第八章蛋白质工程

第八章蛋白质工程

湖南师范大学生命科学学院

袁婺洲本章目录蛋白质工程的理论基础蛋白质工程的理论基础蛋白质结构测定与结构预测蛋白质工程的关键技术定点突变定向进化其他技术蛋白质工程的应用及实例定点突变与蛋白质药物工程：胰岛素定点突变、定向进化与工业用酶：枯草杆菌蛋白酶等结构域的拼接与金属硫蛋白工程抗体工程

第一节蛋白质工程的理论基础蛋白质工程的概念蛋白质的结构蛋白质结构预测一爷蛋喜白刃质羞工挂程例的患概朽念基送于伞对煤蛋馒白皇质闯结博构俱和候功费能顶的妨认蛋识继，扒进摸行章分追子鸟设恒计颠，齐通胃过列基陕因贫工谦程凭途左径做定耳向按地废改百造旅蛋哨白吉质铲或精创军造漏合胞乎眯人神类仆需粥要腹的僚新牙的让突阔变愚蛋青白虽质遣的轮理萍论维或胞实幼践构活剂动退。（1）脸确午定慨蛋居白因质职化状学阳组春成香、迫空殖间缩慧结降构播与腾生乔物么功警能蹈之珠间虎的阔关障系巡寿；（2）朋通墓过圈定治点镰突呢变渡、唤定妖向挣进也化猫等肚技葬术招，付合求成眠具打有送特胞定狐氨温基摇酸准序情列鸭和兰空攻间旋结怠构惕的恶蛋厕白添质开。二灯蛋俩白糠质稀的挤结技构一坝级即结斯构：耻多骨肽旅链云的物氨滔基富酸咏残棉基终的表排迷列序顺祝序二熄级拴结教构：满多搜肽俩链并借公助隔于学氢犁键焰或冻离洗子谎键什沿趁一痛维践方济向居排镇列良成胸具糠有溪周码期汉性少结暖构仁的比图挺象伍。三笑级暂结油构彩：指肥整岔个番蛋泰白在质孤多盘肽凤链比在世二除级酷结它构呢的恭基匙础炎上半，苏侧捉链块基比团筒通锋过盖次镇级教键起或犬疏缘瑞水怖键拔的抓相请互爹作眼用院进考一佣步梦盘尼曲宝折格叠船，摆形销成困具探有童一狮定毕规剂则拌的制空迅间昂结胡构弓。四摸级薯结砍构：艺由杯两羡条嫌以反上棉的伐多摊肽砖链买组撞成叨的呼蛋愈白蚁质泄，狼多扯肽扁链锤之演间参没欣有吼共湿价适键杯连渔接碰而喘是扰借底疏毅水鉴作丧用领等劝次昼级聋键拿缔肯合铃在次一仍起誉形简成穴的馅高达级桂空老间物结箭构洋。氨芝基行酸絮的喝聚晨合篮形帆成考肽教链肽赢链周的组空巾间盲结帆构吨单些元:二枪硫吴键撑的庙折限叠肽每链贪的房诚空歪间践结守构贫单续元:氢坛键清的泉折善叠肽姓链樱的咽空搏间炼结侄构悼单燃元:离乐子私键弊的内折夜叠肽床链禾的叫空鼓间眠结政构茂单诵元每舌四孔个迎氨仰基丛酸妖残康基瞧间仙的氢辟键屋构妨成蝴多级肽岗链a螺怨旋肽顷链洞的庸空援间凶结腾构竟单耀元由嫩不射同效多赏肽招链纳上黄氨搂基兵酸屑残介基烧间污的泪氢诸键飞构筝成啦多欺肽喉链b折扑叠肽仙链涉的察完妖整夜空酷间称构筐象蛋直白西质莫结透构斯与垄功础能美的宴关的系蛋轮白奋质榨一枣级凭结竭构原是斑空积间末结殖构内的妇基咸础挎，拨而类空寸间尊结杆构坛决虑定什了充蛋绑白显质速的叠功牙能茄。结建构眯域啦：蛋鱼白鹅质辽多洪肽伐链哈上孙一运段保在椒三挡维驳结莫构绣上梳可遮以卷明朋显乎区雷分某和算相块对烛独抱立铃并轧具冻有企一种定柔生津物奋学筹功帖能复的颂基针本添单酬位卸。模杀体今（尽基柱序捕）钥：组姑成害结押构逗域殖的冶基节本掘二肢级套结胡构嚷单祥位蛋隐白窃质后的出加益工恶修押饰:磷称酸苍化醋修桐饰蛋抽白粗质湾的膨加绵工枣修垃饰:羧廊基汗化磨修让饰几返种狮参轮与摘凝忍血鞠的掘蛋摘白恐因亏子灾（刃如V面I怀I短I和I代V因蒸子戴）热需无要鲜在藏其谷客酰煤胺随侧代链纺上栗的g播-羧峡基岸化围修远饰后负，陡才底能由拥旗有浓蛋纺白匪酶润的畏活善性记，反这授一济修贼饰躺过域程扭依价赖未与维厦生谈素K的寒存戒在。蛋宇白升质夺的蛙加阴工厉修松饰:甲洞基暗化强修次饰肌仇肉凡中拉的星一牢些炭蛋渔白宪质雨以无及庭细庭胞妥色吃素C中樱的L家y灭s会努受援到据单主甲拣基悼和制二姿甲乏基叮化跨修迟饰添；壶钙晃调穴蛋村白股会庸受召到壤三弹甲归基战化新修修饰背；凶所罢有C末寻端馋以G膛l怎u结广尾裹的矿蛋游白旦质大，锁其G露l以u会受等到乔甲疏基窜化明修情饰跟。蛋茧白猾质复的屡加尤工翼修陪饰:N费-糖庙基瓶化O掩-糖条基堡化糖坚基石化诊修营饰蛋疏白秤质肯的真加仅工坐修贷饰:其芝它姻类传型绘的肿修如饰三恨蛋桌白书质谎的振结暖构收预射测一越级指结线构秋：柿测伟序咏仪举与罗数愚据洒库高杨级表结茅构交预弦测码：X射丢线嚷晶起体贱衍辰射骂法核姻磁攀共按振镇法扩（N这M透R）蛋惭白绍质溉一敞级榆序息列禾数荡据絮库P引I壮R：由霞国虫家弯生行物装医堪学伤研柿究大基惹金顺会惨（N徐B膝R现F）辜建晒立M花I娇P弱S：M羊a商r誉t酒i笋n如s沿r宰i烂e崖d的下蛋美白抱质枪序钓列坚研泛究悲所汉收品集得和炸处堂理形的历蛋吸白及质跑序筐列俱数酸据S辱W解I颗S判S池-桑P扣R网O沈T：蛋余白络质愿序闯列鬼数膛据休库促，股由G仍e抛n呜e劫v躁a大假学禾和E萍M含B影L共躺同帐合粒作伤开踢发T支r站E罢M旧B志L：翻是译妻的E岂M谁B歌LN侦R斥L债-玻3你D：除书序袖列往信艇息迷外针，勇也欺包艘括和对浩二舌级死结婆构甘，思活匆性依位泥点黄，育结赌合咐位覆点沈和街修何饰醉位独点伶等网信个息乌。第张二殃节券蛋犹白陕质塞工合程莫关洁键床技宪术定嘴点趁突浴变定绒向贤进尘化其雷他胶技耐术一崭定那点稍突照变寡婚核伸苷阀酸每引期物络介可导嗽的茅定垃点煌突木变P压C买R介骨导腔的肢定赏点径突零变盒吉式纹突总变遗骄传顾信统息布传摔递忧的版中倍心皆法勿则D朋N烫A匆（基捏因岛）D杨N拼A缘瑞（基蓝因壮）m叨R苹N当A蛋慢白铺质生锣物牌代郊谢殊物趟质复浴制转施录翻添译代吗谢基除因弹组体学转炊录握组诊学蛋列白智组架学代臣谢额组毁学逆镜转垄录中锅心闸法发则1珠.寡治核艺苷井酸裤引殃物暗介者导渣的坏定项点像突加变用僻含遮有突促变渠碱绸基馅的雅寡榴核削苷晃酸蹲片祝段纵作抱引酬物，磨在等聚辣合盒酶悼的钢作跑用岩下绵启炮动D沾N底A分苗子狭进膊行疯复脏制档的待过救程寡工核惩苷星酸们引欧物斥介窜导乞的资定预点证突混变愁的K辟u滤n佩k若e职l改已进茶：载刃体讲：R核F－M胶1趣3茶D猪N选A载雅体菌霞株胶：d里U坝T乌P酶妇和N－攀尿蹈嘧梨啶执脱念核源苷艘酶塞双蜂缺桑陷蜘的估菌耻株晓。原庸理心：d岁U施T劳P酶散缺打陷沟导捷致罪胞沸内d逼U行T植P上党升匙，开部抛分脚取棉代d惕T雅T蛛P进附入脸新煤生D涝N呀A链稍中桶，跟使日得M隔1刮3单秋链D毙N图A大研约1％弃的T被U取叠代忘。其另队一榴链玻合侍成翻后夸，伤将迷双指链D提N胜A导蒙入超正归常茎大觉肠洞杆裕菌区，N－涉尿炭嘧滨啶撞糖领基蜂化萍酶辰除抽去D悼N蹦A链伶上冲的嗓尿呢嘧场啶军碱普基甲，肉原M摆1跌3模饲板芒链撞被平降么解依，演突板变帝链栋因舞不圣含U被范保刺留抛下遗来瞎。2稿.P策C潮R介凳导铅的厉定撤点塘突扭变3石.盒糖式待突出变利率用到一摧段人怪工掩合蕉成跪的徐含睡基占因累突磨变冈序芦列设的驼寡皆核叫苷茄酸缘瑞片饼段，茄取色代喇野狠生休型骂基道因泊中源的绕相耻应控序性列围。桌突两变仗的往寡洒核市苷日酸荷链建成际对主存韵在兔，征不润会油出上现貌异再源迈双罗链部的烟情虏况奔。秧全寨部衰转杆化霸质乔粒挡都锯是践突科变迅体滋。二成、悲定己向炒进杯化先退随条机扒突驶变遇，樱再底定剧向将选秘择默。如云在慕待轿进税化妹酶毫基律因书的P鲁C苍R扩狠增徐反租应扛中侦，逮利愿用T批a肃q酶呼不胖具爽有3－5端阅纠规错美的沾功厌能冰，去配绳合括适仍当坛条绳件刑，茧以障很扩低界的秀比脏率溪向皱目贯的肥基阿因俭引炭入炊突枝变育，布构技建请突落变眠序辣列烤库牙，沙再更凭寻借灵定傲向扁的塔选栗择缩慧方肥法欧，革定脊向智选反出河所馋需覆性拒质管的壳突辟变益酶搁。1珍.易辱错P牢C猫R在P米C税R反贫应面中音，躁降即低一宜种d割N结T矿P的泰含点量，库使P违C酷R容润易惧出蓄错顾，枣达迹到洒随教机市突隐变反的父目被的延。2惑.头D筹N倚A改宫组用D隆N婚A薯a爸s云e并I先遭将仆一棉个D释N轧A片体段摄消宴化眼成靠许四多饭小却片蛮段荒，悠然煮后不压加旷引饰物禽进棕行P虽C念R，若使忽得屋消嘴化辨后D推N搂A小同段纤之度间镇重急新够按极多逆种鸦组活合竿方底式针连乎接育重言组挖，直然跌后佳利超用前原年来帮整家片誉段D只N尾A两窑端熊的近引臭物蹈进窑行加袜引插物获的P武C宇R扩顶增，港以械便半得鲜到列一爪系柱列图改曲组闹后垫的选突司变D稿N那A序猜列斯。3末.体朱外迎随半机则引栏发帜重客组以单叶链D普N岸A为惭模杠板，随语机坚引萌物椒扩抵增样，将嚷产料生触大止量质与浊模发板凭不纽奉同便位闷点控互锐补静的摆短预的D沈N兆A片晶段身，厌由朵于促碱海基哑的软错土配长和惕错影误构引惯发也，室这温些叫短D污N灶A片挽段锻中隆会翅存扯在条一撤些消点谋突渠变棕。第祸三骗节奶蛋喘白荡质色工示程厚的五应公用雨实丝式例胰埋岛熔素枯杯草贯杆忙菌侵蛋击白满酶金沙属朵硫曾蛋勤白抗辽体1集.胰脂岛体素约的窜结垃构抚及民其嫁生狸物稍合兄成SSSSCNSSB肽春（鸦3村0探）C肽变（奏3牺1元）A肽环（性2渡1报）RRRKSSSSCNSSNC高狗尔脸基汤体呈内魔的酷特与异览性鬼肽卸酶NCB肽C肽A肽信公号超肽兽酶信秤号踏肽胰福岛兵素阶的障改荣建终工益程速寺效映胰震岛星素咐：S辅e辅r任B嫩9叹A对s储p寄/染T淘h椅r桐B止2彩7挑G灶l捕u，拜有尿利您于详降脸低捡胰渔岛榨素栗的互缔堂合烫作威用杠，洋进岭入惜血遭液拆的钓吸档收嚷率兼比阴天掉然表胰兄岛宇素呀提稿高子了3倍楼。长缸效奋胰秧岛择素傍：A揪s系n璃A滔2芝1印G汁l幅y贩/俩T脖h景r羞B稿2记7按A无r因g充/听T可h蛾r杏B塌3域0狮T温h伞r酰豪胺咳，躲半烟衰杂