2022-2023学年安徽省考试PCR上岗证

2022-2023学年安徽省考试PCR上岗证学校:________班级:________姓名:________考号:________

一、单选题(65题)1.RT-PCR是将RNA的逆转录和cDNA的聚合酶链式扩增相结合的技术。目前国际均以RT-PCR检测呈阳性作为感染新型冠状病毒肺炎的“金标准”相关叙述错误的是（）

A.RT-PCR反应体系中需要添加逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶

B.RT-PCR也需要经过高温变性、低温复性和中温延伸

C.RT-PCR模拟了新冠病毒在人体细胞内增殖的主要过程

D.标本保存与运输不当可能导致RT-PCR检测呈假阴性

2.某个婴儿不能消化乳糖，经检查发现，他的乳糖酶分子有一个氨基酸改换而导致乳糖酶失活，发生这种现象的根本原因是（）

A.缺乏吸收某种氨基酸的能力B.不能摄取足够的乳糖酶C.乳糖酶基因个别碱基发生改变D.乳糖酶基因有一个碱基缺失了

3.核酸提取纯化中，RNase潜在污染源是：

A.实验室环境B.实验用品如吸头、离心管等C.实验人员的手D.以上都是

4.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（）

A.各区合并B.注意风向C.因地制宜D.方便工作

5.分子杂交试验不能用于：

A.单链DNA分子之间的杂交

B.单链DNA与RNA分子之间的杂交

C.抗原与抗体分子之间的结合

D.双链DNA与RNA分子之间的杂交

6.常用RNase抑制剂是

A.乙醇B.DEPC（焦碳酸二乙酯）C.异丙醇D.精胺

7.以下哪项有利于DNA的保存：

A.溶于pH3.0溶液B.加入少量RNaseC.加入EDTA螯合钙离子，去除核酸酶的活性D.加入少量DNase

8.PCR实验室一般包括()

A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区和产物分析区D.A、B、C都含

9.荧光定量PCR检测过程中，基线漂移的可能原因有：

A.蒸发B.探针水解C.相邻荧光通道干扰D.以上都是

10.生物安全水平的级别共分为几个等级

A.1个B.2个C.3个D.4个

11.在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括()

A.扩增产物的污染B.天然基因组DNA的污染C.试剂污染和标本间交叉污染D.A、B、C都可能

12.PCR产物短期存放可在（）保存

A.4℃B.常温C.-80℃D.高温

13.PCR方法检测病原微生物所扩增的区段，一般为：

A.整个病原体基因组B.病原体基因组内的保守区域C.病原体基因组内的任一区域D.以上都不是

14.实验室的清洁工作应在以下情况下进行：

A.每次实验后B.文件规定清洁时间C.实验室发生污染时D.以上都是

15.PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（）

A.模板B.引物C.dNTPD.镁离子

16.在选择开展临床检验项目时，应首先考虑：

A.临床有效性和分析有效性;B.检测精密度和检测准确度;C.临床有效性和检测精密度；D.分析有效性和检测准确度。

17.最大量程为200ul的微量移液器，显示读数为020，实际的吸液容量值为：

A.0.2ulB.2ulC.20ulD.200ul

18.关于PCR的叙述，不正确的是（）

A.需要耐热DNA聚合酶

B.Taq酶催化DNA链合成的方向为3′→5′

C.应用PCR与探针杂交技术可以检测基因突变

D.新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

19.分子杂交试验不能用于（）

A.单链DNA分子之间的杂交

B.单链DNA分子与RNA分子之间的杂交

C.抗原与抗体分子之间的结合

D.双链DNA分子与RNA分子之间的杂交

20.多重PCR需要的引物对为（）

A.一对引物B.半对引物C.两对引物D.多对引物

21.PCR技术于哪一年发明（）

A.1983B.1971C.1987D.1993

22.每次PCR试验必须做阴性对照，阴性对照应至少包括：

A.空白试剂对照B.未加模板的扩增区反应混合液C.阴性样本D.双蒸水

23.在选择时临床检验项目时，应首先考虑：

A.临床有效性和分析有效性B.检测精密度和检测准确度C.临床有效性和检测精密度D.分析有效性和检测准确度

24.以下哪项有利于DNA保存（）

A.加入EDTA螯合钙离子，去除核酸酶的活性B.加入少量的DNAseC.溶于PH3.0溶液D.加入少量的RNAse

25.核酸提取时，常需使用氯化钠或醋酸钠等盐溶液，其目的是：（）

A.中和核酸的负离子B.条件PHC.由于人员操作和设备状态不好造成提取效率低D.以上都是

26.核酸提取步骤可能出现的问题：（）

A.模板中的蛋白质、脂类、糖类未去除

B.提取过程中引入的有机溶剂未去除

C.由于人员操作和设备状态不好造成提取效率低

D.以上都是

27.有关于荧光定量PCR方法，下述哪一条是错误的？

A.在扩增的指数期定量B.采用内标和外标方法均可C.可采用Taqman探针D.在扩增的终点测定定量

28.下列表观遗传学变异哪项能够通过基因测序检测：（）

A.DNA聚合酶B.组蛋白甲基化C.端粒酶活性D.组蛋白乙酰化

29.有关核小体的错误叙述是：

A.核小体是染色体的基本单位

B.DNA和组蛋白共同构成核小体

C.DNA和组蛋白H1构成核小体连接区

D.RNA和组蛋白共同构成核小体

30.核酸检测探针的标志性特征是：

A.一小段已知序列的单链核酸；

B.一小段未知序列的单链核酸；

C.一小段已知序列的双链核酸；

D.有同位素或非同位素标记物；

31.下列哪一项不是PCR实验室设计的基本原则:

A.各区联合B.注意风向C.因地制宜D.方便工作

32.核酸探针的标志性特征是：

A.一小段已知序列的单链核酸B.一小段未知序列的单链核酸C.一小段已知序列的双链核酸D.有同位素或非同位素标记物

33.核酸分子中储存遗传信息的关键部分是：

A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA

34.传统的Sanger测序技术一次测序长度能够达到：（）

A.100-300bpB.300-500bpC.600-900D.＞1Kb

35.在Sanger基因测序技术中心所使用的酶是：（）

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA连接酶D.DNA拓扑酶

36.在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增()

A.TaqDNA聚合酶加量过多B.引物加量过多C.A、B都可D.缓冲液中镁离子含量过高

37.真核生物染色体DNA主要以下列哪种形式存在

A.环状单链分子B.线性单链分子C.环状双链分子D.线性双链分子

38.在开展临床检验项目时，应首先考虑：（）

A.临床有效性和分析有效性B.检测精密度和检测准确度C.临床有效性和检测精密度D.分析有效性和检测准确度

39.之所以要将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态，目的是：

A.防止生物传染危险物的逸出B.防止扩增产物从该区进入上游区域C.防止该区灰尘的逸出D.无特殊目的

40.PCR技术的发明人是（）

A.MullisB.史蒂文.沙夫C.兰德尔.才木

41.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（）

A.37℃B.50-55℃C.70-75℃D.80-85℃

42.荧光定量PCR检测过程中，基线漂移的可能原因有：（）

A.蒸发B.探针水解C.相邻荧光通道干扰D.以上都是

43.以下哪种物质在PCR反应中不需要（）

A.TaqDNA聚合酶B.dNTPsC.镁离子D.RNA酶

44.无创产前基因诊断为胎儿做出基因检测，需从孕妇外周血中分离获取及少量的：

A.孕妇有核红细胞B.胎儿有核红细胞C.白细胞D.以上均可

45.PCR的基本反应过程包括（）

A.变性、退火、延伸B.变性、延伸C.变性、退火

46.关于聚合酶链反应（PCR）引物的叙述正确的是

A.引物是一条人工合成的寡核苷酸片段

B.引物序列与模板DNA的待扩增区互补

C.在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物

D.引物自身应该存在互补序列

E.引物的3＇端可以被修饰

47.如果将镰刀型细胞贫血症的患者血液输给一血型相同的正常人，将使该正常人（）

A.基因产生突变，使此人患病

B.无基因突变，性状不遗传给此人

C.基因重组，将病遗传给此人

D.无基因重组，此人无病，其后代患病

48.Sanger测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有：

A.模板B.ddNTPC.DNA聚合酶D.引物

49.下面哪种是容易造成PCR实验室环境污染的因素：

A.中央空调B.实验室和缓冲区无通风设施C.人流和物流的走向D.以上都是

50.如果一个PCR反应体系中加入模板200个，经过30个循环后扩增产物的数量将达

A.200×302B.200×230C.200×30×2D.2002×30

51.实验室清洁工作应在以下情况下进行：（）

A.每次试验后B.文件规定清洁时间C.实验室发生污染时D.以上都是

52.临床基因扩增检验的室内质量控制与通常的临床定性免疫测定IQC的最大不同在于：

A.弱阳性质控血清的设置B.阴性质控血清的设置C.强阳性质控血清的设置D.以上均是

53.TaqMan探针采用的是（A）

A.荧光标记的探针B.生物素标记探针C.同位素标记探针D.SYBRGreen荧光染料

54.双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有（D）

A.模板B.引物C.DNA聚合酶D.ddNTPE.缓冲液

55.双链DNA中的碱基对有：

A.A-UB.G-TC.C-ADD.T-A

56.将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态，目的是：

A.防止有生物传染危险的样本逸出B.防止扩增产物从该区逸出C.防止该区灰尘的逸出D.为了生物安全的目的

57.自制室内质控品时，应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。

A.正确B.错误

58.如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（）个。

A.100×30B.100×30×2C.100×302D.100×230

59.临床PCR测定的重复性不好的原因如下，但除外：

A.试剂盒核酸提取方法对扩增抑制物去除不干净B标准品浓度不准

B.核酸扩增仪空间温度不均

C.标准品浓度不准

D.加样重复性差

60.将基因扩增实验室的产物分析去设置为负压状态，目的是：

A.防止该区灰尘的逸出B.为了生物安全的目的C.防止扩增产物从该区逸出D.防止有生物传染危险的样本逸出

61.在生物界尚无充足证据的信息流动过程的是

A.DNA→RNAB.蛋白质→RNAC.DNA→DNAD.RNA→DNA

62.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期而后者多为扩增平台期

A.正确B.错误

63.下列关于现代生物科学技术应用的叙述，不正确的是（）。

A.利用PCR扩增目的基因时，需利用耐高温的TaqDNA聚合酶

B.在分割移植哺乳动物的胚胎前，可用分割针取滋养层细胞鉴别性别

C.生态农业利用废弃物中的能量，因而大大提高了能量的传递效率

D.在植物组织中，低温条件下培养的植物细胞染色体数目可能加倍

64.运行指令继电器PCR动作的条件

A.主控端B.零位加载C.JTR得电D.全列门关

65.在Sanger基因测序技术中所使用的酶是:（

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA连接酶D.DNA拓扑酶

二、判断题(55题)66.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。

A.正确B.错误

67.即使核酸检测有纯化的步骤，也不可以使用检验科检测其他项目后剩余的血液样本进行核酸纯化和检测。

A.正确B.错误

68.扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，而且会成为一个污染源。

A.正确B.错误

69.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR试剂盒，该酶可以降解

A.正确B.错误

70.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定SD的增大。

A.正确B.错误

71.质量体系文件中应包括质量方针、质量目标和质量指标。

A.正确B.错误

72.室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精密度（重复性），而室间质量评价则通过不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。

A.正确B.错误

73.样本核酸定性检测的室内质控应选择阴性，阳性和弱阳性质控，室内质控应该包括样本提取和检测的全过程。

A.正确B.错误

74.一般进行HCV-RNA检测时宜采用EDTA抗凝血，不宜采用肝素抗凝。

A.正确B.错误

75.核酸是极性化合物，不溶于水，可溶于乙醇等有机溶剂。

A.正确B.错误

76.肿瘤基因检测既可以使用患者的肿瘤样本，也可以直接使用血液样本。

A.正确B.错误

77.处理PCR标本时，在没有生物安全柜的情况下，可用超净台操作。

A.正确B.错误

78.发生溶血的标本对PCR结果没影响。

A.正确B.错误

79.在全血、骨髓标本的采集时，可使用EDTA、枸缘酸钠或肝素抗凝。

A.正确B.错误

80.DNA双链中，碱基对总是A-T,C-G配伍，其间以两个氢键相连

A.正确B.错误

81.使用有防“污染”作用的UNG的PCR试剂盒，PCR实验室就不必严格分区。

A.正确B.错误

82.核酸的解链温度（Tm）与G+C含量有关，G+C含量愈大，Tm愈低。

A.正确B.错误

83.PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。

A.正确B.错误

84.“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。

A.正确B.错误

85.无室间质评计划可参加时，可以用室内质控替代。

A.正确B.错误

86.在PCR试剂盒中所使用的UTP与天然RNA分子中的U没什么区别。

A.正确B.错误

87.DNA复制和转录过程的新链合成方向都是5′→3′。

A.正确B.错误

88.PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。

A.正确B.错误

89.核酸的复制是由3＇→5＇方向进行的。

A.正确B.错误

90.DAN是反向平行的互补双链，一条链从上往下走向都是5‘→3‘，另一条是从下往上也是’5‘→3‘

A.正确B.错误

91.每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。

A.正确B.错误

92.PCR技术需在体内进行。

A.正确B.错误

93.无法参加室间质量评价计划时，应进行室间比对，不可以用室内质控替代。

A.正确B.错误

94.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。

A.正确B.错误

95.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要的区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。

A.正确B.错误

96.HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。

A.正确B.错误

97.基因扩增检验实验室“可移动紫外灯”的作用主要是便于实验室台面的消毒杀菌。

A.正确B.错误

98.临床检验中的系统误差通常表现为室内质控品测定结果的SD增大。

A.正确B.错误

99.DNA复制和转录过程的新链合成方向都是5‘→3‘。

A.正确B.错误

100.血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度的确证标志。

A.正确B.错误

101.DNA双链中，碱基A-T之间以三个氢键相连，G-C以两个氢键相连。

A.正确B.错误

102.若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。

A.正确B.错误

103.DNA变性是指在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键同时也受影响。

A.正确B.错误

104.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定结果的SD增大。

A.正确B.错误

105.室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精密度（重复性），而室间质量评价则通过不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。

A.正确B.错误

106.PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面

A.正确B.错误

107.DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。

A.正确B.错误

108.逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。

A.正确B.错误

109.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要的区别点在于：前者测定点为扩增平台期，而后者的测定点在PCR的指数扩增期。

A.正确B.错误

110.配对的碱基总是A与T和G与C。

A.正确B.错误

111.生物安全2级实验室（BSL-2）的实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

A.正确B.错误

112.以次氯酸为主要成分的清洁剂在配制后可以长期使用。

A.正确B.错误

113.扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，同时可成为一个污染源。

A.正确B.错误

114.扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，同时可称为一个污染源。

A.正确B.错误

115.市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。

A.正确B.错误

116.PCR可应用于遗传病、肿瘤、病原体检测及判断亲缘关系等方面。

A.正确B.错误

117.在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。

A.正确B.错