果蝇双因子杂交张玉杰实验报告

果蝇双因子杂交、伴性遗传杂交和三点测交姓名：张玉杰 系年级：2013级生物科学班 同组者：巩昊洲科目：遗传学实验 题目：果蝇杂交实验 学号201300140138实验目的1、 学习果蝇杂交方法。2、 通过实验验证自由组合规律、伴性遗传规律。3、 通过三点测交学习基因定位(遗传做图)方法。4、 学习遗传学数据统计处理方法。实验原理1•实验室果蝇品系：18野生型14檀黑体残翅(eevgvg)6白眼小翅卷刚毛wmsnw白眼B(bar)棒眼Cy翻翅Notch缺刻翅b(bb)黑体y黄体nub2匙形翅2•双因子杂交本实验使用18号野生型果蝇和14号纯合黑檀体、残翅果蝇进行杂交，其中黑檀体对灰体为隐性，残翅对长翅为隐性，两对基因位于非同源染色体上。反交正交反交18?X148P灰长黑残F1灰长014?X18台18?X148P灰长黑残F1灰长0F]灰长0灰残：黑长：黑残=9:3:3:1双因F:灰长：灰残：黑长：黑残=9灰残：黑长：黑残=9:3:3:1双因3•伴性遗传杂交本实验使用18号野生型果蝇与纯合白眼果蝇杂交，其中白眼相对于红眼是隐性性状，白眼基因位于X染色体上。反交 正交18?Xw18?Xw台P x+x+ XwY?红眼台白眼w?X188PXWXWX+Y8白眼？红眼F:X+X+2X+XwX+YXwYF: X+Xw2XwXwX+YXwY皐红眼皐红眼台红眼台白眼皐红眼皐白眼台红眼台白眼1:1:1:111:1:100伴性遗传图解三点测交本实验使用6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇与18号野生型果蝇杂交，获得F1代后再自由交配即可获得具有8种表型的测交F2代。白眼、卷刚毛、小翅均为X染色体上的隐性性状。18号P6号皐（wsnm/wsnm） 台（+++/Y）白卷小］ 红直F［： £（+++/wsnm） b（wsnm/丫）v0（测交）红直长（+++）白直长（w++）红直小（++m）红卷长（+sn+）

白卷小（wsnm）红卷小（+snm）白卷长（wsn+）白直小（w+m）F28种表型实验材料：18号野生型果蝇，14号纯合黑檀体、残翅果蝇，白眼果蝇，6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇；麻醉瓶、酒精灯、玻璃板、毛笔、培养管、酒精棉球、乙醚、解剖镜实验步骤：【实验步骤】1、 培养上表所示4个品系的果蝇，从子代中分别挑选出处女蝇和雄果蝇。2、 对麻醉瓶进行消毒，将各品系果蝇分别麻醉。按照表2所示分别放入有玉米培养基的指管中，保证每管至少2只雌蝇和2只雄蝇。23°C培养。做好标记。3、 7天后移去亲本，待F1成蝇出来后观察记录F1的性状。正反交产生的F1不必挑处女蝇。4、 将F1雌雄果蝇进行自交，把雌雄果蝇分别转移到新的指管中，每管3-4对，23C培养。全程中注意检查有无霉菌污染，受到霉菌污染的生物材料要及时处理、不再使用。果蝇不足时，可引入其他组对应品系的果蝇，或对应的子代果蝇进行补充。5、 7天后移去F1，待F2化为成蝇后观察性状，并记录统计数量（观察的性状为：眼色、翅形、刚毛、体色）。

表2杂交实验亲本杂交类型父本母本双因子正交14号18号双因子反交18号14号伴性正交w号18号伴性反交18号w号三点测交18号6号实验结果及数据处理:伴性遗传：反交：18早XW£雄性白眼：16雄性红眼：10雌性白眼：1雌性红眼：24伴性遗传反交X2检月佥自由度df=3-1=2,查表知，p〉0.05,0与E在5%显著水平上差异不显著，遗传学上可以认为观察频数与理论频数间的差异属于随机误差，伴性遗传正交符合理论预测规律。正交：W早X18£雄性白眼：18雄性红眼：11雌性白眼：11雌性红眼：30伴性遗传正交X2检验f2表型皐红眼皐白眼台红眼台白眼总计O3011111870E17.517.517.517.570(O-E)156.2542.25156.250.25

(O-E；2/E8.932.418.930.01420.284自由度df=4-l=3，查表知，p〈0.01，结果与理论值差异显著，实得数非常不符合。实验所得数据与按孟德尔第二定律所预期的数据偏差较大，不可能完全由随机误差导致，所以双因子反交可能不符合孟德尔自由组合定律或是孟德尔自由组合定律出现的明显例外。双因子杂交：正交：18早X14£黑体长翅：6黑体残翅：2灰体长翅：34灰体残翅：8双因子正交X2检验f2表型黑体长翅黑体残翅灰体长翅灰体残翅总计O6234850E9.3753.12528.1259.37550(O-E；211.391.26634.5161.89(O-E；2/E1.2150.4051.2270.2023.049自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以结果与理论数无显著差异，实得数符合理论值。双因子杂交：反交：14早X18£黑体长翅：12黑体残翅：3灰体长翅：21灰体残翅：11双因子反交X2检验f2表型黑体长翅黑体残翅灰体长翅灰体残翅总计O123211147E&81252.937526.4375&812547(O-E；210.1600.003929.56644.7852(O-E；2/E1.1530.00131.11840.54302.816自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以结果与理论数无显著差异，实得数符合理论值。三点测交：6早X18£表7三点测交F2结果组别/性状12 3456789101112总数+++13+711+87+1110+821+713+611+913+716+1021+716+1311+12268wmsn4+413+70+62+05+56+413+108+120+310+27+17+4142++sn0+01+06+00+00+00+00+01+11+11+00+00+012wm+0+01+11+01+00+11+03+20+10+00+00+00+012+msn1+11+21+01+02+02+01+22+00+00+00+00+019W++3+12+12+31+53+12+24+33+12+02+00+12+649+m+1+23+11+07+01+65+37+31+01+11+00+04+052w+sn0+16+01+52+20+01+11+13+27+07+02+00+040表8重组值计算发牛重组伎冒重组值图距（单位：cM）w-sn15.5%15.5w-m26.9%26.9sn-m19.5%19.5双交换值=[（15.5+19.5）-26.9]/2=4.05%基因连锁图：六•讨论与分析我组双因子杂交可以看出，正反交符合理论值，而且残翅基因并不影响实验室果蝇的生存。但是伴性遗传出现了较大问题，首先是伴性遗传正交中出现了理论预测之外的结果（1只早白眼）。如果排除实验操作中的问题，那么异常表型的产生可能是由F1代雌果蝇产生配子时减数分裂发生异常，减数分裂II期XwXw未分离，产生XwXwX+基因型（初级例外）导致的。另外，在正交中出现实验数偏离理论值较大的情况，从正交F2代各表型和相应的数量来看，无论哪一对性状都偏离了孟德尔基因分离定律。观察也发现，在果蝇性别上雄蝇与雌蝇数也并非1：1.这么大的误差很有可能是实验