分子生物学原理教案-常用分子生物学技术的原理及应用

常用分子生物学技术的原理及应用教学要求：1．掌握分子杂交、印迹技术及PCR原理。2．熟悉印迹技术的类别及应用，PCR基本过程。3．了解核酸序列分析。4．熟悉基因诊断的概念，常用技术方法及其应用。5．了解基因治疗的概念及其应用。课时安排：总学时6.0第一节分子杂交与印迹技术1.0第二节PCR技术的原理及应用1.0第三节核酸序列分析0.4第四节基因文库0.4第五节生物芯片技术0.4第六节生物大分子相互作用研究技术1.0第七节遗传修饰动物模型的建立与应用0.4第八节疾病相关基因的克隆与鉴定0.4第九节基因诊断和基因治疗1.0重点：1．分子杂交、印迹技术的分类及应用。2．PCR原理及PCR基本过程。3．基因诊断的概念，常用技术方法及其应用。难点：核酸序列分析疾病相关基因的克隆与鉴定教学内容：一、分子杂交与印迹技术1．分子杂交和印迹技术的原理印迹技术、探针技术2．印迹技术的类别及应用DNA印迹、RNA印迹、蛋白质的印迹分析二、PCR技术的原理及应用1．PCR技术的工作原理。2．PCR技术的的主要用途。3．几种重要的PCR衍生技术逆转录PCR、原位PCR、实时PCR、三、核酸序列分析1．DNA链末端终止法化学裂解法2．DNA自动测序四、基因文库1．基因组DNA文库2．cDNA文库五、生物芯片技术1．基因芯片2．蛋白质芯片六、生物大分子相互作用研究技术1．蛋白质相互作用研究技术2．DNA-蛋白质相互作用分子分析技术七、遗传修饰动物模型的建立与应用1．转基因技术2．核转移技术3．基因剔除技术4．基因转移和基因剔除技术在医学发展中的作用八、疾病相关基因的克隆与鉴定1．功能克隆2．定位克隆九、基因诊断和基因治疗1．基因诊断DNA序列分析、PCR技术、基因芯片。2．基因治疗基因治的基本策略、基因治疗的基本程序中、英文专业词汇：nitrocellulose，NC硝酸纤维素southernblottingDNA印渍技术northernblottingRNA印渍技术westernblotting蛋白质印渍技术immunoblotting免疫印渍技术DNAarrayDNA点阵insituhybridization原位杂交dotblotting斑点杂交DNAchipDNA芯片positionedcloning定位克隆transgenicanimal转基因动物geneknockout基因剔除genediagnosis基因诊断genetherapy基因治疗restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLPDNA限制性片段长度多态性allelespecificoligonucleotide，ASO等位基因特异寡核苷酸探针polymerasechainreaction，PCR聚合酶链反应geneknock-out基因敲除genetransfer基因转移思考题：1．印迹技术有哪几类？试比较他们在原理及操作过程中的不同点。2．PCR的原理是什么？试小结其基本过程。3．什么是基因诊断？常用的技术方法有哪些？参考书：1．JeremyM.Berg,JohnL.Tymoczko,LubertStryer.Biochemistry.6thed.NewYork:W.H.Freeman,20072．RobertH.GlewandMiriamD.Rosenthal.Clinicalstudiesinmedicalbiochemistry.3rded.NewYork:OxfordUniversityPress,2007.3．DavidL.Nelson,MichaelM.Cox.LeningerPrinciplesofBiochemistry.4thed.NewYork:WorthP