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2023年生物技术期末复习-基因工程原理(生物技术)考试历年高频考点参考题库专家答案(图片大小可自由调整)第1卷一.综合考核题库(共90题)1.末端脱氧核苷酸转移酶起作用时需要A、二价阳离子B、一价阴离子C、二价阴离子D、一价阳离子2.商品化的限制性核酸内切酶均加多少浓度甘油作为保护剂A、10%B、20%C、50%D、30%3.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后,这个基因不再有任何功能。4.请叙述反转录PCR的含义。5.人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。科学家应对多少染色体进行分析A、46条B、24条C、23条D、22条6.对DNA变性描述正确的是:A、包括DNA双螺旋的解链B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂E、包括氢键的断裂7.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的,这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶,分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

8.cDNA合成中所涉及的三种工具酶:IT4-DNA连接酶IIKlenow聚合酶IIIS1核酸酶IVBal31核酸酶V逆转录酶A、I+II+IIIB、II+III+IVC、II+III+VD、III+IV+V9.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗10.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养11.DNA重组连接的方法大致分为四种:①________;②平末端连接;③同聚物加尾连接;④接头/连接子连接。12.用Sanger双脱氧法进行DNA测序时,凝胶上读出的序列是A、模板链的互补链B、mRNA的C、cDNA的D、模板链的13.作为载体需要具备哪些功能?14.AIDS是由哪种病毒引起的全身性传染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV15.一般来说,完全切割质粒或病毒DNA,要比切割线状DNA需要更多的酶,最高的需要20倍。16.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌,其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。17.黏性末端连接法是最常用的连接方法,具有许多优点,但是也有一些不足,请指出这些不足之处。18.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段?19.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori20.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。21.生命科学发展的历史场合中,经历了从描述生物学、_________到创造生物学三个发展阶段。22.同尾酶23.在DNA分离过程中,通常要进行透析,其目的是_________。24.通常可在三种温度下保存DNA:4~5℃、-20℃、-70℃,其中以_________最好。25.Southern印迹的DNA探针()杂交。A、可与任何含有相同序列的DNA片段B、可与任何含有互补序列的DNA片段C、可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段D、只与完全相同的片段26.经典的DNA测序方法有两种,即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。27.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记28.多利绵羊的诞生是通过胚胎干细胞法制备的。29.影响限制性核酸内切酶酶切的反应条件有哪些A、温度B、盐离子浓度C、缓冲体系D、反应体积和甘油浓度E、限制性核酸内切酶反应的时间30.常用的固相杂交类型有A、Southern杂交B、Northern杂交C、组织原位杂交D、菌落原位杂交E、斑点杂交31.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开,阻止邻近基因之间的相互作用,这些功能序列被称为_________。32.大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶,具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性33.诱导型启动子34.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒35.用限制性内切核酸酶HaeIII分别切割载体DNA和供体DNA后,可用E.coliDNA连接酶进行连接。36.Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的DNA是以一种_______________形式存在。37.目的基因进入受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_________。38.双酶切或多酶切时,一般先用低盐浓度的酶切,再用高盐浓度的酶切。39.免疫共沉淀技术是检测()的技术A、RNA-蛋白相互作用B、蛋白-蛋白相互作用C、RNA-RNA相互作用D、DNA-蛋白相互作用40.大肠杆菌DNA聚合酶I是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。41.染色质免疫沉淀技术是检测()的技术A、RNA-蛋白相互作用B、蛋白-蛋白相互作用C、RNA-RNA相互作用D、DNA-蛋白相互作用42.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种43.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。44.基因工程的两个基本特点是:分子水平上的操作和_________。45.把那些没有可检测表型的质粒称为_________。46._________是指利用基因工程技术,将人们想要研究的基因在动物体实现表达。47.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应48.何谓修饰作用?49.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃50.一个完整的基因克隆过程应包括:目的基因的获取,克隆载体的选择与改造,____________的连接,重组DNA分子导入受体细胞,筛选出转化子。51.最早建立成功的转基因哺乳动物是_________。52.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种53.控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A、①③④B、①②④C、②①④D、②①③54.具平末端的DNA片段的连接方法主要有?55.基因组文库中包括有内含子和外显子,而cDNA文库中则不含_________。56.核酸Tm的高低与DNA分子中_________的含量有关,其含量越高,则Tm越高。57.基因组文库一般保存在多少温度下A、4℃B、-10℃C、-60℃D、-80℃58.LacZ基因通常用于构建质粒载体的目的是A、编码蓝色色素产物,可用于示踪转化的细胞B、编码一种酶,将RNA转化为DNAC、编码一种抗生素抗性的酶D、编码一种可检测的酶,当基因内部的位点插入任何外源片段,ORF遭到破坏时,产物即不能表达59.植物基因工程的常用方法有哪些?60.下列哪一种方法属于核酸分子杂交A、southernblotB、PCR扩增C、限制图谱分析法D、抗药性标志筛选61.T4DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。62.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra63.限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力64.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA或DNA分子。65.PCR是利用___________的原则,经过高温变性、低温复性、子链延伸的不断循环,选择性的特异扩增目的基因和目的DNA的一种方法。66.基因操作的两大关键技术是A、工具酶与载体B、转化细胞和供体细胞C、基因克隆和基因重组D、克隆载体和表达载体67.常规Sanger双脱氧链终止法标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP68.pGEM质粒与pUC质粒的区别主要在于A、抗药性基因的不同B、复制起点不同C、MCS不同D、前者有启动子69.Cre-loxP系统两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同,Cre重组酶敲除loxP间的序列70.基因表达载体中启动子的本质是_________。71.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时,出现了星号活性,请分析可能的原因?72.关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义,下列哪种说法是正确的?A、来自噬菌体,具有抗微生物作用B、来自酵母菌,参与DNA复制C、来自细菌,有防御病毒侵染的意义D、来自噬菌体,用于复制病毒DNA73.说明SangerDNA测序法的原理。74.你在做Southern印迹分析,并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案,下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶,使DNA变性为单链。为了节省时间,你略过了这一步,直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交,最后发现放射自显影片是空白。错在哪里?75.将携带有外源基因并能持久传递给子代的动物称为_________。76.受体细胞的_________是接受外源DNA的生理状态_。77.常规PCR反应所用到的酶是()A、限制性核酸酶B、逆转录酶C、DNA连接酶D、Taq酶78.常用的_________使抗生素失活,解除抗生素对转化细胞在转录和翻译过程中的抑制作用,使转化细胞得以继续生长。79.基因工程药品的试验分为几个时期A、2个B、3个C、4个D、1个80.融合表达载体中担体蛋白比较常用的有()A、GSTB、六聚组氨酸肽C、绿色荧光蛋白D、LacZE、亲水性多肽81.常用的DNA探针标记方法是切口平移法和随机引物法。82.对基因功能的研究,首先需要获取基因或基因片段,即______________。83.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个84.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用S1核酸酶切割或_________。85.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA,又能作用于单链DNA。86.逆转录酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端转移酶活性E、RnaseH活性87.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中不大恰当的是A、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶B、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰C、不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统D、由作用于同一DNA序列的两种酶构成88.基因工程又叫遗传工程、____________、分子克隆。89.没有启动子,基因就不能转录。90.II型限制性核酸内切酶的基本特征是A、既有内切酶活性又有甲基化酶活性B、识别非对称序列C、有特异的识别序列D、识别序列具有回文对称结构E、在识别序列内或两侧特异位点切割第1卷参考答案一.综合考核题库1.正确答案:A2.正确答案:C3.正确答案:错误4.正确答案:是一种利用逆转录酶将组织和细胞中的RNA反转录成cDNA,并以此为模板通过PCR进行DNA扩增来间接检测RNA的链式聚合酶反应。5.正确答案:B6.正确答案:A,C,E7.正确答案:B8.正确答案:C9.正确答案:A10.正确答案:D11.正确答案:黏性末端连接12.正确答案:A13.正确答案:为外源基因提供在受体细胞中的复制和整合能力;为外源基因提供进入受体细胞的转移能力;为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力,外源基因的扩增依赖于载体分子在受体细胞中高拷贝自主复制的能力。14.正确答案:C15.正确答案:正确16.正确答案:正确17.正确答案:(1)载体易自身环化;(2)若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆;(3)难插入特定的基因;(4)再者就是大片段DNA的重组率较低,即使用碱性磷酸酶处理了载体,防止了载体的自身环化,载体也有成环的倾向;(5)用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体,增加筛选工作的困难。18.正确答案:经典的手工测序;第一代测序技术;第二代测序技术;第三代测序技术。19.正确答案:D20.正确答案:错误21.正确答案:实验生物学22.正确答案:有的限制性核酸内切酶虽然识别序列各不相同,但切割后都产生相同的黏性末端,称之为同尾酶。23.正确答案:除去小分子的无机离子24.正确答案:-70℃25.正确答案:B26.正确答案:化学降解法27.正确答案:B28.正确答案:错误29.正确答案:A,B,C,D,E30.正确答案:A,B,C,D,E31.正确答案:绝缘子32.正确答案:B,C,D33.正确答案:在一定的诱导剂作用下,才能启动基因的转录与表达。34.正确答案:B35.正确答案:错误36.正确答案:DNA双螺旋结构37.正确答案:转化38.正确答案:正确39.正确答案:B40.正确答案:正确41.正确答案:D42.正确答案:B43.正确答案:错误44.正确答案:细胞水平上的表达45.正确答案:隐性质粒46.正确答案:转基因动物47.正确答案:D48.正确答案:指细菌的修饰酶对于DNA碱基结构改变的作用,经修饰酶作用后的DNA可免遭其自身所具有的限制酶的分解。49.正确答案:B50.正确答案:目的基因与克隆载体51.正确答案:转基因小鼠52.正确答案:A53.正确答案:C54.正确答案:直接连接法;同聚物加尾法;衔接物连接法。55.正确答案:内含子56.正确答案:G+C57.正确答案:D58.正确答案:D59.正确答案:农杆菌介导法;

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