血清糖链抗原15-3（CA15-3）定量检测标准操作规程

血清糖链抗原153(CA153)定量检测标准操作规程××医院检验科临床免疫室作业指导书文件编号:XXX生效日期：共页第页1.目的规范操作流程，保证血清糖链抗原153(CA153)定量检测的准确性和可靠性。2.原理采用双抗体夹心法原理，整个过程18min完成。克隆CA153特异抗体混匀，形成夹心复合物。2．2·第2步孵育：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。3.标本要求3．1．1血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。标本在2~8℃可稳定7天，－20℃可稳定3个月。含沉淀的标本使用前需离心。心 (大约15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可进行检测。3．3·患者准备的一般要求：患者在采血前24h内应避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。一般主张在禁食12h后空腹取血，门诊患者提倡静坐15min后再采血。4.试剂与仪器4．2·试剂使用：试剂盒中的试剂是一个整体，打开后可立即使用，不能被分开。正确操作需要的所有信息可通过相应的试剂条码读取。素结合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐剂。shSysCleanProCellM缓冲液、ProbeWashM清洗液、废物袋。4．5．1存放在2~8℃。为了确保使用前自动混匀期间提供足够量的磁性微粒，试剂盒5.操作步骤5．1．1在使用前分析仪自动使微粒处于悬浮状态。通过各试剂条形码可读取其详细实验参数。在少数情况下，分析仪无法自动读取信息时，请输入标签上的15位数字序列。仪将自动调节反应温度及各试剂瓶瓶盖的开关状态。6.校准153检测又可溯源至酶免CA153检测法和FujirebioDiagnostics的CA153RIA。每批CA153Ⅱ试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CA153ⅡCalSet定标液定标校正母定标曲线。6．2·定标频率：须使用新鲜试剂对每个试剂批进行一次定标(即试剂盒上机登入后的24h内)。下列情况建议重新定标：使用同一批试剂的1个月后(28天)；7天后(在分析仪上使用同一试剂盒)；根据需要：质控结果超出范围时，比如质控结果在规定的限值外；若两水平质控均在控，则定标曲线可延至试剂及质控批号更换。6．3·定标验证：分析仪的软件会自动检查定标曲线的有效性及任何偏离。7.质控该测试适用的质控液PreciControlTumorMarker1和2；也可以用其他合适的质控液，如××LyphochekTumorMarkerPlusControl。各浓度区域的质控至少每24h、每一个新批号试剂盒或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如果出现质控值落在范围以外，应采取纠正措施。8.结果判断8．1·结果计算：对每一个标本，免疫分析仪会自动计算CA153含量，单位是U／ml8．2·检测范围：1．00~300U／ml(由master定标曲线的最低检测限与最高检测限决定)。如果测定值低于最低检测限，报告为＜1．00U／ml。如果测定值高于检测范围，报告为＞300U／ml(结果达到3000U／ml样本应作10倍稀释)。的标本可用通用稀释液手工进行1∶10稀释。稀释后的标本CA153Ⅱ含量必须高于30U／ml。如用手工稀释结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。8．4·检测结果的不确定度：具体参见AFP标准操作规程的相关内容。9.生物参考区间本实验室血清CA153生物参考区间≤25U／ml。10.性能参数 或＜100ng／ml)的影响。对于接受高剂量生物素治疗的患者(＞5mg／d)，必须在末次生物素治疗8h后采集样本。检测结果不受类风湿因子影响(RF不超过1500IU／ml)。通常，当CA153浓度低于20000U／ml时不会出现高剂量钩状效应。然而，由于CA153的异源性质，因此低于该值的高剂量钩状效应并能完全避免。如果出现不合理的过低结果，就应当以1∶10稀释样本后重新检测。针对28种常用药物进行了体外检测。未发现有药物影响检测结果。少数病例中极高浓度的分析物特异性抗体、链霉亲和素或钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。11.临床意义体外免疫