实验室生物安全培训专题讲座培训课件

目录实验室生物安全的相关法律与规范管理体系病源微生物，危险品管理实验室生物安全危害实验室生物安全防护实验室生物安全基本操作规程手卫生1目录实验室生物安全的相关法律与规范1实验室生物安全的相关

法律与规范实验室生物安全的相关

法律与规范2

世界卫生组织（WHO）

WHO一直非常重视生物安全问题在国际事务中的重要性

1983年“实验室生物安全手册”（第一版）:

将传染性微生物根据其致病能力和传染的危险程度等划分为四类将生物实验室根据其设备和技术条件等划分为四级：（BSL1-4）相应的操作程序也划分为四级（BSL1-4）对四类微生物可操作的相应级别的实验室及程序进行了规定在该手册中，WHO鼓励各国针对自己国内的微生物实验室制定相应的生物安全条例，并愿为此提供指导

世界卫生组织（WHO）3中国实验室生物安全相关法律法规1、国家法律：《中华人民共和国刑法修正案》中华人民共和国主席令（第51号）2006.6.29《中华人民共和国传染病防治法》中华人民共和国主席令（第17号）2004.12.12、国务院条例《病原微生物实验室生物安全管理条例》中华人民共和国国务院令（第424号）2004.11.12《突发公共卫生事件应急条例》中华人民共和国国务院令（第376号）2003.5.9《医疗废物管理条例》中华人民共和国国务院令（第380号）2003.6.64中国实验室生物安全相关法律法规1、国家法律：4

3、国家标准及行业标准《实验室生物安全通用要求》中华人民共和国国家标准（GB19489-2008）2008.12.26《生物安全实验室建筑技术规范》

中华人民共和国国家标准（GB50346-2004）2004.9.1《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》中华人民共和国卫生行业标准（WS233-2002）2003.8.1《生物安全柜》中华人民共和国医药行业标准（YY0569-2005）2008.6.1《生物安全柜》中华人民共和国建筑工业行业标准（JG170-2005）2005.6.13、国家标准及行业标准54、部门规章《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》华人民共和国卫生部令（第45号）2006.2.1《人间传染的病原微生物名录》中华人民共和国卫生部文件（卫科教发[2006]15号）2006.2.1《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》中华人民共和国卫生部令（第50号）2006.8.1《病原微生物实验室安全环境管理办法》国家环境保护总局令（第32号）2006.5.1《医疗卫生机构医疗废物管理办法》中华人民共和国卫生部令（第35号）2003.10.15《医疗废物管理行政处罚办法》中华人民共和国卫生部、环境保护总局令（第21号）2004.6.1《医疗废物分类目录》中华人民共和国卫生部、环境保护总局（卫医发[2003]287号）2003.10.10《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定》环境保护总局（环发[2003]188号）2003.11.20《医疗废物集中处置技术规范》环境保护总局（环发[2003]206号）2003.12.26《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法》

中华人民共和国卫生部令（第68号）2009.7.18地方性：《江西省病原微生物实验室生物安全管理办法》2018.4.254、部门规章6《实验室生物安全通用要求》国家标准

《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2004)国家标准于2004年4月5日审定通过，2004年10月1日正式实施。2008年修订,目前实施的是《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)

该标准的发布是我国实验室安全管理、公共卫生体系建设以及认证认可体系建设具有里程碑意义的一件大事，它标志着我国实验室生物安全管理和实验室生物安全认可工作步入了科学、规范和发展的新阶段。《实验室生物安全通用要求》国家标准《实验室生物安全通用要7《江西省病原微生物实验室生物安全管理办法》

共8章41条第一章

总

则（1-3条）：目的、适用范围、原则（预防为主、依法管理、明确职责、科学处置）第二章

组织管理（4-8条）：省市县级卫计委、实验室第三章

病原微生物管理（9-14条）：分1、2、3、4类，致病性由高至低，1、2类为高致病性，运送要不少2位受训人员参与，专用运输容器、专用交通工具，运输要审批。第四章

实验室管理（15-25条）：分1、2、3、4级，安全等级由低到高，使用前1个月内备案，5年有效期，到期3个内再申请备案，要在相应安全等级内开展实验活动。人员要考核培训，有健康档案，监督生物安全管理体系的运行，定期安全自查，人员定期体检，废物符合环境保护法律法规，有专人处置。8《江西省病原微生物实验室生物安全管理办法》

共8章41条8《江西省病原微生物实验室生物安全管理办法》第五章

实验活动管理（26-31条）：实验活动应备案且在相应安全等级的实验室开展，高致病性病原微生物实验活动应有2名以上的工作人员共同进行，样本处理要符合生物安全要求且有记录。第六章

实验室感染控制（31-37条）：高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本在实验活动、运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏的，应当按照《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定报告、处理；发生感染应及时报告并救治，评估危害程度；发生安全事件应启动应急处置预案。第七章

监督管理与法律责任（38-40条）：卫计行政部门负责监督检查，上级部门督导检查；对违反本办法的行为进行处罚、追责。第八章

附

则（41条）：自公布之日起实施，省卫计委负责解释。9《江西省病原微生物实验室生物安全管理办法》第五章实验活动管理体系10管理体系10建立健全实验室生物安全管理体系的重要性如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用。据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验室的感染事件和遗漏事故都是由管理不善而导致的。

11建立健全实验室生物安全管理体系的重要性如果缺乏健全和行之有效

生物安全管理组织体系4个层面构成江西省卫计委区市卫计委县级卫计委实验室所在单位、实验室实施分类、分级管理，统一标准12生物安全管理组织体系4个层面构成实施分类、分级管理，统一标

实验室生物安全组织体系法人责任部门实验室负责人实验室生物安全管理员人物实验室生物安全组织体系法人责任部门实验室负责人实验室生物安13实验室实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人实验室负责人应当任命一名实验室生物安全负责人指定专人监督检查实验室技术规范和操作规程的落实情况。

实验室生物安全负责人应为微生物学家或专业人员

有基础物理学、生物科学的技术背景

有与行政、技术、后勤的有效沟通协调14实验室实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人14

实验室生物安全负责人的工作

(1)生物安全、生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。(2)就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。(3)与有关人员讨论违反生物安全方案或程序的情况。(4)核实所有工作人员都接受了适当的生物安全培训。(5)进行生物安全继续教育。(6)对于所有牵涉到潜在感染性物质或有毒物品泄露等意外事故进行调查，并将调查结果以及处理意见向实验室主任和生物安全委员会报告。(7)就可能的实验室感染与医务人员进行协调。(8)在出现涉及感染性物质溢出或其他事故时，要确保清除了污染。(9)确保废弃物的正确管理。(10)确保对所有设备在修理或维护之前已经过适当的消毒处理。(11)经常了解社区对卫生和环境问题的态度。(12)要根据国家规定，针对病原体运入、运出实验室制订适当的程序。(13)对所有涉及感染性物质研究工作的计划、方案以及操作程序，均要在具体操作实施以前进行生物安全审查。(14)组织应急系统。15实验室生物安全负责人的工作

(1)生物安全、生物安全体系文件（1）实验室生物安全管理的方针和目标（2）管理手册（3）程序文件（4）说明及操作规程（5）安全手册（6）记录（7）标识系统《实验室生物安全通用要求》GB19489-20087.416体系文件（1）实验室生物安全管理的方针和目标16手册程序文件标准操作规范，标准安全、技术记录、表格、标识第二层次文件第四层次文件第三层次文件第一层次文件实验室生物安全管理体系文件以四层次划分为例17程序文件标准操作规范，标准安全、技术记录、表格、标识第二层次病源微生物，危险品管理18病源微生物，危险品管理18生物危害程度的分级根据对个体和群体的危害性分四级：Ⅰ级：指危害性最低的病毒、细菌、真菌和寄生虫等生物因子；Ⅱ级：指中等危害的生物因子，多为条件致病菌或机会致病菌；Ⅲ级：指能引起个体的严重感染，但不易在人群中传播扩散的生物因子；可用抗生素治疗Ⅳ级：指能引起个体和群体严重感染，难治疗生物危害程度的分级根据对个体和群体的危害性分四级：19《人间传染的病原微生物名录》《人间传染的病原微生物名录》20根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫学病原体筛检的防护标准应该是病原体危害程度分类实验活动BSL级别各类肠道致病菌3类（VC2类）BSL-2各类呼吸道致病菌3类（TB2类）BSL-2各类条件致病菌3类BSL-2乙型肝炎病毒3类BSL-2丙型肝炎病毒3类BSL-2爱滋病病毒2类BSL-2梅毒螺旋体3类BSL-2根据以上实际情况，临床微生物实验室及免疫学病原体筛检的防护标21

危险物品共分为九大类第1类爆炸品第2类气体第3类易燃液体第4类易燃固体第5类氧化剂和有机过氧化物第6类毒害品和感染性物质第7类放射性物品第8类腐蚀品第9类杂项危险品22危险物品共分为九大类第1类爆炸品22实验室生物安全危害23实验室生物安全危害23（一）、实验室生物安全事件（二）、气溶胶与实验室感染24（一）、实验室生物安全事件24（一）、实验室生物安全事件

前车之鉴1、美国CDC医务人员感染HIV数据统计25（一）、实验室生物安全事件

前车之鉴1、美国CDC医务人员感2、我国实验室生物安全事件事例

中国CDC实验人员感染非典病毒事故2004年4月中国CDC病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病毒实验时感染sars病毒。事故调查：事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活的sars病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起。

台湾实验人员感染非典病毒事故2003年12月台湾一位实验人员在P3实验室做病毒实验时，因清理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒。

浙江省中医院一名医师因违规操作，致5名治疗者感染艾滋病病毒2017年初，浙江省中医院一检验科主管技师因操作“封闭抗体治疗”服务项目中淋巴细胞的收集、提纯时，严重违反“一人一管一抛弃”的职业操作“铁律”，多次使用同一根吸管交叉吸取、搅拌、提取所操作批次人员的淋巴细胞，致5名妇女感染HIV病毒，其中两人已怀孕。2018年5月28日，杭州市上城区法院于2017年12月12日判决该名医生犯医疗事故罪，判处有期徒刑二年六个月。

（一）、实验室生物安全事件262、我国实验室生物安全事件事例中国CDC实验人员亲切握手--热烈交谈--粗心与意外--实验室感染途径穿白褂到处走戴手套随意开手柄台面/器皿不清洁不做善后工作清洁区与污染区不分针刺、器皿破碎、离心、穿拖鞋空气传播手口传播无知最危险--27亲切握手--实验室感染途径穿白褂到处走针刺、器皿破碎、离心、（二）、气溶胶与实验室感染

相关文献报道：对3921例实验室相关感染统计分析结果发现，已知原因的实验室感染只占全部感染的18％，不明原因的实验室感染却高达82％。对不明原因的实验室感染的研究表明，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。28（二）、气溶胶与实验室感染28生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别，也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。气溶胶的特点29气溶胶的特点29可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作

30可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作303131微生物气溶胶的控制实验室空气传播与感染主要有三个过程：一是微生物气溶胶的产生二是微生物气溶胶的扩散三是微生物气溶胶人体暴露和吸入因此，要控制或减少实验室空气传播和感染，要有相应得生物安全措施，以控制实验室微生物气溶胶感染的三个过程。32微生物气溶胶的控制实验室空气传播与感染主要有三个过程：32微生物气溶胶的控制安全操作规范和改进操作过程和操作技术，尽量避免操作失误。例如：用冷却接种环沾取菌液进行接种------气溶胶减少效果可达91%。33微生物气溶胶的控制安全操作33使用生物安全柜

各种产生感染性气溶胶的操作尽量在生物安全柜内操作。正确使用生物安全柜，以有效地减少实验室获得性感染和由于气溶胶暴露而导致的培养物的交叉感染，并能保护环境。34使用生物安全柜34个人防护与实验室通风系统实验室工作人员在进行微生物检验时，应进行个人防护。操作时应穿戴防护服、口罩、面罩、帽子和手套。对实验室以外区域应形成一个相对密闭的系统，对实验室内部则是一个气流定向流动的系统，清洁区、缓冲区、低污染区、严重污染区，每个区域之间保持一定压差，防止空气倒流。35个人防护与实验室通风系统实验室工作人员在进行微生物检验时，应做完的标本可以这样处理！36做完的标本可以这样处理！36实验室生物安全防护37实验室生物安全防护37实验室生物安全的目的意义不同生物安全等级实验室的介绍安全防护的基本要求防护设备设施个人防护用品医疗垃圾处置38实验室生物安全的目的意义38实验室生物安全的目的意义

实验室生物安全的目的意义39（一）不同生物安全等级实验室的介绍

40（一）不同生物安全等级实验室的介绍

40BSL－1实验室41BSL－1实验室41BSL－2实验室42BSL－2实验室42BSL－3实验室43BSL－3实验室434444BSL－4实验室45BSL－4实验室45BSL－4实验室46BSL－4实验室46（二）安全防护的基本要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在进行可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。在处理完感染性实验材料后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，必须戴合适的安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。47（二）安全防护的基本要求在实验室工作时，必须穿着合适的工作服严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。（二）安全防护的基本要求48严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。（二）安全防护的基本生物安全柜压力蒸汽灭菌器可移动紫外灯红外加热灭菌器酒精灯洗眼冲淋装置（三）防护设备设施49生物安全柜（三）防护设备设施495050生物安全柜主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸.保护操作人员-负压保护周边环境-HEPA可以保护样品-层流51生物安全柜主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸.51生物安全柜实验室操作都可能产生感染性气溶胶。直径小于5μm的气溶胶、直径为5～100μm的微小液滴亦可能产生吸入或交叉污染工作台面的其他材料。正确使用生物安全柜—将有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。52生物安全柜实验室操作都可能产生感染性气溶胶。52CLASSII二级生物安全柜层流负压柜

CLASSII级生物安全柜适用于1、2、3级生物安全水平的实验。它们可以安全的保护样品、人员和环境。CLASSII级生物安全柜根据结构以及气流分配的不同，主要是外排气流，分为：

A型（30%排在实验室内）

B型B1（70%接管道外排）

B2（100%接管道外排）

B3（30%接管道外排）HEPA（高效微粒子空气，能99.99%地去除0.3微米以上颗粒)

53CLASSII二级生物安全柜层流负压柜53生物安全保护的不同产品区别54生物安全保护的不同产品区别54在生物安全柜上工作理想的工作台摆放原则（清洁→污染区）

在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行

55在生物安全柜上工作理想的工作台摆放原则（清洁→污染区）55在生物安全柜上操作避免使用明火，用适当的灭菌措施避免使用干扰安全柜内层流的实验手段如使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理安全柜必须处于操作状态时，才能彻底消毒内壁明火：

在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中应避免使用明火。

--使用明火会对气流产生影响

--特别在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险

--在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。56在生物安全柜上操作避免使用明火，用适当的灭菌措施明火：56安全柜的维护保养

用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥定期抬起工作面清洁下面的区域；洗净抹布每天关机后，打开安全柜内部的紫外灯消毒60分钟安全柜每年需要进行性能检测第三方机构（个体防护能力、样品保护能力、交叉污染防护能力）57安全柜的维护保养用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥57淋浴装置和应急消毒喷淋装置

1、规定：--BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置。--BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。

2、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒。喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。应急消毒喷淋装置。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导。58淋浴装置和应急消毒喷淋装置1、规定：58（四）个人防护用品

护目镜口罩、帽子

防护衣(实验服、隔离衣)

手套鞋套59（四）个人防护用品护目镜59

个体防护的配备原则BSL－1实验室：工作人员在实验时应穿工作服，戴医用口罩。工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。60个体防护的配备原则BSL－1实验室：60个体防护的配备原则BSL－2实验室：除符合BSL－1的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。61个体防护的配备原则BSL－2实验室：616262正确使用手套

1、手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护。

2、手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，将其浸入水中观察是否有汽泡来检查手套的质

量。3、手套的使用：

a）一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室），

b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和BSL-3实验室）应该佩戴两副手套。乳胶手套

聚脂手套63正确使用手套

乳胶手套聚脂手套63正确使用手套

c）在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套

并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手

套继续实验。d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖。

4、手套的清洗和更换：a)使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。b)不得戴着手套离开实验室区域。64正确使用手套c）在操作过程中，外层手套被污染，立即用戴手套注意要点:

1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；

2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部。65戴手套注意要点:

1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并

脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。66脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,（五）医疗垃圾处置黄色垃圾袋——医疗垃圾黑色垃圾袋——生活垃圾红色垃圾袋——放射性垃圾黄色锐器盒——损伤性垃圾67（五）医疗垃圾处置黄色垃圾袋——医疗垃圾67医疗废物分类感染性废物病理性废物损伤性废物药物性废物化学性废物68医疗废物分类感染性废物68感染性废物特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。常见：1、被病人血液。体液。排泄物污染的物品，包括：棉球、棉签、引流面条、纱布及其他各种敷料；一次性使用卫生用品、一次性使用医疗用品；一次性医疗器械；废弃的被服；其它被病人血液、体液、排泄物污染的物品。2、医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾。3、病原体的培养基、标本和菌种保存液。4、各种废弃的医学标本。5、废弃的血液、血清。69感染性废物特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医病理性废物特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。常见：1、手术及其它诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。2、医学实验动物的组织、尸体。3、病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。70病理性废物特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体损伤性废物特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。常见：1、医用针头、缝合针。2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。3、载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。71损伤性废物特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。71药物性废物特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。常见：1、废弃的一般性药物，如：抗生素、非处方类药品等。2、废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括:致癌性药物，如环孢霉素、环磷酰胺等；可疑致癌性药物，如:顺铂、丝裂霉素、阿霉素等；免疫抑制剂等。3、废弃的疫苗、血液制品等。72药物性废物特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。72化学性废物特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品。常见：1、医学影像室、实验室废弃的化学试剂。2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。3、废弃的汞血压计、汞温度计。73化学性废物特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品医疗废物严格按照分类分别置于黄色有警示标识的防渗漏、防破裂、防穿孔的专用垃圾袋/盒中，并贴好标签。74医疗废物严格按照分类分别置于黄色有警示标识的防渗漏、防破裂、医疗垃圾由卫生员收集，并填写相应医疗垃圾收集处置登记本，再由指定的人员转运至医院医疗垃圾储存处。微生物培养基、鉴定药敏卡、菌毒株等医疗垃圾移交前需进行预处理（高压灭菌）血液、血清以及体液等标本移交前需用有效氯2000mg/L的消毒液浸泡30分钟以上。针头、玻片等损伤性垃圾要放入黄色锐器盒中。医疗垃圾的收集处置75医疗垃圾由卫生员收集，并填写相应医疗垃圾收集处置登记本，再由实验室生物安全

基本操作规程

76实验室生物安全

基本操作规程

76

1、实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作；

2、实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作；

3、实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。

4、三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。

一、实验室工作人员的资格和培训

1、实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进77二、Ⅰ级生物安全防护实验室安全操作规程1.禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入。2.接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。3.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。

4.以移液器吸取液体，禁止口吸。5.制定尖锐器具的安全操作规程。6.按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。

7.每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒。8.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。9.制定有效的防鼠防虫措施。二、Ⅰ级生物安全防护实验室安全操作规程1.禁止非工作人员进入78三、Ⅱ级生物安全防护实验室安全操作规程常规微生物操作规程中的安全操作要点

1.同一级生物安全防护实验室安全操作规程1-9。2.实验室入口处须贴上生物危险标志,内部显著位置须贴上有关的生物危险信息,包括使用传染性材料的名称,负责人姓名和电话号码。三、Ⅱ级生物安全防护实验室安全操作规程常规微生物操作规程中的79四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全操作规程1.进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室或动物房内工作。2.实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要的免疫、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。

3.工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。4.并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理。

5.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作。6.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。7.严格遵守下列规定，防止利器损伤：四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全80四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全操作规程7.1除特殊情况(肠道外注射和静脉切开等)外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。

7.2尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放人防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。

7.3

尽可能使用无针注射器和其他安全装置。

7.4禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。

四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全81四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全操作规程8.培养基、组织、体液及其他具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒灭菌。9.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。10.人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。11.禁止将无关动物带入实验室。四、Ⅱ级生物安全防护实验室

特殊的安全82五、样本运送非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送应由专人负责，专车运送，运送人员应经过培训取得相关资质，不得通过公共交通工具运送，运送过程应采取相应的防护措施。运输过程中发生意外状况，运送单位、运送人、接受机构应按国家有关规定，采取必要的应急措施。五、样本运送非高致病性的病原微生物菌（毒）种和生物样本的运送83六、生物安全柜操作注意事项生物安全柜运行正常时才能使用。生物安全柜在使用中打开的玻璃观察挡板不能超过规定高度。安全柜内应尽量少放器材或标本，不能影响后部压力排风系统的气流循环。安全柜内不能使用明火，否则燃烧产生的热量会干扰气流并可能损坏过滤器。所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。尽量减少操作者身后的人员活动。操作者不应反复移出或伸进手臂以免干扰气流。不要使实验记录本、移液器以及其它物品阻挡空气格栅。在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行2～3分钟。在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。六、生物安全柜操作注意事项生物安全柜运行正常时才能使用。84七、离心机内破损样本的处理若离心时发生试管破损，应立即关掉离心机电源开关，三十分钟后打开离心机盖。如在离心机停止时才发现试管破损，亦需再关闭离心机盖三十分钟。必须穿工作服，戴口罩、乳胶手套，小心把破损试管移出离心机，可用镊子检起破碎的玻璃。破裂试管、玻璃碎片、离心机室，必须用75%的酒精消毒，离心机消毒不可用次氯酸盐溶液，以免造成离心机损坏。七、离心机内破损样本的处理若离心时发生试管破损，应立即关掉离85八、暴露事件的紧急处理

“暴露事件”是实验室人员在执行本职工作时与潜在传染性物质的接触（眼、嘴、其它黏膜、经吸入方式进入呼吸道、破损皮肤、或非肠道）。遭到已知的或潜在暴露事件的工作人员必须按照以下相应暴露事件的处理措施，尽快脱去手套并处理被污染部位。八、暴露事件的紧急处理“暴露事件”是实验室人员在执行本职工861、皮肤感染

用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。必要时进行医学处理。1、皮肤感染用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。872、眼、面部飞溅

用冲眼器冲洗或温水冲洗感染部位15分钟。必要时进行医学处理。2、眼、面部飞溅用冲眼器冲洗或温水冲洗感染部位15分钟。883、气溶胶暴露

屏住呼吸迅速离开房间，小心脱去个人防护用品。当脱去个人防护用品时必须确保个人防护用品暴露面朝里，用皂液和水仔细洗手，实验室排风（通风）至少1小时。3、气溶胶暴露屏住呼吸迅速离开房间，小心脱去个人防护用品。894、Ⅰ级生物安全实验室溢出通知在这一区域的其他人预防污染。穿戴手套、实验衣和面罩，用纸巾覆盖溢出物，把浓缩的消毒剂倒在溢出物区域周围并与溢出物混和，并维持适当的接触时间。用镊子捡起一些玻璃碎片并放在生物危害高压灭菌袋内待净化后丢弃。用皂液和消毒洗手液洗手。4、Ⅰ级生物安全实验室溢出通知在这一区域的其他人预防污染。905、II级生物安全实验室溢出的处理

迅速离开