维生素类药物的分析详解演示文稿

维生素类药物的分析详解演示文稿1本文档共79页；当前第1页；编辑于星期二\5点43分（优选）维生素类药物的分析2本文档共79页；当前第2页；编辑于星期二\5点43分维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。脂溶性：VitA、D2、D3、E、K1等水溶性：VitB族(B1、B2、B6、B12)、VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺3本文档共79页；当前第3页；编辑于星期二\5点43分维生素的共同特点：这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在；它们不能供给机体热能。也不是构成组织的基本原料，主要功用是通过作为辅酶的成份调节代谢过程，需要量极小；它们一般在体内不能合成，或合成量不能满足生理需要，必须经常从食物中摄取；长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。4本文档共79页；当前第4页；编辑于星期二\5点43分维生素缺乏导致的病症维生素A缺乏——夜盲症、干眼病（动物内脏、富含胡萝卜素的蔬菜水果）维生素B1缺乏——脚气病（谷类、豆类、坚果类、瘦猪肉及动物内脏）维生素C缺乏——坏血病（新鲜蔬菜和水果）维生素D缺乏——小儿佝偻病与成人骨软化病(足够的日光、海鱼、动物内脏、蛋黄)维生素E缺乏——一般不缺乏（体内驻留时间长）。（植物油）5本文档共79页；当前第5页；编辑于星期二\5点43分R:-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯第一节维生素A一、结构与性质环己烯共轭多烯醇6本文档共79页；当前第6页；编辑于星期二\5点43分结构特点：（1）环己烯+共轭多烯侧链；（2）天然VA侧链为全反式；（3）天然来源主要是鱼肝油，为醋酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人工合成。7本文档共79页；当前第7页；编辑于星期二\5点43分性质：1、紫外吸收＊具有共轭多烯侧链－－紫外吸收。＊最大吸收波长在325～328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同。＊有干扰物质存在（VitA2、VitA3、鲸醇）。8本文档共79页；当前第8页；编辑于星期二\5点43分VitA2VitA3鲸醇脱水去氢二聚体9本文档共79页；当前第9页；编辑于星期二\5点43分2、不稳定性：共轭多烯侧链易被氧化，△或有金属离子存在时氧化↑环氧化物VitA醛VitA酸10本文档共79页；当前第10页；编辑于星期二\5点43分CHCl33.与三氯化锑发生呈色反应（鉴别、含量测定）4.溶解性：不溶于水，易溶于有机溶剂和植物油等。11本文档共79页；当前第11页；编辑于星期二\5点43分条件：无水、无醇CHCl3二、鉴别试验1.三氯化锑反应蓝色紫红12本文档共79页；当前第12页；编辑于星期二\5点43分注意事项：无水－－水可使三氯化锑水解成氯化氧锑（SbOCl）白色沉淀，干扰比色。无醇－－乙醇可以和碳正离子作用使其正电荷消失。13本文档共79页；当前第13页；编辑于星期二\5点43分λmax326nm一个吸收峰λmax350～390nm三个吸收峰2、UV法（BP2000）去水VitA（VitA3）↓VitA14本文档共79页；当前第14页；编辑于星期二\5点43分15本文档共79页；当前第15页；编辑于星期二\5点43分3、TLC法

BP杂质对照品法显色剂：三氯化锑USP显色剂：磷钼酸规定斑点颜色和Rf值16本文档共79页；当前第16页；编辑于星期二\5点43分三、含量测定UV法:三点校正法（ChP2010第一法）三氯化锑比色法HPLC法（ChP2010第二法）17本文档共79页；当前第17页；编辑于星期二\5点43分1、为何要采用三点校正法？维生素A原料药中常混有杂质，如维生素A2、维生素A3等，这些杂质在维生素A的最大吸收波长附近有吸收，采用三点校正法可以消除这些杂质的干扰。2、测定原理1）在310～340nm范围内，杂质吸收呈一直线，且随波长的增大吸收度下降。2）物质对光吸收呈加和性。三点校正法18本文档共79页；当前第18页；编辑于星期二\5点43分3、波长的选择：一点选在维生素A的最大吸收波长处（λ1），其它两点选在λ1的两侧。第一法（等波长差法）波长为λ1=328nm、λ2=316nm、λ3=340nm；测定对象：VA醋酸酯第二法（等吸收比法）波长为λ1=325nm、λ2=310nm、λ3=334nm；测定对象：VA醇19本文档共79页；当前第19页；编辑于星期二\5点43分4、测定方法首先判断用哪个吸收度(A328orA328(校正)）进行含量计算。第一法：供试液浓度为9～15IU/ml，溶剂为环己烷，在300、316、328、340、360nm五个波长处测定吸收度。1）最大吸收波长在326～329nm之间，计算吸收度比值Ai/A328，并与规定值相减，差值不超过±0.02，则用A328计算含量。20本文档共79页；当前第20页；编辑于星期二\5点43分2）如果最大吸收波长在326～329nm之间，5个波长下的差值有一个或几个超过±0.02，这时先计算A328（校正）：A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）A328（校正）-A328------------------×100%A328

再计算21本文档共79页；当前第21页；编辑于星期二\5点43分若所得的数值在±3%，则仍用A328计算含量；若所得的数值在-15%～-3%之间，则用A328（校正）计算含量；若所得的数值小于-15%或大于+3%，或最大吸收波长不在326～329nm之间，则应采用第二法测定。22本文档共79页；当前第22页；编辑于星期二\5点43分三点校正法第一法步骤小结：Ⅰ：最大吸收波长是否在326-329nm间符合--Ⅱ，不符合—第二法Ⅱ：测定指定波长吸收度Ⅲ：计算（A指定波长/A328）比值,并与规定值比较符合--Ⅴ，不符合—ⅣⅣ：计算校正吸收度，并与实测值比较，判断是否需要校正Ⅴ：计算328nm处样品的E1cm1%

Ⅵ：计算效价及标示量的百分含量维生素A醋酸酯的换算：IU/g=E1cm1%×1900

IU/丸标示量%=×100%标示量23本文档共79页；当前第23页；编辑于星期二\5点43分第二法（皂化法，适用于维生素A醇）第一法无法消除杂质干扰时用此法24本文档共79页；当前第24页；编辑于星期二\5点43分25本文档共79页；当前第25页；编辑于星期二\5点43分26本文档共79页；当前第26页；编辑于星期二\5点43分27本文档共79页；当前第27页；编辑于星期二\5点43分5、讨论1）维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法推导而来：维生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角形法推导而来。2）在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进行测定。如果仪器波长精度不准确时，会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正波长，并可用全反式维生素A进行测定，比较测定结果和比值是否与对照品相符合，以进一步核对仪器波长是否准确。测定的样品应不得少于两份。3）中国药典（2010年版）收载的维生素A软胶囊采用三点校正法测定。28本文档共79页；当前第28页；编辑于星期二\5点43分

VitAD胶丸中VitA的含量测定

精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物0.2399g至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度，求本品中维生素A的含量。29本文档共79页；当前第29页；编辑于星期二\5点43分A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299规定比值30本文档共79页；当前第30页；编辑于星期二\5点43分A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.833A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====31本文档共79页；当前第31页；编辑于星期二\5点43分32本文档共79页；当前第32页；编辑于星期二\5点43分优点：简便、快速缺点：呈色不稳定（5～10s内）水分干扰（反应需要无水条件）专属性差（有关物质的干扰）三氯化锑有腐蚀性（注意安全）λmax618nm～620nm2、三氯化锑比色法(标准曲线法)33本文档共79页；当前第33页；编辑于星期二\5点43分3、HPLC法（ChP2010新增的分析方法）适用于维生素A醋酸酯原料及其制剂中维生素A的含量测定。34本文档共79页；当前第34页；编辑于星期二\5点43分第二节维生素E一、结构与性质名称：消旋—α—生育酚醋酸酯母核：苯骈二氢吡喃衍生物苯环上有一乙酰化的酚羟基侧链：脂肪烷烃35本文档共79页；当前第35页；编辑于星期二\5点43分化学性质：1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV:284nm(乙醇)3、酯键易水解4、对氧敏感，易氧化△36本文档共79页；当前第36页；编辑于星期二\5点43分橙红色二、鉴别1.硝酸反应（chp2010）取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热15分钟，溶液应显橙红色。37本文档共79页；当前第37页；编辑于星期二\5点43分生育红（橙红色）生育酚HNO3强氧化剂38本文档共79页；当前第38页；编辑于星期二\5点43分△[O]2.三氯化铁－联吡啶反应红色39本文档共79页；当前第39页；编辑于星期二\5点43分生育酚对-生育醌[O]弱氧化剂40本文档共79页；当前第40页；编辑于星期二\5点43分3.UV法284nm254nm41本文档共79页；当前第41页；编辑于星期二\5点43分4.TLC法薄层板硅胶G展开剂环己烷-乙醚（4：1）显色剂硫酸（105℃5′）

VitERf

=0.742本文档共79页；当前第42页；编辑于星期二\5点43分三、检查：游离生育酚硫酸铈滴定液（0.01mol/L）指示剂：二苯胺（亮黄→灰紫）

2.试剂1.原理：利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈43本文档共79页；当前第43页；编辑于星期二\5点43分3、方法取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过1.0ml。44本文档共79页；当前第44页；编辑于星期二\5点43分四、含量测定1.GC法（ChP2010）载气→N2固定液→硅酮（OV-17）担体→硅藻土或高分子多孔小球柱温→265℃检测器→FID内标→正三十二烷色谱条件适用性试验n≥500，R≥245本文档共79页；当前第45页；编辑于星期二\5点43分46本文档共79页；当前第46页；编辑于星期二\5点43分2、JP-RP-HPLC法样品→dl－α－生育酚固定相→十八烷基硅烷键合硅胶流动相→甲醇-水（49：1）检测波长→292nmR＞2.6RSD≤0.8%色谱条件47本文档共79页；当前第47页；编辑于星期二\5点43分原理：利用生育酚的易氧化性指示剂：二苯胺（亮黄→灰紫）△3、铈量法48本文档共79页；当前第48页；编辑于星期二\5点43分氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)Cl-·HCl第四节维生素B1一、结构与性质49本文档共79页；当前第49页；编辑于星期二\5点43分3.硫色素反应4.碱性：嘧啶环——伯氨，噻唑环——季铵可与酸成盐与生物碱↓→↓含量测定——非水碱量法1.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性2.UV:246nm(盐酸液)50本文档共79页；当前第50页；编辑于星期二\5点43分1.硫色素反应（维生素B1专属反应）二、鉴别试验51本文档共79页；当前第51页；编辑于星期二\5点43分H+H+2.沉淀反应H+52本文档共79页；当前第52页；编辑于星期二\5点43分3、硝酸铅反应4、氯化物反应53本文档共79页；当前第53页；编辑于星期二\5点43分三、含量测定1.非水溶液滴定法（ChP2010）喹那啶红－亚甲蓝（紫红→天蓝）加入醋酸汞的目的－－消除氢卤酸盐对非水滴定的干扰。54本文档共79页；当前第54页；编辑于星期二\5点43分2.UV法246nm55本文档共79页；当前第55页；编辑于星期二\5点43分3.硫色素荧光法NaOH56本文档共79页；当前第56页；编辑于星期二\5点43分自学--维生素D:了解杂质检查中麦角甾醇的检查；2.初步掌握正相高效液相色谱法的应用。57本文档共79页；当前第57页；编辑于星期二\5点43分L－抗坏血酸第五节维生素C一、结构与性质58本文档共79页；当前第58页；编辑于星期二\5点43分1.强还原性：烯二醇结构59本文档共79页；当前第59页；编辑于星期二\5点43分△50℃2.结构与糖类相似，具糖的性质----糖类的显色反应3.UV特征(243nm)4.溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性。60本文档共79页；当前第60页；编辑于星期二\5点43分5.酸性：一元酸C3－OH，pKa=4.17C2－OH，pKa=11.5761本文档共79页；当前第61页；编辑于星期二\5点43分6.水解反应：与碱反应62本文档共79页；当前第62页；编辑于星期二\5点43分二、鉴别试验1.与氧化剂的反应63本文档共79页；当前第63页；编辑于星期二\5点43分1)与AgNO3反应(ChP2010)2)与2，6-二氯靛酚反应(ChP2010)氧化型玫瑰红色蓝色OHˉ（还原型）64本文档共79页；当前第64页；编辑于星期二\5点43分3)与碱性酒石酸铜反应（USP）4)与KMnO4反应65本文档共79页；当前第65页；编辑于星期二\5点43分2.糖类的反应糠醛：3.UV0.01mol/LHCL液中，λmax＝243nm66本文档共79页；当前第66页；编辑于星期二\5点43分指示剂：淀粉指示液三、含量测定1.碘量法（ChP2010）原理67本文档共79页；当前第67页；编辑于星期二\5点43分取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6方法68本文档共79页；当前第68页；编辑于星期二\5点43分酸性环境：减慢VitC被O2氧化速度新沸冷H2O：赶走水中O2

立即滴定：减少O2的干扰附加剂干扰的排除：讨论片剂——滑石粉——过滤注射剂——抗氧剂——丙酮Na2SO3NaHSO3

Na2S2O3Na2S2O569本文档共79页；当前第69页；编辑于星期二\5点43分2.2，6-二氯靛酚滴定法原理方法自身指示剂终点法70本文档共79页；当前第70页；编辑于星期二\5点43分讨论（1）酸性环境（HPO3-HAc）：

稳定VitC（2）快速滴定（2min内）：

防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定71本文档共79页；当前第71页；编辑于星期二\5点43分（4）缺点

需经常标定贮存≤一周干扰多氧化力较强（5）专属性比碘量法高，多用于维生素C制剂的分析。不稳定72本文档共79页；当前第72页；编辑于星期二\5点43分在三氯醋酸或盐酸存在下，经水解、脱羧、失水后，加入吡咯即产生蓝色产物的药物应是A.氯氮卓B.维生素AC.普鲁卡因D.盐酸吗啡E.维生素C习题73本文档共79页；当前第73页；编辑于星期二\5点43分中国药典（2005年版）采用以下何法测定维生素E含量A.酸碱滴定法B.氧化还原法C.紫外分光光度法D.气相色谱法E.