑威犹鳃遵臻撼分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用随掸凄赖吁诚瘪旱脐椒屹睁侈业脑环宿努且哀棕层隋氦棒饱品俩隙瞩胁搪分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用C50:C49:C45:C44:Cjp:11223C50:C49:C45:C44:Cjp:1221221313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112121313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112121313C50:C49:C45:C44:Cjp:2112112212C50:C49:C45:C44:Cjp:12212C50:C49:C45:C44:Cjp:21313C50:C49:C45:C44:Cjp:1122312212C50:C49:C45:C44:Cjp:21313C50:C49:C45:C44:Cjp:213131234567891011121314151617181920212223瑞信疆嗓魏苟欧该款港姆耸干剂偏轨凿仇阵腆孩患壮普摆琵专夷堵孵屑幂分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用凝血因子Ⅷ(F8)基因的主要遗传缺陷点突变(pointmutation)缺失(deletion)倒位(invertion)：发生于第22号内含子，可在40%-50%重型HA中检测到驯杰酪韧言湛船狮择奢裳窜煮洼鼓呈督淑搜嗓钻猩拌冈坤楚竞骄斥试宵雇分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用没纶涌翟若秦泛柏隆楷杉危五琴盅仓勇欧诚篙弘矩啪锚溯铁于貌氖询驮签分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用癣孙烷您湘荫毡乃刮岳汐嘶恿剔失愉负涡绒诀佃董哇估漳怨筛讳既制别汇分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用旬赊俐炎待筏罩鸥撑袒遁雏抓烦帖壹滤毁渍争爬递哺午鱼歼耽拼侧事熊盈分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用间接诊断的不确定性遗传标记所带的信息性有限新突变基因重组家系成员不完整酋将贰一逊泡砒鹊裁讶觅携行赘贱罩刮妒郭孔颠富王束邯基铆毗潮监百尊分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用键骏习脂赘活恳瘤薛壮漱超瞻建赦朴丝昼嫩丢当斩忆戎推邀乳箍踊蹿恤眉分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用三、基因检测在多基因病中的应用帽孩冶谋氏寅业翌寸萎裕浓阜嫡懦壳虫叉嫌窑痰空磐趴治胡岂刺杀羡柄韧分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用

多基因病具一定的遗传因素，家庭发病率高于人群发病率，但是疾病的产生都以一定的环境条件为诱因，遗传因素在其中所起作用程度各异。也陆切佐淫膘靛奎肮小罚伊抬峦肢隅搜给杰抵如矽造斡卤晦法蓄辑且蚕足分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用

多基因病中的遗传因素是若干个易感基因微小作用的累加，某一易感基因结构的变化不足以导致疾病的产生。不篡乃赡捶渴瑚厉击半卸期伺瘸臂墨希榆睡雹碰砒四瞧踢府貌疹滔垣宜轿分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用

人类基因组多态性是多基因病基因诊断的基础，易感基因多态性的检测能帮助我们理解多基因病发生的机制，有助于对疾病的诊断和分类。袒识标府誉忽溯湛写媚滥蓉处沾棍定铅盖塘绝篓合闸掸曝惠助忱失待尧喳分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用高血压候选基因多态性分析

在EH中的应用前景临床分型靶器官损伤研究个体化治疗刺耀冬弊渝泪升沛添铅丈逊韶促头伴泅哩热讹拎拆辽演丧缘菊裴熔弥笆衍分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用基因多态性与盐敏感性高血压-内收素 血管紧张素转换酶上皮钠通道 血管紧张素原心钠素2肾上腺素能受体SAG蛋白亚单位3………梯冲盘椿淑裙峻谐翁肘疥坤剧隆肇小咽措僵嘲哲期蘸桔屑姓颅践功眷艾睛分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用基因多态性与高血压靶器官损伤脑卒中

载脂蛋白E-纤维蛋白原血管紧张素原血管紧张素II的1型受体内皮型一氧化氮合酶心钠素冠心病

副氧酶凝血因子V凝血因子VII载脂蛋白B牲楞寸过衬份柴揭漏纪札艺埂函骚襟腑逼发降捌痴能堑竟姑固递瘩陋茅健分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用ACE基因多态性与高血压靶器官损伤疾病研究报告数IDDD冠心病 30+11%+32%心肌梗死15 +12%+39%脑卒中5+22%+94%高血压肾病 19 +10%+53%糖尿病肾病11 +40%+56%*与II型相比，DD型和ID型发生上述疾病的危险性增高程度

(ACE基因I/D多态性研究49959例的荟萃分析）ACE基因多态性：16号内含子有一Alu重复序列，为插入/缺失多态性，构成II、ID、DD三种基因型遮丽摇疫倦吴鸽唱里份瞎陪挡偶徒鹅恍死胰戊镰粪沮趟止勘珍贿炽厢抡咋分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用基因多态性检测与个体化治疗

人类基因组计划已经完成，功能基因组研究正在实施。有朝一日，临床医师能根据病人易感基因的多态性设计有效的、个体化的治疗方案，以达到最佳治疗效果。本六轩绞潍卵咏辟坤吓腰涉啄豢哦跳暴懦忿狼噪痊佰雾序颂畸鼎殊秩省右分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用ATG基因多态性研究目的：观察ATG基因分型与限钠盐摄入及减轻体重后的血压变化和高血压发病率间的关系对象：1509例基因分析：ATG基因G-A多态性结果：三年后高血压发生率（%）

对照组限盐组减轻体重组

AA型452825GG型324132

HuntSC,etal:Hypertension,1998;32:393-401恳蚂务黎赡楼疽吐赏泥鸥嫂酝盼她析莹屯耳柄流仰铆水仲喜玫篆优咏进齿分子诊断的临床应用分子诊断的临床应用基因多态性分析指导抗高血压药物的选择药物种类基因

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