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文档简介
镇痛药对小鼠痛阈值的影响实验
目的1.了解镇痛药对实验动物痛阈值的影响。2.掌握镇痛实验(热板法)的操作方法。原理小鼠的足部接触热板,受热刺激而产生疼痛反应(即舔后足),以产生痛反应所需的时间为痛阈值,通过测量给药小鼠痛阈值的改变反映药物的镇痛作用。材料
1.动物:小白鼠25克~30克,雌性。2.仪器:YLS—6B智能热板仪、秒表、注射器。3.药物与试剂:曲马多组注射液、生理盐水、苦味酸方法1.调节智能热板仪:使温度控制在55±0.50C,热板预热10min。2.筛选合格小鼠:取20-26g雌性小鼠数只,每次1只放在热板上,小鼠自放在热板上至出现舔足所需的时间(秒)作为该鼠的痛阈值。凡舔后足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者弃之不用。将合格的小鼠随机分为2组,重复测定其正常痛阈值,计算两次正常痛阈值的平均值,作为该鼠给药前痛阈值。计算公式
痛阈提高百分率=(用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值)÷用药前平均痛阈值×100%注意事项1、以雌性为好,雄性受热后阴囊松弛触及热板,易致过敏反应。2、室温以15℃~20℃为宜,过低小鼠反应迟钝,过高小鼠过于敏感易引起跳跃,影响结果准确性。3、正常小鼠放入热板后易出现不安、举前肢、舔前足、踢后肢等现象,这些动作不作为疼痛指标,只有舔后足才作为疼痛指标。扭体法原理:某些化学物质(酒石酸锑钾溶液、醋酸溶液等),注入小鼠腹腔可刺激腹膜引起持久的疼痛,致使小鼠产生“扭体”反应(腹部内凹,躯体与后腿伸张等)。镇痛药减轻疼痛反应,可明显减少“扭体”反应的小鼠数。扭体反应引起的一种间歇发作的运动反应,表现为腹部收缩、腹前壁紧贴笼底、臀部歪扭和躯干后肢伸展,呈一种特殊姿势。国外一般称为“Writhing”,也有称为“Stretching”、“Cramping”、或“Squirming”。这种反应的发生机制和它在药理学上的意义迄未肯定。由于镇痛药可对机这一反应,曾建议用作筛选镇痛药的方法。注意1、醋酸有挥发性,用前宜临时配制,存放过久可使作用减弱。醋酸扭体法制备疼痛模型最适醋酸刺激浓度为1.1%。每只动物腹腔注射部位和操作技术力求一致。2、小鼠体重轻,“扭体反应”次数较低。3、室温以20°C
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