农药残留和霉菌素检测 Microsoft PowerPoint 演示文稿-课件

农药残留量的测定

农药残留是指由于存留在农产品、或食品、饲料、药材等产品中的农药及其降解代谢产物,还包括环境背景中存有的农药污染物或持久性农药的残留物再次在产品中形成的残留。一般来说,农药残留量是指农药本体及其代谢物的残留量的总和,表示单位为mg/kg。当农药过量或长期施用,导致农产品或食物中农药残存数量超过最大残留限量(MRL)时,将对人和动物产生不良影响,或通过食物链对生态系统中其他生物造成毒害。食品中的农药残留途径：①施用农药后对作物或食品的直接污染；②空气、水、土壤的污染造成动植物体内含有农药残留，而间接污染食品；③来自食物链和生物富集作用，如：水中农药→浮游生物→水产动物→高浓度农药残留食品；④运输及贮存中由于和农药混放而造成食品污染。色谱技术1薄层色谱法薄层色谱的原理：是将吸附剂涂布于诸如玻璃板、铝薄板等固相支持物,经枯燥后形成薄层板,当点有样品的薄层板被放入盛有流动相的层析缸中时,在流动相沿固定相(即吸附剂)移动的过程中,样品中不同的组分受到来自固定相和流动相的作用力不同,致使各组分的在固定相上迁移的速率不同,从而使得各组分被分开。被别离的各组分在薄层板上形成不同的斑点,斑点的位置常用比移值(Rf)来表示：Rf=斑点中心到原点中心距离/展开剂前沿到原点中心距离在一定的色谱条件下,物质的Rf值是一定的,因此可以用Rf值进行定性分析。2纸色谱作为快速别离和鉴定的一种手段，纸色谱法可以进行有机氯农药残留的半定量检测，与国家标准方法色谱法相比无显著差异，具有方法简单，操作方便快捷，灵敏和干扰少等特点。3气象色谱法气象色谱法具有高选择性，高别离效能，高灵敏度，快速等优点。易汽化，汽化后部发生分解等现象的农药均可用此方法检测，使用的气谱柱主要是填充柱和毛细管柱，检测仪器有FID,ECD,TCD,FPD,PID等。食品中有机氯农药残留量测定一、有机氯农药的结构与性质有机氯农药〔简称为OCP〕分为DDT类和氯化甲撑萘类两类：DDT类，称为氯化苯及其衍生物，包括DDT、666等；氯化甲撑萘类，如艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、七氯、氯丹、毒杀芬等。一)666〔简称BHC〕白色或淡黄色固体，不溶于水，易溶于脂肪、丙酮、乙醚及环已烷等有机溶剂，对光、热、空气、强酸稳定，遇碱分解二)DDT〔简称二二三〕白色或淡黄色固体；不溶于水，易溶于脂肪、丙酮、四氯化碳、苯、氯苯、乙醚等有机试剂，对光、酸稳定，对热较稳定，遇碱分解〔1〕提取粮食：称取样品→石油醚提取→过滤到分液漏斗→定至约100ml蔬菜：称取样品→捣碎→取匀浆→丙酮提取→过滤到分液漏斗→石油醚提取→加硫酸钠溶液→别离→石油醚层过滤至分液漏斗→定至约100ml肉类及动物组织：称取绞碎样品→加硫酸钠研磨→加石油醚提取→浓缩至约100ml〔2〕净化〔3〕测定①色谱条件电子捕获检测器〔ECD〕气化室温度：190℃〔215℃〕色谱柱温度：160℃〔195℃〕检测器温度：165℃〔225℃〕载气流速：60ml/min〔90ml/min〕色谱柱：固定液1.5%OV-17和2%QF-1，担体白色硅藻土〔80~100目〕，3~4mm×2m②标准曲线制备〔3〕测定③样品测定〔二〕气相色谱法〔GB/T146—2003〕〔食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的测定〕样品中有机氯和拟除虫菊酯农药用有机溶剂提取，经液液分配及层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器检测，根据色谱峰的保存时间定性，外标法定量。取粮食样品经粮食粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样。取蔬菜样品擦净，去掉非可食局部后备用。粮食样品：称取10g粮食试样，置于100mL具塞三角瓶中，参加20mL石油醚提取，于振荡器上振摇0.5h。蔬菜样品：称取20g蔬菜试样，置于组织捣碎杯中，参加30mL丙酮和30mL石油醚，于捣碎机上捣碎2min，捣碎液经抽滤，滤液移入250mL分液漏斗中，参加100mL2%硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层，将下层溶液转移到另一250mL分液漏斗中，用20mL×2石油醚萃取，合并三次萃取的石油醚层，过无水硫酸钠层，于旋转蒸发仪上浓缩至10mL。层析柱的制备：玻璃层析柱中先参加1cm高无水硫酸钠，再参加5g5%脱活弗罗里硅土，最后参加1cm高无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL石油醚淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。净化与浓缩：准确吸取样品提取液2mL，参加已淋洗过的净化柱中，用100mL石油醚＋乙酸乙酯(95∶5)洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸发仪上浓缩近干，用少量石油醚屡次溶解残渣于刻度离心管中，最终定容至1.0mL，供气相色谱分析。5.3测定

(1)气相色谱参考条件

色谱柱：石英弹性毛细管色谱柱，0.25mm(内径)×15m，内涂有OV－101固定液。

气体流速：氮气40mL/min，尾吹气60mL/min，分流比1∶50。

温度：柱温自180℃→230℃〔5℃/min)保持30min；检测器、进样口温度250℃。(2)色谱分析吸取1μL试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰的保存时间和峰高。再吸取1μL混标溶液进样，记录色谱峰的保存时间和峰高。根据组分在色谱上的出峰时间与标准组分比较定性；用外标法与标准组分比较定量。〔三〕薄层色谱法样品中666、DDT经有机溶剂〔石油醚〕提取，提取液经浓硫酸磺化，净化处理液浓缩后点于薄层板上，经展开后，用硝酸银显色，经紫外线照射后生成黑色斑点，与标准比较定性、定量分析。2.试剂、仪器提取→净化→浓缩→薄层板制备→点样→展开(丙酮:石=1+99)→显色，硝酸银显色剂(硝酸银+苯氧乙醇+过氧化氢)，紫外线〔254nm)食品中有机磷农药残留量测定一、有机磷农药的结构与性质有机磷农药是指在组成上含有磷的有机杀虫剂、杀菌剂等。主要类型有：磷酸酯型，如久效磷、磷胺等；二硫代磷酸酯型，如马拉硫磷、乐果、甲拌磷、亚胺硫磷等；硫酮磷酸酯型，如对硫磷、甲基对硫磷、内吸磷、杀螟松等；硫醇磷酸酯型，如氧化乐果、伏地松；磷酰胺型，如甲胺磷、乙酰甲胺磷；膦酸酯型，如敌百虫、苯脯磷有机磷农药种类很多，按毒性分为高毒〔剧毒〕、中毒、低毒三类；溶解性：多数难溶于水，可溶于有机溶剂水解性：在碱性介质中易水解氧化性：硫代磷酸酯类在溴、紫外线等作用下其中的S可被O取代。酶抑制活性：可抑制羧酸酯酶、胆碱酯酶的活性二、测定方法〔一〕气相色谱法〔GB5009.20-2003〕1.水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留测定方法本标准规定了水果、蔬菜、谷类中敌敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巴胺磷、二嗪农、乙嘧硫磷、甲基嘧啶硫磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胺硫磷、氧化喹硫磷、稻丰散、甲喹硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喹硫磷、对硫磷、杀螟硫磷的残留量分析方法。样品经提取、净化后注入气相色谱仪测定。含有机磷的样品在富氢焰上燃烧，以HPO*碎片的形式，放射出波长526nm的特征光；这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。样品的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。1.2试剂、仪器1.3试样的制备

取粮食样品经粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样；取水果、蔬菜样品洗净，晾干，去掉非可食局部后制成待分析试样。1.4分析步骤

1.4.1提取

水果、蔬菜称取50.00g试样，置于300mL烧杯中，参加50mL水和100mL丙酮(提取液总体积为150mL)，用组织捣碎机提取1~2min。匀浆液经铺有二层滤纸和约10gCelite545的布氏漏斗减压抽滤。从滤液中分取100mL移至500mL分液漏斗中。

谷物称取25.00g试样，置于300mL烧杯中，参加50mL水和100mL丙酮，以下步骤同上。1.4.2净化

向滤液中参加10~15g氯化钠使溶液处于饱和状态。猛烈振摇2~3min，静置10min，使丙酮从水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。

将丙酮与二氯甲烷提取液合并，经装有20~30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再以约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠。洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液定量转移至5~25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。1.4.3气相色谱测定

色谱参考条件

色谱柱:a.玻璃柱2.6m×3mm(i.d)，填装涂有4.5%(m/m)DC200＋2.5%(m/m)OV-17的ChromosorbW/AW/DMCS(80~100目)的担体。

b.玻璃柱2.6m×3mm(i.d)，填装涂有1.5%(m/m)DCOE-1的ChromosorbW/AWDMCS(60~80目)。

气体速度氮气(N2)50mL/min、氢气(H2)100mL/min、空气50mL/min。

温度：柱箱240℃、汽化室260℃、检测器270℃吸取2~5μL混合标准液及样品净化液注入色谱仪中，以保存时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。2.粮、菜、油中有机磷农药残留量测定方法本标准规定了粮、菜、油等食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷的测定方法。原理、试剂、仪器同1.水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留测定方法分析步骤

2.1提取与净化

蔬菜：将蔬菜切碎混匀。称取10.00g混匀的样品，置于250mL具塞锥形瓶中，加30～100g无水硫酸钠(根据蔬菜含水量)脱水，加0.2~0.8g活性炭(根据蔬菜色素含量)脱色。加70mL二氯甲烷，在振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤。量取35mL滤液，在通风柜中室温下自然挥至近干，用二氯甲烷少量屡次研洗残渣，移入10mL(或5mL)具塞刻度试管中，并定容至2.0mL，备用。2.1提取与净化进稻谷：脱壳、磨粉、过20目筛、混匀。称取10.00g，置于具塞锥形瓶中，参加0.5g中性氧化铝及20mL二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，那么加30mL二氯甲烷，振摇过滤，量取15mL滤液浓缩并定容至2.0mL进样。小麦、玉米：将样品磨碎过20目筛、混匀。称取10.00g置于具塞锥形瓶中，参加0.5g中性氧化铝、0.2g活性炭及20mL二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，那么加30mL二氯甲烷，振摇过滤，量取15mL滤液浓缩，并定容至2mL样。

植物油2.2气相色谱测定

色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长1.5～2.0m。

别离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的色谱柱。a.内装涂以2.5%(m/m)SE-30和3%(m/m)QF-混合固定液的60~80目ChromosorbWAWDMCS。b.内装涂以1.5%(m/m)OV-7和2%(m/m)QF-1混合固定液的60~80目ChromosorbWAWDMCS。c.或内装涂以2%(m/m)OV-101和2%(m/m)QF-混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。

别离测定甲拌磷、虫螨磷、稻瘟净、倍硫磷和杀螟硫磷的色谱柱。a.内装涂以3%(m/m)PE-GA和5%(m/m)QF-1混合固定液的60~80目ChromosorbWAWDMCS。b.内装涂以2%(m/m)NPGA和3%(m/m)QF-1混合固定液的60~80目ChromosorbWAWDMCS。气流速度：载气为氮气80mL/min；空气50mL/min；氢气180mL/min(氮气、空气和氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最正确比例条件)。

温度：进样口为220℃；检测器为240℃；柱温为180℃，(测定敌敌畏为130℃)将混合农药标准使用液2~5μL分别注入气相色谱仪中，可测得不同浓度有机磷标准溶液的峰高。分别绘制有机磷标准曲线。同时取样品溶液2~5μL注入气相色谱仪中，测得的峰高从标准曲线图中查出相应的含量。3.肉类、鱼类中有机磷农药残留量的测定方法

本标准适用于肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷农药的残留分析。敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷最低检出量为0.6，0.3，0.3，0.15ng，当进样量相当于0.002g时，最低检出浓度分别为0.03，0.015，0.015，0.008mg/kg。原理、试剂、仪器同前。分析步骤

提取净化：将有代表性的肉、鱼样品切碎混匀，称取20.00g于250mL具塞锥瓶中，加60mL丙酮，于振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤，取滤液30mL于125mL分液漏斗中，加60mL硫酸钠溶液(20g/L)和30mL二氯甲烷，振摇提取2min后，静置分层，将下层提取液放入另一个125mL分液漏斗中，再用20mL二氯甲烷于丙酮水溶液中同样提取后，合并二次提取液，在二氯甲烷提取液中加1g中性氧化铝(如为鱼肉加5.5g)，轻摇数次，加20g无水硫酸钠。振摇脱水，过滤于蒸发皿中，用20mL二氯甲烷分二次洗涤分液漏斗，倒入蒸发皿中，在55℃水浴上蒸发浓缩至1mL左右，用丙酮少量屡次将残液洗入具塞刻度小试管中，定容至2~5mL，如溶液含少量水，可在蒸发皿中加少量无水硫酸钠后，再用丙酮洗入具塞刻度小试管中，定容。色谱柱：内径3.2mm，长1.6m玻璃柱，内装涂以OV-17(1.5%m/m)和QF-1(2%m/m)的混合固定液的80~100目ChromosorbWAWDMCS。

流量：氮气60mL/min；氢气0.7kg/cm2；空气0.5kg/cm2。

温度：检测器250℃，进样口250℃，柱温220℃(测定敌敌畏时为190℃)。如同时测定四种农药可用程序升温。测定：将标准使用液或样品液进样1~3μＬ，以保存时间定性；测量峰高，与标准比较进行定量。兽药残留兽药残留的种类与危害典型的兽药是指用于预防和治疗畜禽疾病的药物。但是,随着集约化养殖生产的开展,一些化学的、生物的药用成分被开发成具有某些成效的动物保健品或饲料添加剂,也属于兽药的范畴。兽药的主要用途有防病治病、促进生长、提高生产性能、改善动物性食品的品质等。兽药残留是指动物性产品的任何可食局部含有兽药母化合物或其代谢物。兽药最高残留限量〔MRLVD〕是指某种兽药而在食物中或食物外表产生的的最高允许兽药残留量〔单位µg/kg,以鲜重计〕。兽药残留主要是由于各种正常用药和药物滥用造成的,另外,休药期(是指自停止给药到动物获准屠宰或其动物性产品获准上市的间隔时间)过短,是造成动物性食品兽药残留过量的另一个重要原因。常见兽药残留的种类如下:1．抗生素类药物这类药物多为天然发酵产物，是临床应用最多的一类抗菌药物，如青霉素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、螺旋霉素、链霉素、土霉素、金霉素等。青霉素类最容易引发超敏反响，四环素类、链霉素有时也能引起超敏反响。轻至中度的超敏反响一般表现为短时间内出现血压下降、皮疹、身体发热、血管神经性水肿、血清病样反响等，极度超敏反响可能导致过敏性休克甚至死亡。长期摄入含氨基糖苷类残留超标的动物性食品，可损害听力及肾脏功能。2．磺胺类药物:主要用于抗菌消炎，如磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺眯、菌得清、新诺明等。近年来，磺胺类药物在动物性食品中的残留超标现象，在所有兽药当中是最严重的。长期摄入含磺胺类药物残留的动物性食品后，药物可不断在体内蓄积。磺胺类药主要经肾脏排出，在尿中浓度较高，其溶解度又较低，尤其当尿液偏酸性时，可在肾盂、输尿管或膀胱内析出结晶，产生刺激和阻塞，造成泌尿系统损伤，引起结晶尿、血尿、管型尿、3．硝基呋喃类药物主要用于抗菌消炎，如呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等。通过食品摄入超量硝基呋喃类残留后，对人体造成的危害主要是胃肠反响和超敏反响。剂量过大或肾功能不全者，可引起严重毒性反响，主要表现为周围神经炎、嗜酸性白细胞增多、溶血性贫血等。长期摄人可引起不可逆性末端神经损害，如感觉异常、疼痛及肌肉萎缩等，我国尚未制定硝基呋喃类药物残留检测标准。4．抗寄生虫类药物这类药物主要用于驱虫或杀虫，如苯并咪唑、左旋咪唑、克球酚、吡喹酮等。而常用的苯并咪唑类抗寄生虫药物有丙硫苯咪唑、丙氧咪唑、噻苯咪唑、甲苯咪唑、丁苯咪唑等。食用残留有苯并咪唑类药物的动物性食品，对人主要的潜在危害是致畸作用和致突变作用。对于妊娠期的孕妇有可能发生胎儿畸形，如短肢、兔唇等；对所有消费者来说，可能由于其致突变作用使消费者发生癌变和性染色体畸变，从而其后代有发生畸形的危险。5．激素类药物这类药物主要用于提高动物的繁殖和加快生长发育速度，使用于动物的激素有性激素和皮质激素，而以性激素最常用，如孕酮、睾酮、雌二醇等。正常情况下，动物性食品中天然存在的性激素含量是很低的，因而不会干扰消费者的激素代谢和生理机能。但摄人性激素残留超标的动物性食品，可能会影响消费者的正常生理机能，并具有一定的致癌性，可能导致儿童早熟、儿童发育异常、儿童异性趋向等。盐酸克伦特罗的检验GB/T5009.192-2003?动物性食品中克伦特罗残留量的测定?第三法——GC/MS法。根本原理：微孔板包被有针对克伦特罗IgG的抗抗体；参加克伦特罗抗体，经过温育和洗涤后；参加酶标记物、标准或样品溶液，克伦特罗与酶标记物竞争与抗体结合；没有连接的克伦特罗酶标记物在被洗涤除去；参加酶底物和发色剂并且温育，结合的酶标记物将无色的发色剂为蓝色的产物，参加反响终止液使颜色有蓝转变为黄色。在450nm处比色测定。1〕试剂盒的选择和准备固相载体：吸附性能，孔底透明度，板、孔性能差异；包被物：纯度；储存条件：2-8℃；室温平衡：试验用试剂应提前1-2h从冰箱中取出，待温度与室温平衡后使用；及时保存：试剂完毕后不需用的局部应及时放回冰箱保存。2〕试样的处理尽可能使用新鲜样本；进行必要的前处理。3〕加样加样前样本必须混合均匀；加在板孔底部，防止加在孔壁上部；不可溅出，不可产生气泡；每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染；加酶结合物和底物时可用定量多道加液器。4〕温育温育前必须震动混匀，但不可溅出；温育的温度和时间应按规定力求准确；温育必须避光。5〕洗涤清洗必须彻底；防止出现板孔枯燥；反转倾空微孔板要迅速，防止清洗液混合。6〕显色和比色显色的温度和时间应按规定力求准确；显色必须避光；使用多道加液器加终止液；显色完毕后尽快比色测定常见问题1〕样本曲线偏离正常。2〕样本吸光值高于标准曲线的最大吸光值零标准。3〕样本吸光值低于标准曲线的最小吸光值。食品中霉菌毒素及其检测一、霉菌毒素的种类霉菌是一些丝状真菌的通称，在自然界分布很广，几乎无处不有，主要生长在不通风、阴暗、潮湿和温度较高的环境中。霉菌可非常容易地生长在各种食品上并产生危害性很强的霉菌毒素。目前的霉菌毒素约有200余种，与食品关系较为密切的有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素等。有5种毒素可引起动物致癌，它们是黄曲霉毒素(B-、G。、M，)、黄天精、环氯素、杂色曲霉素和展青霉素。霉菌污染食品可使食品的食用价值降低，甚至使之完全不能食用，造成巨大的经济损失。据统计全世界每年平均有2％的谷物由于霉变不能食用。霉菌毒素引起的中毒大多通过被霉菌污染的粮食、油料作物以及发酵食品等引起。霉菌毒素多数有较强的耐热性，一般的烹调加热方法不能使其破坏。当人体摄入的霉菌毒素量到达一定程度后，可引起中毒。霉菌中毒往往表现为明显的地方性和季节性，临床表现较为复杂，有急性中毒、慢性中毒以及致癌、致畸和致突变等。食品中常见的几类霉菌毒素如下。

1．黄曲霉毒素黄曲霉毒素(Aflatoxins。简写AFT)是黄曲霉、寄生曲霉及温特曲霉等产毒菌株的代谢产物，是一群结构类似的化合物。目前已发现17种黄曲霉毒素。根据其在波长为365nm紫外光下呈现不同颜色的荧光而分为B、G二大类：B大类在氧化铝薄层板上于紫外光照射下呈现蓝色荧光；G大类那么呈绿色荧光。

AFT主要污染粮油及其制品，如花生、花生油、玉米、大米、棉籽等被污染严重，此外各种植物性与动物性食品也能被广泛污染，如在胡桃、杏仁、高梁、小麦、豆类、王豆、皮蛋、奶与奶制品、干咸鱼及辣椒中均有AFT污染。其污染程度与各种作物生物学特性和化学组成以及成熟期所处的气候条件有很大关系。一般来说，富含脂肪的粮食易产生AFT。此外，收获季节高温、高湿，也易造成AFT的污染。(一)黄曲霉毒素的结构1.溶解性：AFT的分子量为312—346，难溶于水、乙醚、石油醚及己烷中，易溶于油和甲醇、丙酮、氯仿、苯、等有机溶剂中。2．稳定性：AFT是一组性质比较稳定的化合物；其对光、热、酸较稳定，而对碱和氧化剂那么不稳定。样品预处理样品预处理包括APT的提取、净化及浓缩等过程。2．赭曲霉毒素赭曲霉毒素是分子结构类似的一组化合物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D和α，是曲霉属和青霉属的某些菌种的次生代谢产物，是谷物、大豆、咖啡豆和可可豆的常见污染物，其中赭曲霉毒素A是该类毒素的代表化合物。赭曲霉毒素A微溶于水，易溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液，耐热，稳定性强，在紫外光下呈绿色荧光。赭曲霉毒素A的毒性较强，接近黄曲霉毒素B1，主要损伤肾脏。在巴尔干地方性肾病流行地区，6％～18％人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。1993年国家癌症研究机构认为赭曲霉毒素A同时也是一种具有免疫抑制功能、神经毒性以及致癌、致畸形的物质。3．展青霉毒素展青霉毒素是多种真菌的有毒代谢产物，该物质一方面是一种广谱的抗生素，另一方面对小鼠、兔子等试验动物具有较强的毒性。其污染食品和饲料后产生的毒性远大于其抗菌作用。容易污染食品和饲料并产生展青霉素的真菌主要有柯麻青霉、扩展青霉、棒曲霉、巨大曲霉、雪白丝衣霉等。展青霉素还能够对苹果及其制品造成严重污染。展青霉素对大鼠的肾及胃肠系统有毒性作用，也有致癌、致畸形的作用。目前，已有十几个国家制定了水果及其制品中展青霉素的限量标准。4．单端孢霉烯族化合物该组化合物的主要毒性表现在细胞毒性、免疫抑制和致畸、致癌作用。关于单端孢霉烯族化合物造成的食物中毒在国内外已有多起报道，主要病症是恶心、呕吐、头痛、腹痛、腹泻等。5．玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮也称F一2毒素。镰刀菌属的多个菌种如禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、粉红镰刀菌、半裸镰刀菌、木贼镰刀菌、黄色镰刀茵、茄病镰刀菌、串珠镰刀菌等都可以产生该毒素。这些菌广泛存在于土壤、空气及污染的谷物中，主要污染玉米，也污染大麦、小麦、燕麦等。玉米的阳性检出率可达45％，最高含毒量可达2909mg／蝇，小麦的阳性检出率可达20％，含毒量为0．36～11．05mg／k。玉米赤霉烯酮对动物的急性毒性很小。该化合物具有雌激素样的作用，主要作用于生殖系统，可引起阴道和乳腺肿胀、流产、畸胎、死胎等。对玉米赤霉烯酮的最高限量很多国家已制定了标准，如巴西规定玉米中不超过200ug／kg，罗马尼亚规定所有食品中不超过30ug/kg，我国尚未制定限量。6．杂色曲霉素

杂色曲霉素主要是由杂色曲霉、构巢曲霉、皱褶曲霉、黄褐曲霉、四脊曲霉等产生，主要污染玉米、花生、大米、小麦等。杂色曲霉素与黄曲霉素B1相似。杂色曲霉素可以转换为黄曲霉素B1。杂色曲霉素是一种毒性很强的肝及肾脏毒素。肝癌高发区居民所食用的食物中杂色曲霉素的污染也较为严重。食品中杂色曲霉素的测定参见GB／T5009．25—1996，该标准采用的是薄层色谱法，喷三氯化铝显色，加热后，紫外光下观察。7．棒曲霉素

8．岛青霉毒素

9．其他霉菌毒素串珠镰刀菌毒素、伏马菌素(主要是FBl)这两种毒素都可由串珠镰刀菌产生，两者皆为水溶性化合物，都有强烈的毒性酶联免疫法测定原理：固相酶联免疫吸附。B1特异性抗体包被于聚苯乙烯微量反响板的孔穴中，再参加样品提取液〔未知抗原〕及B1抗原〔抗原〕，使两者与抗体进行免疫竞争反响，然后加酶底物显色，颜色的深浅取决于抗体和酶标B1抗原结合的量，即样品中B1多，那么被抗体结合的B1抗原少，颜色浅，反之那么深。用目测法或酶标仪B1标准样比较判断样品中B1的含量。仪器：黄曲霉毒素B1测定仪由于AFT是一剧毒且强致癌性物质，使用时应特别小心应按以下规定进行实验操作和实验后的清洗消毒工作。①实验时应戴口罩；配标准溶液时戴手术手套。②假设衣服被污染，须用5％次氯酸钠溶液浸泡15—30分钟再用清水洗净。③对于剩余的AFT标液或阳性样液，应先用5％次氮酸钠处理前方可倒到指定的地方。④实验中所用的或被污染的玻璃器皿须经5％次氯酸钠溶液浸泡5分钟再清洗之。⑤实验完毕应用5％次氯酸钠清洗消毒实验台等。⑥万一手皮膜被污染，可用次氯酸纳溶液搓洗，再用肥皂水洗净。赭曲霉毒素A的检测原理

用三氯甲烷-0.1mol/L磷酸或石油醚-甲醇/水提取样品中的赭曲霉毒素A，样品提取

液经液-液分配后，根据其在365nm紫外光灯下产生黄绿色荧光，在薄层色谱板上与标准

比较测定含量。

试剂

以下试剂除特殊规定外均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度的水。

石油醚(60～90℃或30～60℃)。

甲醇。三氯甲烷。甲苯。乙酸乙酯。甲酸。冰乙酸乙醚。苯-乙腈(98：2)。0.1mol/L磷酸[c(H3PO4)=0.1mol/L]：称取11.5g磷酸(85%)加水稀释至1000mL。

2mol/L盐酸溶液[c(HCL)=2mol/L]：量取20mL盐酸，加水稀释至120mL。

4%氯化钠溶液。

0.1mol/L碳酸氢钠溶液[c(NaHCO3)=0.1mol/L]：称取8.4g碳酸氢钠,加适量水溶解，

并用水稀释至1000mL。

硅胶G：薄层层析用。赭曲霉毒素A(以下简称OA)标准溶液所有玻璃仪器均需用稀盐酸浸泡，用自来水，蒸馏水冲洗。

1小型粉碎机。2电动振荡器。

3玻璃板：5cm×20cm。4薄层涂布器。

5展开槽：内长25cm、宽6cm、高4cm6紫外光灯：365nm。

7微量注射器：10μL、50μL。

8具0.2mL尾管的10mL，小浓缩瓶提取苯-乙腈(98：2)溶解残渣,摇匀,供薄层色谱点样用。

测定

薄层板的制备

称取4g硅胶G,加约10mL水于乳钵中研磨至糊状。立即倒入涂布器内制成5cm×20cm,

厚度0.3mm的薄层板三块,在空气中枯燥后,在105～110℃活化1h，取出放枯燥器中保存。

点样

取两块