梅毒实验室检测及分析

梅毒实验室检测及分析第1页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒螺旋体梅毒是一种性传播疾病，病原体为梅毒螺旋体，属于密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

极细亚种雅司病地方亚种地方性梅毒苍白亚种梅毒苍白螺旋体品他螺旋体品他病

密螺旋体属第2页，课件共34页，创作于2023年2月青岛大学附属医院梅毒螺旋体的生物学特性1、直径0.10~0.15μm，有8~14个致密而规则的小螺旋，两端尖直。2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛，故运动活跃，运动方式多样。3、G-，但不易着色，镀银染色呈棕褐色。4、在无活细胞的人工培养基中难培养，生长慢。5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉素、四环素、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。第3页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒螺旋体

第4页，课件共34页，创作于2023年2月

传播途径

性接触是主要的传染途径未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性随着病期的延长，传染性越来越小到感染后2年，通过性接触一般无传染性母婴传播在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿病期越长，传染性越小;输血传染间接传播：日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径（接触部位附有梅毒螺旋体）。第5页，课件共34页，创作于2023年2月梅毒的分期第6页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒的诊断

梅毒的诊断早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隐性梅毒）必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义第7页，课件共34页，创作于2023年2月

常用梅毒实验室检测方法

病原学检测血清学检测第8页，课件共34页，创作于2023年2月

病原学检查

取材方法一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液第9页，课件共34页，创作于2023年2月暗视野显微镜第10页，课件共34页，创作于2023年2月镀银染色

第11页，课件共34页，创作于2023年2月

病原学检查的临床意义病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。

螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。

如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。第12页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒血清学检测方法

非梅毒螺旋体抗原血清学试验（非特异性梅毒抗体）梅毒螺旋体抗原血清学试验（特异性梅毒抗体）第13页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验

原理（抗心磷脂抗体）：人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体产生类脂质抗体（反应素）。主要是IgM和IgG混合抗体。抗体产生时间感染3周-4周，硬下疳出现1周-2周抗体作用无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。第14页，课件共34页，创作于2023年2月原理和方法反应原理抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见抗原基本成分心磷脂、卵磷脂和胆固醇方法包括：快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)不加热血清反应素(USR)甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）性病研究实验室试验(VDRL)等。第15页，课件共34页，创作于2023年2月

RPR定量试验中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明确凝块但很小的为弱阳性（圈2和3）颗粒均匀分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）为阴性第16页，课件共34页，创作于2023年2月

TRUST试验结果第17页，课件共34页，创作于2023年2月临床意义早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，梅毒抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。一期梅毒1年后转为阴性二期梅毒2年后转为阴性。晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血清反应仍为阳性早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判断痊愈、复发或再感染的指征。第18页，课件共34页，创作于2023年2月假阳性问题假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性①技术性假阳性由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。②生物学假阳性是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性第19页，课件共34页，创作于2023年2月

急性生物学假阳性反应的疾病风疹水痘传染性单核细胞增多症传染性肝炎上呼吸道感染肺炎球菌性肺炎病毒性肺炎牛痘疹第20页，课件共34页，创作于2023年2月慢性生物学假阳性反应的疾病系统性红斑狼疮自身免疫性溶血性贫血盘状红斑狼疮结节性多动脉炎类风湿性关节炎桥本氏甲状腺炎风湿性心脏病干燥综合征毒品瘾者慢性肾炎肝硬化老年麻风(是唯一产生慢性生物学假阳性的感染性疾病)第21页，课件共34页，创作于2023年2月特异性梅毒螺旋体抗体试验原理检测血中以梅毒螺旋体特异蛋白为抗原的抗体（IgG和IgM）。特异性IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出。第22页，课件共34页，创作于2023年2月实验方法

梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)

梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)

梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(RT)

荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）化学发光免疫分析法（CLIA）梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）第23页，课件共34页，创作于2023年2月

TPPA/TPHA原理TPPA试验原理与TPHA试验基本相同TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞特点梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原第24页，课件共34页，创作于2023年2月第25页，课件共34页，创作于2023年2月

TP-ELISA原理用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条，加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶标记物结合，用酶标仪判定试验阳性反应。特点本法可用于大规模血清检测。第26页，课件共34页，创作于2023年2月免疫层析第27页，课件共34页，创作于2023年2月第28页，课件共34页，创作于2023年2月临床应用梅毒螺旋体特异性抗体试验的作用是作为证实试验，以TPPA/TPHA的特异性和敏感性最高。它们可以帮助确定非梅毒螺旋体试验阳性反应是真阳性还是假阳性。一旦这些试验呈阳性，则患者终身阳性。第29页，课件共34页，创作于2023年2月方法特点特异性强，敏感性高很少出现假阳性。据统计，在普通人群中，有1%的生物学假阳性发生。如系统性红斑狼疮患者血清可使试验呈假阳性反应，但大多数病例中螺旋体呈串株状荧光。传染性单核细胞增多症，可能由于嗜异性抗体所致，可使TPHA呈假阳性。麻风患者也可使特异试验呈阳性。第30页，课件共34页，创作于2023年2月

梅毒特异性抗体检测的应用作为RPR初筛阳性标本的确证试验。不能作为疗效观察的指标。阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合RPR结果进行诊断。老年人抗体阳性的问题：这些老年患者所患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体和/或抗梅毒抗体的交叉抗原；TPPA敏感性高，特异性好，作为确证实验。第31页，课件共34页，创作于2023年2月

临床病例分析1病例：某患者，男，65岁，梅毒抗体检测结果为：

TP抗体（时间分辨）：1.25S/CO(<1.0)阳性

TPPA检测结果：阴性

时间分辨敏感性太高，假阳性。第32页，课件共34页，创作于2023年2月

临床病例分析2病例：某患者，男，40岁，梅毒检测结果为：

TP抗体（时间分辨）:24.65S/CO(<1.0)阳性TPPA:阳性