第二章-基因工程的酶学基础

第二章基因工程的酶学基础Enzymes一、限制性核酸内切酶第一节限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。

（Restrictionendonuclease）2.性质内切酶主要来源于原核生物即在核酸分子链的内部制造切口的酶。形成5’-P和3’-OH末端自我保护作用3.功能细菌的限制和修饰系统（R/M体系）1.来源由匪寄艰主口控率制毯的限奸制侨和快修显饰励现做象-裹-六-跟2州0世颜纪6智0年各代斑，L弊i棋n正n和A瓦r碍b麻e蹦r发误现(B)(孝K鸟)大商肠斧杆驼菌B大泻肠犹杆刚菌K114×滥1排0—41碰0—4E耀.谊O定.属P成桨斑泻率e漫f躁f捞i检c轿i本e火n窝c狂y定o中f浩p龄l瞎a县t访i申n跨g外提源D骄N呢A自亿身D芹N释A核架酸呜限正制藏性臭核存酸切内亲切祸酶断的石发阳现：切谱酶。E协.c唤o发l携iB含晌有E走c而o放B核羡酸饥酶付和E煤c短o限B甲蒜基部化攀酶当λ火(丧k它)噬伯菌奸体狱侵交染E赞.c研o升l戴iB时惠，犬由旦于汪其D鸡N亩A中糕有E脑c守o束B核轿酸艳酶球特梯异谦识语别广的酷碱斜基前序汁列征，心被欣降协解属掉凶。总而E册.c艇o菠l社iB的D咽N桃A中馅虽侵然门也差存闷在轧这剖种蔽特今异叙序另列止，各但遍可漠在E键c竞o贷B甲驱基粒化蒙酶援的唐作该用看下欧，著催惊化S摊-腺处苷洋甲见硫刮氨屑酸遗（S气A踪蝶M）图将棋甲倒基徐转勇移育给亩限贼制拍酶庸识誉别柴序毒列穿的烫特无定宾碱兽基竖，坑使滤之并甲逢基丝式化惧。E并c肉o鬼B核策酸缺酶必不顽能议识集别披已岩甲骄基忽化床的劣序枕列杨。限莲制—修久饰向的唐酶浪学岂系配统(B)(B)酶拐切娱位矿点不过被刺修矿饰噬词菌痒体D阵N币A被奴切俭割酶盲切逃位械点被恒修却饰基虾因母组D预N穷A不帝被查切逮割Ⅰ遍型壤限咏制轻性摇内玩切闲酶目木前级鉴罩定纹出三登种篇不局同堵类馒型的疮限陶制敬性熄内洲切衣酶档。二柄、奶限竭制别性大内该切避酶逃的持类贤型Ⅱ划型叙限廉制透性答内按切跃酶Ⅲ毫型贫限裹制秒性爹内汗切奥酶I立V型鼠限虽制圾性骡内混切是酶限鞠制合性嘉核峰酸耐内棒切阁酶算的馒类催型顷及点其株主绪要度特昌性特叉性1牧.限页制乳修旋饰缝活津性2厌.内买切痛酶骡的非蛋论白质曲结简构3福.限醒制咱辅印助妄因静子4候.切拨割壶位扯点5吗.特票异旅性炎切肃割6汗.基秤因渔克失隆划中I型双数功斯能捡的限酶3种膨不弹同港亚数基A结T堵P、M芹g2晌+和S唇-腺浪苷如甲凝硫蚀氨毯酸距踪蝶特所异惕性岭位直点5温‘端厨至纪少1挽0拳0芳0梁b倦p不景是锅（晶随烤机叫）无条用I邻I型限蠢制音酶字和杀修肚饰治酶牙分溜开单蚊一壶成朴分M利g2据+位造于违识茎别会位壁点盲上是非僻常件有倒用I深I御I型双举功费能灶酶2种梅亚坊基A晕T剖P、M名g2折+和S扑-腺塑苷述甲慨硫妥氨坛酸特胀异境性屠位趣点3翻‘端2组4昼-装2肝6笋b镰p处是用沃处氧不胃大1匆9欣7检3年H束.遣O吵S少m胡i恒t盾h和D撇.粗N即a纠t舌h第a始n琴s提烘议乳的睁命稠名族系印统地，走命介名孔原轧则抵如变下执：三村、宗限息制妙性除内谣切黑酶摄的泽命隐名用属南名的滋第抛一俊个五字译母妻和种长名的株头舱两护个努字共母文组陵成3个宽字廉母屋的铃略忆语掀表饺示寄娘主郑菌的左物李种坏名萄，怀组跪成瓶酶杜的俊基正本况名投称堂。大痕肠期杆邀菌葡（Es录c字h导e宴r占i毒c待h匠i喝ac欢ol利i）灭用E敢c青o表擦示覆；流南感缩慧嗜蹄血熔菌敞（Ha宁e俭m屡o钩p拴h乓i栏l雁u医si室nf诵l竹u伐e链n验z题a主e）婶用H酿i忍n表谈示2抱.如粱果寄酶需存热在储于速一公种特村殊鸟的绳菌孝株中拢，装则扭将药该负菌用株趟名枯的博第较一纪个冈字运母踏加名在镰基勤本惭名榨称优后织，舟若搏酶尖的洲编倒码锡基焦因准位赞于噬御菌役体渗（到病渡毒演）氧或订质内粒上医，栏则凯用薪一范个尖大剧写器字夫母谁表剖示商此歌染转色昏体鞭外马遗哨传俭成栏分反。如H排i驶ndⅡ：d菌鼓株E俩c急oRI：哨抗猴药傍性R质稍粒3涨.如诵果厚一窃种识特臭殊椒的庸菌淘株详内席有梯几忆种尤不青同躁的嫩限名制栗与害修巡寿复造系清统县，爪用阀罗渗马幻玉字划母末表架示轰该路菌跟株膏中医发照现产某东种饰酶乳的先悔后脏次泪序。如H牲i慰ndⅡ：d菌屡株僵中酸发幼现彻的众第宽二低个馆酶4株.所况有泛的蛇限蓝制旱酶砍，烂除勉以梯上佳名驰称释外捞还灶要远冠饱以系隆统钞名冈称。同限累制东性长内促切峡酶道的群系池统侄命员名饮为R，仿甲带基厚化逃酶巧为M。如R.H颜i飘ndⅢ表毫示昏限乖制煎性呢内休切那酶M.H畜i谦nd较Ⅲ表拴示勾相并应帽的傻甲属基部化遍酶实稀际明应而用朗中级，R常皇被茫省泉略刊。首跑先胶由H乘.役O堵.羡S复m呀i双t闹h和K召.平W象.趋W佩i踩l心c餐o割x在1伴9非7忆0年撒从计流犯感亲嗜俱血基菌镜中票分捉离扎出秧来贱。（1）夜识烧别槐位及点侄序啦列未惰甲俩基势化出修妖饰的双各链D骗N罚A上黎的鞭特白殊刃靶姐序致列体（费多翻数收是盖呈砍典颗型午的哗旋负转抵对郑称近型帖的假回挺文熄结刺构捉）4疫-订6惭b拼p。与D纠N赠A的蔑来省源胳无成关浅，晃即没磨有涝种扩的港特增异窃性。四能.慌Ⅱ欺类挑限溉制沿性智内单切温酶尘的酸基却本广特陪性分钓离赠的弟第丑一食个眼酶怠是H逐i奶nd终Ⅱ稀爽有阅切储割砖限志制记酶绪（r垄a帝r练e臭c千u厉t影t错e骗r）可掏以塑识顺别6个甩以浸上税的粥核称苷撞酸枝序简列歌的绸少苍数瓣的贡限径制令内视切决酶鹿。如N墙o遥tI（G要C鱼G疲G碧C块C正G谣C）某仗些丸限患制睛性扯内点切唱酶谋的业识闹别埋序栽列粱中蹈，膛某万一够个播或初两殿个聋碱著基两并粒非轧严领格败专济一豪。如H后i密nd桨Ⅱ可嗽识将别4种退核懒苷拨酸裂序嫌列艘：Y:生C或TR:寨A或GG脉TY栏RA独C-驰3昏’5偶’脱-EcoRI5’-GAATTC-3’3’-CTTAAG-5’PstI5’-CTGCAG-3’3’-GACGTC-5’

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