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第九章亲和纯化技术利用生物分子间的特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术称为亲和纯化技术(Affinitypurification)QuitPreviousmenuChromatographGelfiltrationionexchangeAffinityPages759to761:Figures18.24to18.26Columnchromatographyincludesavarietyofpowerfultechniquestoseparatingmixturesofproteins.Typicallyaglasscolurmnisfilledwithbeadsofaninertmatrix.Themixtureofproteinstobepurifiedisdissolvedinsolutionandpassedslowlythroughthecolumn.Proteinsthatinteractwiththematrixaresloweddown.Thosethatdonot,pasthroughmorequicklySelectoneofthetypesolchromatography技术要点(1)找与底物专可逆结合的配基(2)将配基通过共配基固定竞价键偶联到基质(3)配基与底物吸嗽(4)洗脱目标物。亲和纯化技术亲和层析(Affinitychromatography)亲和过滤(膜分离)亲和分配(双水相萃取)亲和反胶团萃取(反胶团萃取)亲和沉淀(沉淀)亲和电泳(电泳)第一节亲和层析(affinityChromatography利用生物大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的层析技术适用于从成份复杂且杂质含量远大于目标物的混合物中提纯目标物。特点经过一次处理可得到高纯度活性物质设备要求不高、操作简便、特异性强、分离速度快、分离效果好、分离条件温和亲和吸附剂通用性较差,专亲和吸附剂:载体配基在亲和层析中起可逆结合的特异gand(A)性物质称为配基ouplingreactiongandSolidmatrix与配基结合的层析介质称为(Matrix)。、亲和层析的原理(1)配基固定化:配基x与载体偶联,结合成具有ooo0BWashingElution特异亲和性的分离介质。000Sample(2)吸附样品:亲和层析介质选择性吸附生物活性物质(3)选择适宜〖的条件使被吸附物活性物9●0●质解吸。0000B◆◆◆亲和层析载体(一)、亲和层析对载体的要求(1)充分功能化,与配

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