转基因动物与动物生物反应器教学课件

第九章转基因动物与动物生物反应器■转基因动物■转基因动物培育技术转基因动物的应用动物乳腺生物反应器转基因动物Q转基因超级鼠1982年,英国的《自然》杂志发表了一篇文章:有两个美国实验小组利用转基因技术,将大鼠生长激素重组基因导入到小鼠受精卵中,培育出具快速生长效应的“转基因超级鼠”。转基因鼠比与它同胎所生的小鼠生长速度快2~3倍,体积大一倍。转基因动物(transgenicanimal)的概念指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染色体内,外源基因与动物基因整合后,随细胞的分裂而扩增,在体内表达,并能稳定的遗传给后代的动物即指基因组中整合有外源基因的一类动物整入动物基因组的外源基因被称为转基因(transgene)。转基因技术克服了物种之间的生殖隔离,实现了动物物种之间遗传物质的交换和重组建立转基因动物时,外源基因可能只整合入动物的部分组织细胞的基因组,也可能整合进动物所有组织细胞的基因组中。我们把只有部分组织的基因组中整合有外源基因的动物,称为嵌合体动物(mosaicanimals嵌合体动物只有当外源基因整合进去的"部分组织细胞"恰为生殖细胞时,才能将其携带的外源基因遗传给子代;否则,外源基因将不能传给子代。动物所有细胞均整合有外源基因,则具有将外源基因遗传给子代的能力,通常被称为转基因动物。般用胚胎干细胞法或逆转录病毒载体法制备的第一代转基因动物均为嵌合体动物,而显微注射法得到的第一代转基因动物中,也有20%为嵌合体动物。当外源基因在转基因动物体内表达,并培育出其表型与人类疾病症状相似的动物模型,则称其为转基因动物模型Gordon等首次成功地将含有压SV和SV40DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内,得到了带有这种外源DNA顺序小鼠

1982年,Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。到目前为止,人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物0从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传肿瘤学、免疫学等的基因研究,还涉及生物药物的研究,基因治疗的开发研究等目前建立转基因动物的主要策略有两种:一种是让转基因在动物体内过度表达的方法。最常用的是显微注射方法。转基因可用基因本身的启动子,也可拼接组织特异性表达的外源启动子可转入单基因,也可转入双基因另一种方法是让基因在体内灭活,丧失其功能,即基因敲除技术。这就是近年来发展的用胚胎干细胞进行基因打靶技术,以产生基因缺陷的转基因动物。转基因动物的制作方法受精卵雄原核显微注射法胚胎干细胞(ES细胞)法3、逆转录病毒感染法体细胞核移植法5、精子载体法1、雄原核显微注射法

以单细胞受精卵为靶细胞,利用显微注射技术将构建好的载体DNA直接注射入受精卵的雄原核,再将接受注射的受精卵移入假孕母体输卯管继续发育获得转基因动物个体

目前应用较广泛,最早最经典的方法ExpressionofExogenousGenesPromoter-todriveTransgene-expressingcDNAforgeneofinterest,withorwithoutmutations,orC.tIssucontainingsequencesfromotherorganismsetc.specific,ortime-specembryos,ingcontaini