革兰阴性需氧和兼性厌氧性杆菌鉴定-其它苛养菌（微生物检验课件）

其他革兰阴性苛养菌嗜血杆菌属鲍特菌属军团菌属布鲁菌属一、嗜血杆菌属G-小杆菌，多形性有毒菌株形成荚膜培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培养基）

X因子－－血红素

V因子－－辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ菌落光滑、无色透明、露滴状CO2培养“卫星现象”卫星现象流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。根据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强所致疾病

原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童

继发感染：鼻窦炎等，多见于成人

敏感药物：氨苄西林、阿莫西林首选微生物学检查

标本（脑脊液、痰、血液、脓液）涂片染色镜检分离培养鉴定试验结果报告G-性杆菌多形性“卫星现象”检出流感嗜血杆菌鉴定依据革兰阴性小杆菌、多形性培养采用巧克力色培养基，CO2培养血平板上有“卫星现象”X、V因子需求试验菌名生长需要X因子V因子流感＋＋副流感－＋检验方法X因子V因子需要试验流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌

二、鲍特菌属G—小杆菌，两极浓染，有荚膜和菌毛，多无鞭毛和芽胞专性需氧，营养要求较高，常用鲍—金培养基进行培养，生长缓慢，3-5天细小灰色不透明、带珠光完全溶血菌落致病物质包括荚膜、菌毛及多种毒素百日咳毒素丝状血凝毒素腺苷酸环化酶毒素气管细胞毒素皮肤坏死毒素细菌附着纤毛上皮细胞，引起其坏死脱落，使其运动受抑制，促进黏液分泌，但不能及时排出，局部炎症、缺血、坏死，引起剧烈阵发性痉咳传染源：早期病人、带菌者传播途径：飞沫传播潜伏期：1-2周病程分三期：（儿童易感）卡他期：低热、轻咳，1-2W（传染性强）痉挛期：阵发性痉咳，吸气吼声，10-20次/天（1-6W）恢复期：阵咳减轻，可有继发感染，肺炎、中耳炎等实验室标本采取用咳碟法病后牢固免疫力白—百—破三联疫苗（DPT），治疗首选红霉素三、军团菌属绝大多数病例由嗜肺军团菌引起，是引起军团菌病的病原体首发于1976年的美国一次军人聚会，故称作军团病1982年,在我国南京首次证实了军团菌病。形态染色革兰阴性，但不易被着色杆菌，形态有多形性Gimenen染色，菌体呈红色，背景为绿色不形成芽孢，无荚膜有端生或侧生鞭毛

嗜肺军团菌革兰染色培养特性营养要求高专性需氧需2.5～5％CO2生长缓慢。3-5天常用培养基及菌落特征

BCYE培养基：灰白色、圆形光滑湿润菌落

F-G培养基：针尖大小、紫外线下发出黄色荧光军团菌菌落形态(BCYE琼脂培养基)抗原结构Ｏ抗原：具有型特异性军团菌病约90%的是由嗜肺军团菌所致,已发现15个血清型，其中以Lp1血清型最常见,Lp6次之。抵抗力分布广泛、抵抗力强水中存活时间长，蒸馏水100天，下水道污水可存活一年军团菌病的主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统

定期清洗空调预防军团菌病临床意义致病物质：内毒素、外毒素、侵袭性酶传染途径：呼吸道（吸入含有军团菌的气溶胶）所致疾病：军团菌病肺炎型非肺炎型（类似感冒）免疫性：感染者血清中出现特异性IgG、IgM抗体大环内酯类、喹诺酮类有效。对青霉素、头孢类无效微生物学检查标本（痰、支气管分泌物、血液、）涂片染色镜检（Gimenen染色）分离培养（BEYE琼脂）鉴定试验结果报告形态染色菌落特征氧化酶、触酶荧光抗体染色等血清学试验检测指标：检测患者血清中特异性抗体方法：ELISA意义：检测特异性IgM：诊断军团菌病检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查四、布鲁菌属羊布氏杆菌（主要）牛布氏杆菌猪布氏杆菌犬布氏杆菌（少见）引起布鲁菌病（波状热）可引起人畜共患病我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，以羊布鲁菌最常见属细胞内寄生菌生物学性状1、G—短小球杆菌，无芽孢，无鞭毛；2、需氧菌，初次分离需5-10%CO2，营养要求较高，常用肝浸液培养基。生长较缓慢，5-7天微小灰色菌落，无生长30天报结果，不溶血。3、生化反应多数氧化酶、触酶：＋氧化分解葡萄糖多数还原硝酸盐分解尿素（脲酶活性：猪>羊>牛）4、抗原与分型，A抗原和M抗原，不同菌含量不同可供鉴别菌种A抗原：M抗原羊布鲁菌1：20牛布鲁菌20：1猪布鲁菌2：15、抵抗力强

内毒素——致病作用（发热、白细胞↑、肝脾肿大等）由于反复菌血症，使病人热型呈波浪状发热时，血培养阳性率高（70%）易转为慢性，引起全身迁延性病变，较难根治。7.免疫性:胞内寄生菌，以细胞免疫为主6.致病物质：荚膜、侵袭性酶和内毒素微生物学检查及防治原则分离培养与鉴定