基因工程原理第二章DNA重组

基因工程原理PrincipleofGeneEngineering

第一章第一节基因工程原理第二章第二章DNA重组第一部分DNA的组成和结构1丸.券1扇D探N董A须的秤组混成1鄙.雕2同D炎N映A脾的额空棍间挡结锹构线死形爪D锄N滩A艘：环站形靠D朽N弱A斗：1供.联3猫D县N丧A棒复自制半毛保阔留质复烂制岩方狠式复雁制斤起颜始塑位虽点叶（递r咬e涝p警l靠i烤c问a殃t翼i走o吃n青o蝴r攀i串g佳i猫n弟s逢i乘t吃e佛）h股t梁t元p垂:究/创/惯b除i条o对b乔a祸r违.含h妈b宽h抄c论g西z盯.暗c仍n牲/寸A截r冰t眼i切c复l沿e宗/领S勒h堡o事w尿A据r年t喘i林c倘l袋e聪.再a哑s嘱p泛?剑A奸r婚t务i秋c列l脆e丑I妻D但=井2胡0纠8耐7售7原贱核双生蹦物躬D津N趟A迎的牌复财制解邻旋旅酶单男链德结口合垮蛋豆白D朴N全A助拓拥扑银异任构思酶引段物决酶D菌N射A漂聚信合茶酶D妥N狮A宾连吧接摧酶h明t忆t如p村:翅/浴/求b芽i炸o爸b讯a句r针.情h羽b坝h脚c便g拾z科.笼c阻n沸/欠A顽r同t跳i婚c许l寄e并/炒S兰h同o廊w亮A分r津t句i卡c冈l沙e匠.碗a黑s核p评?耀A膨r册t薯i仍c贸l摧e张I火D旅=则2诸0指8惹7映6真团核鱼生扇物慈D钩N合A工的信复深制复蜡制递子从算复魔制驰起搁始蹦点绒开本始可复沉制测出币的弟一协个萝D展N切A督分甚子住或献一唤个粒D听N口A饶片恢段铅的能核关苷泛酸猪序室列严。复板制旧子抚的烘数签量原涛核牵生冻物榴的头染御色善体浆D规N慢A青：包单凉个真象核少生称物倡染滨色予体任D训N然A引：削多筒个质眯粒啊D半N倍A义：格单功个历、独多帐个1台.涉4衰D惜N翅A平转滚录启耗动冰子和转卸录塑区的讯结阻构启茅动殃子：利P中r薯o婶m朋o载t策o啦r铲，纽奉D铃N厘A笨分业子介上忘能六与非R具N夕A秘聚话合鲁酶定结惭合炕并诞形捎成洪转察录裹起挤始葵复怠合蜘体钢的嗽区轮域模，领在参许慎多掘情馆况侮下都，倚还狐包演括难促滩进酒这饿一钞过悼程渡的运调盈节夕蛋避白年的园结庆合喜位所点血。Pribnowbox5’-AGGAGG-3’SD序列S串h津i慌n双e黑-饱D搭a澡l似g脸a待r康n荡o捆s油e汗q利u避e狭n必c庄e写;披S焰D假s暴e胆q以u评e侨n丑c除e1臭9宏7抢4封年亮，施由句J臂.示S潮h嘱i昂n掉e峡和扇L舅.栏D董a涉l偷g块a哲r催n戚o救发讯现S庭D盖序泳列旅：在倚细译菌阁m震R观N厉A限起魂始拐密巡寿码谨子浴A和U届G命上盖游掘1史0狸个谨碱端基惯左届右粥处计，筋有贴一理段辨富者含借嘌成呤萍的梯碱汽基慕序烟列体，防能摘与臭细费菌好1济6很S赢r杯R吨N代A拣3使’掌端帮识般别狗，赖帮歇助通从满起肿始样A淘U鉴G魔处栗开提始稿翻屑译夹。Pribnowbox5’-AGGAGG-3’SD序列1忌.记5文D竞N养A叠转懒录终取止腐子词（墨t风r船a喷n叼s抄c兴r煮i仇p搏t叼i众o扑n铅t凭e冒r费m向i油n培a步t红o隐r赛）终宋止葵子（T姻e舒r丧m症i年n宪a丛t驼o咐r）是诵一乒段栗位杂于垃基南因叼或复操构纵灿组冬末哀端诸的摊D承N醉A彻片奖段哄，隐可灭中径断萍转温录召作古用悄。视原螺核右生卖物冈拥究有错两稠种纤类些型扬的桨终适止啊子范，打包荒括挤：本歉体脾转跌录勉终采止戒子（购I彼n聚t覆r篇i郑n收s采i娘c降t片r兵a骂n千s占c追r汪i投p榜t哀i毫o川n冒t剂e磁r坏m就i戒n家a船t耍o到r楚s疤）李：ρ贿-忌依菌赖选转补录阴终怠止肃子（泄R谎h惩o坝-求d方e顺p盲e岸n跑d睡e擦n陕t锡t认r贡a友n惹s盈c己r载i咸p铃t称i街o碗n貌t满e铃r丛m撞i艺n唐a尾t观o祝r输s况：—葱—申不币依冲赖甩于咐蛋喂白秀质私辅育因请子键就检能专实耐现杨终饿止菊作般用宪。—碎—天依鱼赖怎蛋责白赚辅版因饼子变才悲能纺实堤现堡终个止瞎作讨用榨。弹这碗种拔蛋致白孤质务辅理因撒子峡称宣为辣释夺放霸因讨子父，她通窃常尿又丝式称楼ρ店因灯子厚，崖与姨R扔N铸A瓦螺梁旋膊酶叨蛋蜓白朋复徐合边物勇。两胳类刊终妻止况子魄有阿共狼同叉的梅序葱列行特傲征搏：羞在叹转陶录抖终苦止范点碰前授有冰一键段回循文蒜序壮列。富叨含叮G覆C回山文劝序绕列：辽双摔链决D戚N迟A富中怨含摧有充的宪两正个持结型构歼相本同但、冲方凉向俭相絮反例的辆序辛列拍称押为完反亩向矩重解复讯序僚列础，任当符该潮序旦列赢的挤双罩链疮被等打刑开捐后典，寨可躬形扫成借局眨部破“镇十愚”蓝字变形耀结泳构桨。幕这斧段及序珠列专被马称龙为秧回映文冷序偷列肝。1膨.序6天热然江D悉N粪A的涉来洗源捏和析用叮途染香色沉体禁D雕N查A援：方分警离江目姿的呢基剧因圆的喇主昆要笼材士料补，饱1爱0妇0旧0介～趟1柄06k亚b病看毒礼D叶N味A朴：准用耻于历构悦建勒基苏因严克洽隆要载略体歌,案T撒4暮、λ彩…质绸粒炉D跪N芽A凤：燥用普于月构辟建欺基台因躲克缠隆诱载海体线皱粒曲体度D泼N采A才：类呼剖吸霜作允用伙的楼基治因叶倒绿国体如D开N未A潜：容光眯合暖作奥用哑的防基掉因—复—盐存确在冠与狮生走物为体渐内更的乱D稠N被A（默1袖）搁大乔肠坡杆雕菌爹源解质爆粒伴D慕N孟A面的拦提农取（逗2加）饶λ石噬奸菌底体结D辫N命A河的爸提咏取（喜3买）膨氯煮化扔铯唤法但制眉备碑植拌物瓣基嚷因井组餐D驰N派A1速.戏7庆天胁然饮D扯N消A护的俘的趟提或取合贩适工的厌生盒物挂材羞料着—盈—她裂另解勺细梦胞奋—熄—糠分振离北D掠N血A挥—迈—别纯族化流核久检降测（胃1移）亡大量肠宴杆结菌封源皱质学粒密D趋N僵A少的蹲提查取松滨弛繁型斑质破粒夜：得加梁氯坡霉协素严杰紧溜型龟质乌粒救：闷不锹加限氯汇霉或素（讨2狂）墙λ噬共菌弱体勾D介N纪A连的拉提撞取1械.恶8烈D亡N弓A百的近纯陡化氯弹化宁铯额-困溴桌化午乙污锭怎连匪续售梯序度芒离伶心驶法离福子旗交蚁换躬层替析话法琼弯脂恩糖擦凝烛胶亚电译泳衡洗绞脱狸法“丸基澡因枕纯恳”钳试稻剂直纯婆化从海D缘瑞N纺A兼样晒品堪中寇去局掉粘E臂B2塌.发2揉.百4屋D固N压A犬浓木缩2树.温2揉.振5衡D红N定A跨纯戚度会检领测第起三昌次姐课纵结真束割！第停二馆部贴分鼠基神因四工木程着工杜具性酶基储因胖工装程肢工熄具警酶限肾制驾性抢核役酸并内籍切接酶D收N国A良连询接浑酶尘和锄激修酶D尖N爽A格聚村合倍酶据和悼R雀N欠A奏聚臣合尿酶D节N聚A销和代R古N认A润修距饰守酶蔽。一个、循序标列鹊特快异皂的枝D品N遭A辨限疤制抵性坏内徐切网核骄酸肾酶循(替R恳e坦s晚t亏r来i苍c建t喊i萝o她n匀e威n遭d元o猴n予u更c观l嫂e煤a消s扣e耽,暗R卧E钥）—简—指槐能动够绞识弄别尝双华链殃D桐N骑A哭分面子破中买特属殊摧核饰苷盾酸链序剑列侨，泛并酱使赚每卡条赵链腔的窜一榆个旬磷充酸选二株酯浑键厦断毯开盐的轰核难酸怀内帐切疤酶恋。来割源爬：蒜原嘉核部生裹物种氏类滑：蜻5慢0厕0摸多姓种作守用摔：盟把抵外精源组D寨N赖A箩切由割狸成膜片何段。第各一饼型霞（狱T卷y螺p信e增I蹦）帝：药能哈催剥化纱宿脸主砖D艘N救A城的屠甲少基搬化寒，猫又遮催兄化壶非充甲悉基歪化宇的翅D覆N哄A悬的曲水絮解第酿二廉型柴（份T粪y秃p光e呢I贷I储）鱼：盼只烈催杀化董非朽甲敌基累化段的途D舅N姜A糟的彼水毒解第府三谨型抛（斜T昼y免p桶e日I猴I含I溪）球同抹时狮具畅有玩修荡饰担及抛认奏知贪切洒割乘的舟作拉用限楼制初性火内郑切怀酶雨的东命响名侍和讨书渗写当：Hi废ndI换I译I细追菌晴属好名细姓菌烟种缘瑞名菌秋株酶播编选号Ha臂e魂m槐o锻p拼h已i挽l琴u继si顾nf游l己u拉e挣n追z垮a鹿edR镇E拜的阔功情能:防铜御锄外耳源伐D嚷N办A狗感慨染元,嚼利源于散遗为传午的杀稳殃定册性R插E忠抑临制给了类细带菌搂种垮属绿间附的跃交监叉北繁访殖肠,谊但哪甲垒基上化滤酶洁的凑某降些刻误唐差胀,宴又亮使形得闷不辆同拍菌补株宾间截D悄N油A谅的斜重谊组炭成车为绞可窄能麻,椒利浓于仓生翼物庆的免进辟化尖.1朵9泄6打8宏年争,馆从纤大省肠锈杆坏菌璃中铲分泄离筹到稳了扑I吹型故R讽E眯,们1匙9者7的0欲年粥,同从丝式大架肠您杆例菌嫁中呈分小离架到馒了教I初I距型复R顾ER贴E芹的仙发粥现躁：3似.鞭1广.雹1氧限致制畜性忌核弓酸漠内锣切吹酶遍作竭用瞒机惧制OH3’P-5’5’P3’HO（不1泡）王在D姥N撒A薪分昨子充双聪链确的特抵异荐性筒识党别杀序怪列部拣位宗,办切艰割凑D珠N诉A美分舍子自,抄形跑成浅链肯的歉断是裂造.识矮别姿序卡列:匠又牺叫诉靶驴子钩序贸列果,困是途由4疼-投8个斧核骆苷超酸锐组菌成堵的阶特煎定县核画苷筋酸底序卡列碰.3瘦.济1权.养2介限主制误性尚核杏酸艳内些切凯酶蛇的阿识猪别慕序栽列旋令转清对缘瑞称椒或吴二蓝重私互裹补剩对稍称连猎续构的很:例在如候：5梅‘耐…触A龄B书C导C隶’盐B福’宜A馆’糟…量3通’3雀’怪…坐A挑’逢B誉’少C抓’崭C汽B悔A技…鼓5析’间元断甩的伴:5依’非…寒A占B北N嚷B恢A理…迫3伪’昂3专’驼…渡A司’查B乱’蒜N望’仓B梯’笋A甚’港…时5掉’E亿c湿oR阻IB伶a酿mH押IG识A叨A择T粗T距CC宪T协T竭A靠A颤GG妻G删A俘T双C钢CC单C慎T课A盼G青G（闭2撒）括识嘉别斩序著列肚在催D至N锅A淡分讽子筹上键出飘现慎的付频粮率例也如炮：识别序列核苷酸个数出现识别序列的几率41/44（1/256）61/46(1/4096)λ废D死N填A稀长染4屡9钞0草0毙0颂b微p莲，B独g凝lI转I匀的特识帆别折序闯列颂为姥A武G饱A献T权C界T鹿所晕以霸理读论托上欠在商λ域D暮N化A基中支，B驶g久lI蓄I馒识早别阵序旦列宰应惯该胆出以现当：4严9魄0拨0内0膀/侦4宫0博9哗6姥=大1乒2愤次全。撕实由际爪上姑，描仅点出彻现储6贪次兆。同遗裂烦酶沿(误i任s症o肆s围c读h盟i毙z旋o交m弃e架r表)扯-润-盐-来树源济不析同捐,牢但悄识蜘别誓同冰样拨的抵核奖苷化酸袋靶做子励序兽列程.蹈例国如摘:H暮p欲aI鼻I暂和M迟s压pI兔的帅识愿别熊序谊列新都危为5草'省.嘉.增.汇C右^都C宿G唯G冤.伪.著.途3淘'脉3辜'火.脸.戴.执G煤G摘C凑^障C策.裳.跟.蚕5慕'B嘴a围mH缠I奴：厅5屠'胡G底^蜘G组A掀T嘉C卖C咳3买‘B历c西lI叮：眼5贷'闲T袍^畅G搜A摘T猪C监A田3脂‘B膝g篮lI刷I播：犁5交'参A冲^所G话A炊T迟C难T摘3票'同粉尾臣酶贝(饼i逃s财o亚c丧a咬u谢d某a嘉m斗e蔑r村)妥-暗-帖-瓜-来姓源潜不政同聪,皂识恰别保的渠核视苷若酸戏靶昌子泊序伸列火不挣同骄,笛但符产陪生箩相围同茶的粱粘讲性签末拼端唤.例痰如相:B筒a泰mH描I佛,B牛c佣lI菌,B抬g驴lI申I边是壮一滨组纷同括尾元酶渣切挣割梯后怒的祖末得端若是说G古A丽T绵C委.3迅.伏1区.圆3懒限优制闲性垒核敢酸寇内度切束酶悟切盖割遵D炭N秒A晨的益位鸟点多签数院在祖识数别影序采列义内着部县。环撞形线D旁N磨A隶切止割宪后浩的娱片您段阔数凝：杀N线笼形最D饮N虑A战切青割炎后原的距片盛段锡数达：陶N穗+铜1D州N腹A膨片纵段锤末艇端逝种哨类茧：粘较性献末纱端汤：腿磷参酸结二班酯嫁键玻断暖裂炸位磨置甲是敢交下错丈的平多末腰端极：滚断犁裂揉位亲置鉴在值对挨称巷轴切她割续位梅点纷表驾示乖方轨法5蛾’缠-篇C垄T辨G化C躬A倘G病-取3至’3例’佳-世G遣A阁C弟G坦T泡C踩-否5衬’P痕s液tI可王以蔬表叫示械为麦：5爪’买-湖C络T像G桐C宾A↓G僵-产3极’反秆应债总认体呼积戚：忠2效0介微拥升酶监的患用肾量缓骆冲赴液厦的终组蛇成辣与史酶她的缓种峡类蒙有迹关反象应熊时芬间悦1累-当3伶小通时币。3模.艰1毁.把4集限英制植性帜核芒酸概内纯切巩酶觉反衰应蒜系疤统例遭：B良g队lⅡ马对跨λ央D惧N电A扑的啦消特化1亿3mL字蒸降馏目水2mL捉1夕0唯x缓涉冲纤液4mL怕底笨物冷D楚N借A1mL溜R膏E3敞7蛛℃侧，刺1杰-惰3至小圾时依犁次加帜入鸭：混娇匀雄离负心升涉温膊，邀使寨酶牛失执活（捏6雷5撕℃鸡1妨0迈-称1幻玉5逐m粪i者n章）除秆去柏酶作蛋海白限挑制宏性坊酶稠切咸反闹应朗一辛般想流融程底竟物山D粗N敌A批：D森N怨A剑纯峡度D防N特A坑分慕子任构喝型识中别犁位誉点纳侧贪面弹序偿列位辉点孙偏控爱D勉N怕A泉甲跳基导化酶糠的衬用汪量酶自的伏活钢性底胳物讲D钱N啊A波：吵位烧点证数创量标棋准碧缓星冲穷液漆的衰组宋成词：缓弃冲机液流系申统M禽g萍C旗l2（镰或限醋冲酸假镁倦）N质a睛C宿l谈（帜或终K产C栏l呼）T您r抵i缠s动-淋H朴C达lß筝-缺巯抢基孔乙络醇嫁（确或菠二恳硫吧苏个糖乏醇架D割T球T中）反彻应非温坛度瞒：大呆多航数始是彼3衰7逐℃披，术少滤数幼或钓高刚或饺低S也t洽a俊r叉活犯性鱼：纽奉某慰些机限何制春性败核极酸谢内黑切酿酶订在特喉定父条辨件警下，窗可互以聪在造不美是味原鹊来逝的功识学别束序社列饿处役切径割杰D贷N安A嫌。3脏.渔1戚.纪5羡限卖制洲性绸核钢酸右内父切巨酶配的军S涨t奸a肾r局活建性4二忧、宣D粘N固A边连疑接痒酶D石N雕A尼连罚接贪酶帅能拘催税化匙双柱链暂D生N铲A防片宾段紧棉靠决在尺一典起的秃3仍’硬-日O僚H煤和玻5怀’巡寿-粪P改基靠团淡末尘端裕之沸间皮形锻成榜磷冈酸洁二照酯蜻键仰，露使秤两花末崇端寄连赏接蛙。率如唇果饿是稳两箩个叙或玩两精个龟以园上径不获同到双祸链废D派N递A状片俯段碎末险端首连践接会，彼则扛产颂生中重拣组陵D斜N洋A泽分比子骆。3旧.询2鹊D掠N枝A森连荣接残酶缺口nick5’5’3’3’5’5’3’3’DNA连接酶5’5’3’3’DNA连接酶裂口gap5’5’3’3’nick（2）酶-AMP复合物中的AMP与DNA链上的5’P结合，形成DNA-腺苷酸复合物，P活跃起来（3）3’OH对活跃的P作亲核攻击，结果形成磷酸二酯键。（1）DNA连接酶与辅助因子ATP或NAD+反应,生成酶-腺苷酸复合物.3我.培2误.导1蛮D竟N啄A影连沟接丸酶鼓的恶作蝴用批机缴理E减.玩c秒o逃l乏iD政N童A浩连晋接赶酶T脖4救D翅N兔A帐连责接峰酶√×√√（淹但渴效拐率滩较而低路）3夜.殖2糖.普2照目拍前忘常卷用扁的救D按N馅A泼连叨接以酶1仿条烟D依N碰A哀链气具待有栗3充’必-缎O棚H遮,戒另怀1杠条牲D慨N像A掉链却具碗有耳5翼’衰-斗P抽,猎而龙且港3押’慨-废O欣H煎与着5装’搜-貌P闭是甘相桂邻剪的情.3战’厘-初O扔H府与靠5辨’功-握P按位湖于慨与润互爬补补链笨上窝的兆互刚补受碱为基粗配伍对限的掏两舅个婚脱负氧抱核读苷悬酸柜的蝴末决端拴.吸漫能敞反仇应墙:E营.笨c赛o荣l导iD贷N影A椅连露接茂酶需便要眨N苏A戴D+，T漏4收D吸N棋A桑连段接胞酶需崖要惠A短T怒P膨.3怀.厨2高.封3参D挥N班A宗连刻接辽酶遵作秘用骑条出件缺口nick5’5’3’3’5’5’3’3’DNA连接酶5’5’3’3’DNA连接酶裂口gap5’5’3’3’—雪—促反杰应碧温办度稼：捕3吃7例℃—因—皆酶逢用齿量之：伐平汪末镜端执1地-精2书u积n场i迟t粘指性姑末秤端怒0穗.禾1帮u抱n简i妹t—狗—秧A典T毒P少：赔1电0删μ膏m搬o治l爷/跪L藏—五1汽m暖m条o飞l鸦/早L—样—桥b年u卡f午f各e竞r昏：至T市r匙i系s佛-围H距C秆l菜，偷K壮C读l搏，周D陡T运T螺，话B剂S喜AD龄N武A省连躲接唤酶览反漆应肠条遭件具葡互颂补偏粘纠性痒末联端谎片锐段申之咬间怀的糠连抵接具弹平代末旗端萌D位N锡A具片驰段种之似间锁的拼连划接D袭N乖A萝片洪段滔末肿端层修把饰傻后裂进革行笑连誉接3窝.避2谷.必4目D挥N灾A摧片怨段旁之战间冲的挡连欲接词方短式具肌互窜补彼粘伟性价末箭端堆片戚段雾之什间腹的昼连班接具扣平诸末旬端疏D涉N砖A肆片耀段锹之信间瓦的棉连隔接D愁N享A董片厌段诉末赶端劈燕修车饰张后须进袖行奋连讽接D胶N桐A泥片吹段捕末杰端司同逝聚览物脱加躬尾洒后紧进六行鸡连筑接粘把性鼓末担端饭修废饰运成轮平谣末陆端盼后且连梢接D谁N邻A也片误段少5魂’顺段壳磷河酸怎化龟作富用咸后惕连摸接D约N书A回片特段往末侨端醒同果聚遇物锦加姨尾拳后拼进狗行对连诱接粘哥性烫末叙端臣修惭饰邮成露平稀末互端真后坊连哀接D睁N取A粒片唤段身5横’怨端柴脱外磷筛酸凝化夸作和用招后旷连袜接5—眠—僚催驳化舒以D缩慧N倚A沿单荷链些为鸡模常板，剧以雁4敏种脱免氧融核泻糖腿核恼苷娇酸为壤底馅物叶，奔合圆成钩一放条杜与劳模扯板秤序朋列墙互能补萝的贺D棒N脱A刃新葬链狂的码酶膨。三欢、忌D摊N睬A涂聚宿合签酶D城N肠A末聚洞合越酶铃包瓦括席：大杜肠乘杆扇菌裕D繁N产A愤聚圆合创酶跪I大财肠报杆粮菌耐D蝴N过A迅聚予合键酶抚I悄的净K职l董e线n迅o互w偿大勤片些段矿酶T纽奉4渡D艰N禾A冷聚纯合辨酶T示7聚D仅N映A财聚躲合脉酶修醋饰邪的昌T公4幻玉D嫩N崭A稀聚悦合材酶逆波转疲录筝酶耐晚热碗性糖D洪N室A且聚嫂合蛾酶（晓一看）耐盛热培性惰D箭N薄A灵聚完合曾酶1女9厅5割6成年讯，所美苹国芹K粉o欢r房诚n碌b隐e蠢r断g剧从怕大断肠禁杆族菌芝中动分巾离住出候来膨。由莫大亮肠协杆梁菌宾基匀因p葛o姿lA偶编妹码负，单杂链层多勇肽喊蛋佳白柏质育。分软子尸量镜：两1苹0堪9迫k锯D球博形府，芦Φ谷6旗5戴埃（芳二止）警大捐肠累杆蚕菌尸D得N烂A行聚厚合钟酶阶I帆（E房诚.盗c君o盒l欲iD埋N侮Ap汤o轿lI障）1箭.虚D骄N哀A陡聚骡合克酶哥I膜反拣应而需者要滨的月条恼件百:全讲部竟4险种塔脱弟氧磁核悉苷握三歪磷勉酸冬,鞋和被M仰g+冬+.或d竟A吵T锄Pd屡C霜T采Pd荣T丧T韵Pd纺G给T姓P带轻有扶3加’棍-陆O在H更游间离论基笑团米的帮引昌物翼链似.2探.柱D坏N尖A施聚蒙合模酶谎I掀催过化芝的布反防应(贵1耕)扣聚界合耽反鬼应咳:磁5愉’序→烈3献’诱方梢向D侦N烟A勉聚目合疫酶乐I团催阔化绸的环聚汗合叛反跑应愈是肚在块引疲物茶链奏3渴’味-广O冤H丽与制d荒N柔T秃P栽分掏子舒的肤-炼P千-争基凶团段间振.d姓N疗T照P们接兵上颗后即,剑又筐提巧供壳了携1锁个瞎3奥’贫-溪O万H奋末杨端驼,学继寇续德连类接糠d音N写T辉P茂分链子羊.合违成籍方截向插是鸦5洽’曲→狡3烈’DNA聚合酶I的聚合反应机理引物模板PPi(限2颜)趴5逃’恐→肃3溪’皆核端酸赔外至切冬酶披活抢性闹:polIpolI(帽3翼)匹3捞’仔→菌5鞭’佩核房诚酸废外堂切当酶壁活辰性先:polI3牢、卖D田N怖A时聚砖合蛾酶胸I省在黄基闪因改工股程胡中忌的弯应乔用D骄N评A灾缺至口刷转求移湾（腹n注i牙c货k辰t广r迟a学n银s嫁l限a粥t柿i就o直n滑）头反面应德—颈—公用液于破分或子孙克薪隆勾。制屡备刺高纱比特活艇的横D萍N别A偷探进针奥。DNA聚合酶I的5’-3’核酸外切酶活性3’3’5’5’nick3’-OH5’-P缺口双链DNA聚合酶I的聚合活性3’3’5’5’nick3’-OH5’-P切去1个5’核苷酸在3’-OH上加上新的核苷酸3’3’5’5’nick3’-OH5’-P32P标记的核苷酸D食N寄A推缺革口帽转忧移贼—途—肤线葬状倘分席子DNaseI切断DNA链DNA聚合酶I5’-3’核酸外切酶活性DNA聚合酶I的聚合活性形成1条具有32P标记的合成DNA链（标记探针）在5’端切去1个核苷酸切出1个缺口在3’-OH加上1个32P标记的核苷酸32P标记的核苷酸制广备敲高睁比信活磨的兴D促N手A随探也针2奖5拜µ敢l1摔µ死g伯纯量化蛇的笨目鲁的纵基善因械D呢N伟A短片诱段满；适紫量滩的确D考N劝a酿s盖e粮I族；D鸟N糊A偷聚据合依酶剧；3吐2P房诚-泽d品N裕T无P肺s舍；足d船N永T菌P朱s枣；典麻型壮的坟反删应僻体寻系制：（跑二鸽）械大责肠版杆蜓菌窃D美N屿A鹿聚航合络酶备I戴的倦K踩l邀e巩n靠o卷w止片似段中与狐D饱N久A极末抵端颗标漠记K燃l帝e店n从o蓝w歌聚幼合饮酶矩的凝特贩点撒：分溪子戏量甘：懂7把6陵×巾1板03d秒a蒜l具董有译聚赞合爆酶末的蓝活缩慧性具炊有全3的’青-幅5屠’闯的帆核发酸秘外床切颠酶养的题活归性俱。D壁N名A步聚罩合崖酶道IM推W余：嫁3错4针×刃1恳03d挡a矿l貌：宴5遭’撑→僻3却’石核昂酸积外扩切饺酶闻活猛性乓。M凡W致：铁7疾6返×弓1党03d眠a蒸l论：抵K宜l伪e籍n只o街w世片绑段揭酶退，原保奶留醋D杀N己A性聚樱合鹿酶聚活膨性扰和欺3感’稠→侮5膝’林核厨酸麦外博切白酶什活炎性禽。枯沈草叫杆单菌套蛋指白裳酶K段l早e牛n婶o看w拉聚鲜合奸酶饱的施应削用身：c沃D件N杀A场克合隆脂中光第航二丧链景合婶成尝的店催方化补勺平礼双岭链附D毕N煎A车的体3桌’扁凹咸端眼。标物记丝式D怜N根A章片肢段撒的长末象端怕：瘦带健标票记盛的衫d之N蚂T鸽PD朽N刃A换序杰列跟测客定设：障S屑a须n肠g找e贼r朱末塌端矮终迟止摧法cDNA的合成第二链DNA的合成加SalI衔接物加EcoRI衔接物与pUC重组c暖D小N傲A歇克我隆债中宫第依二冠链淡合戒成弦的蓬催狡化5奔’宏G明A夏T变C抢T森•残•册•按3抗’3津’通A也•拣•报•仔5朴’5莫’舅G未A垄T冒C照T称•践•愁•毕3枝’3作’3叼2P灾-吴GA灶•祖•码•选5膜’5絮’围G连A料T渴C搜T树•津•职•胀3揭’3犯’3升2P亿-海A讨GA上•秒•姜•野5颗’具哀有龄3烘’粱隐铜蔽踩末竿端村的区D看N抢A唇片约段K餐l须e励n抵o钞w童酶歉，3食2P厘-洁GT四P毅（摔加败入殖的伐种杯类锯根晃据蜜5遇’台末骂端畏决是定挖）K贤l震e到n语o涌w凳酶降，3饥2P显-荣GT绸P院，3尚2P浩-控AT显P补眼平漫双快链兆D解N内A奴的润3达’韵凹气端放。标壮记疤D隶N墨A警片畏段纪的岂末翼端岭：倘带挽标患记宰的什d科N妈T浓PD概N喜A赌序混列闸测膊定侨：布S率a密n西g揭e育r怨末经端推终惩止宫法CGTACCTCGTTCATGACAAGCGTCTCAddGAGTddCGCAGAGTddTGTTCGCAGAGTddACTGTTCGCAGAGT*********Klenow片段（逮三拣）柿T4D冤N置A变聚泄合剧酶从阀T4噬田菌想体吓中忌分肝离拥的噬确菌乱体巧基化因善4依3勉编许码具召有冬5峡’宋→翼3粮’决聚像合删酶抵活摆性具铺有芝3障’陵→板5帜’悼核桑酸休外晋切惧酶惰活蚂性茂，张是勤K娱l傲e惨n茄o脉w飘片肿段狮的洁2站0仰0国倍嘴左煮右齐。取涉代暴反恢应复。取逢代携反袄应械特巩点据：当以反机应螺混栗合固物齿中条没棉有舰d迅N渔T劳P孟时奇，筹T4D卵N叠A修聚竿合湖酶光只窜有刘3成’煤-骂5堪’薪核谅酸悔外喷切怖酶货活夸性劈燕，摔从敢3何’穴-斜O痛H直端醉降腹解延D悉N俩A棕。当论反毙应御混妹合浸物往中翁仅击有夫1键种它d早N还T窗P屠时闪，咬3员’示端巷降侦解茶在握暴俊露烫出互盖补的亿核君苷左酸潜时微停秧止敏。3希2P熟标肢记险的秀核民苷财酸5’5’3’3’A酱T捆C写G掀T透A什C兆A阁GT复A劝G绳C都A假T吩G哭T允C5钉’5盟’3怨’3蛙’A蓄T忧C社G瞧T某A恨CC锐A象T鲜G遍T悔C5’5’3’3’A离T执C弓G储T科A包CA蚕GT滴A滑GC搁A劳T捆G杂T再GT4D嗓N悟A课聚扬合床酶佳，唉d纳G士T锣P具这有宅3捷’豆-颠O恩H盲末底端咐的呜D孩N躁A膏片誉段加拾入3译2P进d衰N寄T秀P敢s3希2P抖标版记足的末核部苷站酸渔逐存渐浅取保代笔了晨外摄切伐酶征删澡掉系的度原凡有治核晌苷龄酸穿—腿—央取庸代菜反症应脂。（帆