生物安全微生物

历史上的实验室微生物感染著名事件(1)1979年前苏联斯维尔德洛夫斯克炭疽菌泄漏事件医生秘密日记：至1979年4月20日,350人发病，45人死亡，214人濒临死亡。高级官员从莫斯科赶来。消毒队用氯对医院进行了彻底消毒，房屋也被清洗。野狗被打死。街道的表层被推土机挖走然后重铺。1992年之前，政府统一的说法是有少数人食用了遭炭疽菌污染的肉制品而致病。克格勃拿走了尸检报告.2023/6/271中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第1页；编辑于星期二\3点19分死亡数字依旧没有解密1992年，叶利钦曾公开承认这件事是“我们的军事研究出了问题”.

前苏联设在叶卡捷琳堡的国防微生物实验室的地下试验场在试验武器时发生了事故(可能是武器爆炸)，从而导致了炭疽菌的泄露。1979年到1989年十年间对叶卡捷琳堡的人口统计表明，该地区的人口呈明显下降趋势，男女比例严重失调，新生儿中有中枢神经问题的达80%。

2023/6/272中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第2页；编辑于星期二\3点19分(2)1967年德国马尔堡病毒实验室感染事件1967年德国马尔堡，法兰克福和南斯拉夫的贝尔格莱德三个实验室使用来自乌干达的猴子用于脊髓灰质炎疫苗研究。实验室人员，医务人员等37人感染马尔堡出血热，1/4的人死亡。原发性感染发生在实验室工作人员中。继发性病例涉及2名医生、一名护士、一名尸检助理和一名兽医的妻子

.马尔堡出血热是一种恶性病毒传染病，主要通过体液传染，能引起高烧、恶心、腹泻和呕吐等各种紧急病症，5至7天后会出现严重的出血症状，如果治疗不及时病人会在一周内死亡。

2023/6/273中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第3页；编辑于星期二\3点19分3个月后德国专家才找到罪魁祸首：马尔堡病毒，一种由猴类传染给人类的危险的新病毒。马尔堡病毒，与埃博拉病毒为同一家族，却比埃博拉病毒厉害得多埃博拉也是一种十分罕见、极度恐怖的病毒，属于已知感染人的最烈性病原体.这种病毒因其1976年首先在刚果的埃博拉河地区被发现而得名，据世界卫生组织公布的最新数字显示，全世界已有1100人感染了这一病毒，其中793人死于该病毒引起的埃博拉出血热。2023/6/274中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第4页；编辑于星期二\3点19分埃博拉-马尔堡病毒病又叫做非洲出血热、马尔堡病毒病、埃博拉病毒出血热这两种疾病均无疫苗或有效治疗，尽管延续几年涉及检测数百种动物、昆虫和植物的强化调查，但是尚未查明该病毒的动物储主或其它环境源。猴子易受感染，但未被认为是可生存的有效储主，因为几乎所有受感染动物太快死亡以至于不能维持该病毒的生存。

2023/6/275中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第5页；编辑于星期二\3点19分(3)3起严重的实验室SARS病毒感染事件

1.新加坡的实验室sars感染事件

2003年9月新加坡国立大学27岁的研究生在环境卫生研究院实验室中感染SARS病毒。该研究生是被确诊前已经与多人有过接触。原因调查：实验室安全程序不当。该研究生在实验室做西尼罗河病毒研究工作的，这个实验室同时也做具有活性的SARS冠状病毒研究。实验室内西尼罗河病毒与SARS病毒交叉污染是这次的传染源。2023/6/276中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第6页；编辑于星期二\3点19分第一，环境卫生研究院只具有P2的生物安全设备，却在院内设立了用来进行更具危险性病毒研究的实验室。第二，研究院同一时间处理多种不同的活性病毒研究，增加了生物安全方面的复杂程度，因处理程序不当，冠状病毒与这名研究生研究的西尼罗病毒交叉感染。第三，其他研究机构的科研人员也可利用研究院的设备，而每一个科研人员的安全意识都不同环境部长就此事件事件，向新加坡人民致歉事故结论及处理：2023/6/277中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第7页；编辑于星期二\3点19分2、中国台湾地区的实验室感染事件

2003年12月一名台湾的SARS研究人员在实验室感染SARS病毒。台湾这名感染的研究人员工作的“国防预防医学研究所”属台湾军方研究单位，设立在山洞中，以两层阻绝设施与外界隔离。这所实验室拥有全台最顶尖的实验设备，实验室等级列为P4，是台湾唯一的“第4级生物安全实验室”，超过“卫生署疾病管制局”及“台大医院”等P3等级的实验室，被誉为台湾生化资源重镇。当时在亚洲仅有日本拥有同等级的生物实验室。2023/6/278中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第8页；编辑于星期二\3点19分事故结论及处理：詹中校从实验室操作到后来发病的处理过程，包括在实验室清除废弃物时出现疏失，没有主动通报，后来还跑到新加坡去开会，出现发烧症状也没有第一时间告知、通报，有一连串的错误，以致造成民众心理的冲击、甚至影响经济此外，根据世界卫生组织的调查，台湾SARS实验室的一个主要问题是人手不足，科研人员常常单独工作，提高了发生意外和错误被忽视的风险。世卫组织人员强调科研人员不应单独在实验室工作，至少应有两人在一起。世卫组织人员指出，台湾实验室人员虽接受安全程序的教导，但他们缺乏足够的监督以确保他们真正遵守规章。给予詹中校停权处分。

2023/6/279中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第9页；编辑于星期二\3点19分3、中国大陆的实验室感染事件

2004年4月安徽、北京先后发现新的SARS病例，经证实传染源为中国CDC病毒实验室的两名研究生。安徽出现两例SARS病例：安徽医科大学的学生宋某和她的母亲。北京患者李某则是曾护理宋某的护士。另一患者为中国CDC病毒实验室工作的博士生杨某。

2023/6/2710中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第10页；编辑于星期二\3点19分疫情源于实验室内感染

2004年4月非疫情的专项调查。调查结果如下：1.宋某和杨某两个原发病例发生在同一实验室。该实验室有SARS冠状病毒（SARS-CoV）的科研工作。2.封锁病毒所后，未再出现任何SARS病人。3.从二代病例魏某（宋某之母）胸水分离到SARS-CoV，其全基因组序列与该室用于实验的毒株高度同源。4.没有发现宋某和杨某与野生动物接触感染的证据。5.宋某和杨某发病潜伏期内没有任何其他SARS病例报告，没有实验室外接触其他SARS病人而被感染的可能。6.杨某与宋某最后一次接触，到杨某发病相距15天，仅在走廊碰面，杨某发病不可能是宋某传染。2023/6/2711中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第11页；编辑于星期二\3点19分事故结论及处理：卫生部、科技部联合调查组调查认定，这次疫情源于实验室内感染，是一起因实验室安全管理不善，执行规章制度不严，技术人员违规操作，安全防范措施不力，导致实验室污染和工作人员感染的重大责任事故。中国CDC病毒所腹泻病毒室跨专业从事SARS研究，采用未经论证和效果验证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，发现人员健康异常情况未及时上报。中国CDC主任李立明、副主任杨晓光等因对病毒管理不善负有重要领导责任，引咎辞职。

2023/6/2712中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第12页；编辑于星期二\3点19分微生物基本知识：分类2023/6/2713中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第13页；编辑于星期二\3点19分（2）微生物基本知识－病原微生物霍乱弧菌流感病毒2023/6/2714中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第14页；编辑于星期二\3点19分放线菌螺旋体支原体2023/6/2715中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第15页；编辑于星期二\3点19分黄曲霉白色念珠菌2023/6/2716中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第16页；编辑于星期二\3点19分（3）微生物与疾病病毒感染真菌局部感染2023/6/2717中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第17页；编辑于星期二\3点19分细菌全身感染2023/6/2718中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第18页；编辑于星期二\3点19分中毒肿瘤2023/6/2719中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第19页；编辑于星期二\3点19分（4）微生物与传染病蚊虫传播飞沫传播垂直传播2023/6/2720中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第20页；编辑于星期二\3点19分与传染病相关的微生物G(+)G(-)细菌2023/6/2721中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第21页；编辑于星期二\3点19分超级细菌（1）MRSA耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌MRSA对所有ß-内酰胺类药物如青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、碳头孢烯类和含酶抑制剂的复合制剂报告为耐药，并常表现为对其他类抗生素的多重耐药。2023/6/2722中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第22页；编辑于星期二\3点19分目前国内未发现耐万古的金黄色葡萄球菌。但是万古霉素用于体内治疗MRSA亦有失败的病例报道。实验室使用耐万古的金黄色葡萄球菌，要备案并且在安全实验室进行2023/6/2723中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第23页；编辑于星期二\3点19分（2）超广谱ß-内酰胺酶（ESBLs）

产ESBLs的代表菌株为肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌，其他革兰阴性杆菌如奇异变形杆菌、产酸克雷伯菌等也能产生。这种酶能水解新一类ß-内酰胺类药物。头孢噻肟、头孢他啶、头孢三嗪等及氨曲南等单环类抗生素，并介导细菌对这些抗生素耐药的β-内酰胺酶2023/6/2724中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第24页；编辑于星期二\3点19分(3)耐青霉素肺炎链球菌和奈瑟菌奈瑟式菌肺炎链球菌2023/6/2725中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第25页；编辑于星期二\3点19分(4)耐糖肽类和多种抗生素耐药的肠球菌属2023/6/2726中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第26页；编辑于星期二\3点19分病毒：肝炎病毒、EBV、CMV、HSV、HZV、HIV等EBVHSV肝炎病毒HIV2023/6/2727中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第27页；编辑于星期二\3点19分真菌隐球菌组织胞浆菌念珠菌

曲菌2023/6/2728中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第28页；编辑于星期二\3点19分其他原核微生物支原体衣原体立克次体螺旋体2023/6/2729中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第29页；编辑于星期二\3点19分（5）中华人民共和国传染病防治法

(1989年2月21日中华人民共和国第七届全国人民代表大会常务委员会第六次会议通过1989年2月21日中华人民共和国主席令第15号公布自1989年9月1日起施行)2023/6/2730中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第30页；编辑于星期二\3点19分第一章总则第一条为了预防、控制和消除传染病的发生与流行，保障人体健康，制定本法。

第二条国家对传染病实行预防为主的方针，防治结合，分类管理。

第三条本法规定管理的传染病分为甲类、乙类和丙类。2023/6/2731中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第31页；编辑于星期二\3点19分甲类传染病是指：鼠疫、霍乱。

乙类传染病是指：病毒性肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、流行性出血热、狂犬病、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热。

2023/6/2732中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第32页；编辑于星期二\3点19分丙类传染病是指：肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤风、急性出血性结膜炎、除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。国务院可以根据情况，增加或者减少甲类传染病病种，并予公布；国务院卫生行政部门可以根据情况，增加或者减少乙类、丙类传染病病种，并予公布。2023/6/2733中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第33页；编辑于星期二\3点19分第二章预防第十五条医疗保健机构、卫生防疫机构和从事致病性微生物实验的单位，必须严格执行国务院卫生行政部门规定的管理制度、操作规程，防止传染病的医源性感染、医院内感染、实验室感染和致病性微生物的扩散。第十六条传染病菌种、毒种的保藏、携带、运输，必须按照国务院卫生行政部门的规定严格管理。

2023/6/2734中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第34页；编辑于星期二\3点19分第十七条被甲类传染病病原体污染的污水、污物、粪便，有关单位和个人必须在卫生防疫机构的指导监督下进行严密消毒后处理；拒绝消毒处理的，当地政府可以采取强制措施。

被乙类、丙类传染病病原体污染的污水、污物、粪便，有关单位和个人必须按照卫生防疫机构提出的卫生要求进行处理。

2023/6/2735中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第35页；编辑于星期二\3点19分第二十条对从事传染病预防、医疗、科研、教学的人员，现场处理疫情的人员，以及在生产、工作中接触传染病病原体的其他人员，有关单位应当根据国家规定，采取有效的防护措施和医疗保健措施。2023/6/2736中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第36页；编辑于星期二\3点19分有关菌种保藏的规定由国和院行政部门指定的单位负责；一、二类菌（毒）种的供应由国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应。三类菌（毒）种由设有专业实验室的单位或者国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供应；2023/6/2737中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第37页；编辑于星期二\3点19分有关菌种使用的规定使用一类菌（毒）种的单位，必须经国务院卫生行政部门批准；使用二类菌（毒）种的单位必须经省级政府卫生行政部门批准；使用三类菌（毒）种的单位，应当经县级政府卫生行政部门批准；2023/6/2738中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第38页；编辑于星期二\3点19分有关菌种运输的规定一、二类菌（毒）种，应派专人向供诮单位领取，不得邮寄；三类菌（毒）种的邮寄单位的证明，并按照菌（毒）种出寄与装的有关规定办理。

2023/6/2739中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第39页；编辑于星期二\3点19分第六章法律责任

第三十七条有本法第三十五条所列行为之一，引起甲类传染病传播或者有传播严重危险的，比照刑法第一百七十八条的规定追究刑事责任。

第三十八条从事实验、保藏、携带、运输传染病菌种、毒种的人员，违反国务院卫生行政部门的有关规定，造成传染病菌种、毒种扩散，后果严重的，依照刑法第一百一十五条的规定追究刑事责任；情节轻微的，给予行政处分。2023/6/2740中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第40页；编辑于星期二\3点19分新刑法－传染病菌种扩散罪

第三百三十一条：从事实验、保藏、携带、运输传染病菌种、毒种的人员，违反国务院卫生行政部门的有关规定，造成传染病菌种、毒种扩散，后果严重的，处三年以下有期徒刑或者拘役；后果特别严重的，处三年以上七年以下有期徒刑。

2023/6/2741中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第41页；编辑于星期二\3点19分（6）消毒与灭菌灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法无菌：不存在活菌的意思2023/6/2742中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第42页；编辑于星期二\3点19分(6-1)干热灭菌法

A焚烧：

B烧灼：

C干烤：160°～180℃，2hD红外线灭菌：利用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死一切微生物，包括芽胞菌。2023/6/2743中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第43页；编辑于星期二\3点19分高压蒸汽灭菌法：121℃加热20～30分钟，杀灭所有微生物及芽孢。(6-2)湿热灭菌法2023/6/2744中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第44页；编辑于星期二\3点19分(6-3)紫外线消毒空气与物体表面(6-4)化学消毒剂1酚类：浓度：石炭酸为3%-5%、来苏儿为2%用途：地面、器具表面和皮肤的消毒2醇类：浓度：乙醇70%-75%用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡3重金属盐类：（1）2%红汞：皮肤、粘膜和小创伤（2）0.05-0.01%升汞：非金属器皿2023/6/2745中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第45页；编辑于星期二\3点19分4氧化剂：（1）0.1%高锰酸钾：皮肤、尿道、水果（2）3%过氧化氢：创伤、皮肤粘膜（3）2%-2.5%碘酒：皮肤消毒（4）氯：饮水和游泳池（5）10%-20%漂白粉：地面、厕所等

5表面活性剂：

0.05%-0.1%新洁尔灭：皮肤粘膜、手术器械

6烷化剂：

10%甲醛：物品表面、空气2023/6/2746中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第46页；编辑于星期二\3点19分(6-5)消毒剂在实验室的应用1皮肤：2.5%碘酒、70%酒精、2%红汞2粘膜：1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等3被污染的空气：甲醛熏蒸4手：2%来苏儿、2%碘酊、70%酒精

2023/6/2747中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第47页；编辑于星期二\3点19分实验室分类按部门分医学实验室：1、疾控机构专业实验室（病原微生物、理化、毒理、消杀、生化和动物实验室等）2、医学临床实验室：门诊化验室、生化实验室3、教学实验室：大专院校4、研究型实验室：研究院、各种重点实验室5、其他特殊实验室：医药企业的GMP厂房等2023/6/2748中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第48页；编辑于星期二\3点19分（7）病原微生物与实验室分级

国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行分类管理，对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行分级管理。

2023/6/2749中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第49页；编辑于星期二\3点19分病原微生物的分类和管理第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人或者动物疾病的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物疾病，发生实验室暴露可能引起感染，但不会引起严重危害，且能够有效实施预防和治疗的微生物

国家将病原微生物分为四类，卫生部负责制定并调整四类病原微生物的种类。2023/6/2750中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第50页；编辑于星期二\3点19分第二类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。第一类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的微生物。

第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。2023/6/2751中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第51页；编辑于星期二\3点19分

国家实行统一的实验室生物安全标准（中华人民共和国国家标准

GB19489-2004实验室生物安全通用要求）。国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。

2023/6/2752中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第52页；编辑于星期二\3点19分

实验室生物安全防护分级一级生物安全防护实验室，简称BSL1或P1二级生物安全防护实验室，简称BSL2或P2三级生物安全防护实验室，简称BSL3或P3四级生物安全防护实验室，简称BSL4或P42023/6/2753中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第53页；编辑于星期二\3点19分一级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如工程细菌、工程真菌等。大肠杆菌啤酒酵母2023/6/2754中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第54页；编辑于星期二\3点19分基础实验室从事基础教学与研究，接触1级生物危害微生物，即接触不引起人或动物疾病的细菌、真菌、病毒等生物因子，如枯草杆菌、犬肝炎病毒等。只需开放式长形工作台和好的微生物操作技术。

2023/6/2755中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第55页；编辑于星期二\3点19分

本学院分子生物、基因工程、药理、毒理等实验室(布局在学院二楼)按一级生物安全防护标准执行。其中生物材料的使用：菌株：大肠杆菌工程菌株、枯草杆菌工程菌株、啤酒酵母工程菌株以及其他工程菌株。载体：克隆及表达质粒（不包括哺乳病毒载体）细胞：不含安全性不明的致病性病毒的原代及传代细胞核酸：DNA、RNA、PCR扩增产物等2023/6/2756中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第56页；编辑于星期二\3点19分二级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。如：病原微生物分离培养、药物实验及病毒的血清学实验2023/6/2757中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第57页；编辑于星期二\3点19分基础实验室从事实验健康服务、诊断、研究、接触2级生物危害微生物，即引起人动物发病但不会引起严重危害的病原体。实验室感染后不导致严重疾病，具有有效的治疗和预防方法，传播风险有限，如乙型肝炎病毒、沙门菌、弓形体等。除了开放式长形工作台还应配置生物安全柜。实验室应有生物危害标记。操作人员应身着防护服，有好的微生物操作技术，

2023/6/2758中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第58页；编辑于星期二\3点19分

本学院涉及以下实验的实验室按二级生物安全防护标准执行（布局在学院二楼的P2实验室）。其中生物材料的使用：菌株：病原微生物的分类和管理法中对应的第三类微生物。如：TB,

MRSA，淋球菌等载体：哺乳病毒载体，尤其是生物安全性不明的逆转录病毒、慢病毒载体。细胞：含致病性哺乳动物病毒或生物安全性不明的原代及传代细胞。如EB病毒。2023/6/2759中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第59页；编辑于星期二\3点19分2023/6/2760中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第60页；编辑于星期二\3点19分(一）腺病毒载体有些腺病毒在动物体内可致瘤，在体外能转化细胞。在美国军队中出现腺病毒引起的呼吸道疾病之后，腺病毒疫苗已经彻底地检查了其安全性,这促进了针对人免疫缺陷病毒和狂犬病病毒的重组腺病毒疫苗的研制发展。基因工程病毒载体2023/6/2761中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第61页；编辑于星期二\3点19分（二）腺相关病毒(AAV)载体是一种人细小病毒

本身无致病性，宿主范围广，转移外源基因时，不伴随任何病毒基因，以位点特异方式整合入人19号染色体

缺点：包装容量有限，<5kb

2023/6/2762中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第62页；编辑于星期二\3点19分（三）逆病毒转录载体、慢病毒载体易与宿主细胞基因稳定整合，长期表达，随机整合入宿主基因组，有致突变危险，不稳定

2023/6/2763中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第63页；编辑于星期二\3点19分2023/6/2764中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第64页；编辑于星期二\3点19分携带病毒的细胞B958细胞株EB病毒含腺病毒的细胞株含逆转录病毒、慢病毒的细胞2023/6/2765中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第65页；编辑于星期二\3点19分三级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。如：艾滋病毒的研究应在三级生物安全防护实验室中进行。HIV遏制实验室

2023/6/2766中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第66页；编辑于星期二\3点19分遏制实验室从事特殊诊断与服务，接触3级生物危害微生物，即引起人或动物严重疾病但通常不因偶然在个体间传播，有治疗方法的病原体，如TB、致病性真菌、圣路易斯脑炎病毒等。需要生物安全柜和其他操作所需的基本装置，实验室应有生物危害标记。操作人员身着特殊防护服，有好的微生物操作技术。人员进入受限，实验室内有定向气流。

2023/6/2767中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第67页；编辑于星期二\3点19分HIV实验室生物安全级别艾滋病血清学检测艾滋病血清学检测（包括筛查和确认实验室）、免疫学和核酸检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。HIV分离、研究

HIV分离、细胞培养及研究工作应在Ⅲ级生物安全实验室（BSL-3）中进行。2023/6/2768中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第68页；编辑于星期二\3点19分四级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。SARS如：爱博拉-马堡病毒

（严格遏制实验室）2023/6/2769中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第69页；编辑于星期二\3点19分严格遏制实验室从事危险病原体操作。接触4级生物危害微生物，即引起人类或动物非常严重的疾病，能在人与人、人与动物之间造成传播，尚无有效治疗和预防方法的病原体。应有配套的生物安全柜，人员身着带正压的连衣裤，实验室空气经过滤，配备带双门的高压灭菌器。除了三级防护措施外，人员进入实验室时，应经过密封的过渡舱，离开时应经风淋，生物废弃物应经特殊处理。

2023/6/2770中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第70页；编辑于星期二\3点19分目前世界上最先进的高危病毒实验室———法国让.梅里厄

P4实验室。这个实验室1999年3月开始运作，目标除了研究最毒、最新的病毒，也对历史上旧的、变种的病毒作深入的研究、建档，并找出治疗的方法。面积仅为600平方米的实验室造价达4000万法郎，其中的仪器设备价值1000万法郎，每年的运行维持和实验费用是190万欧元。里昂的

P4实验室全部用由玻璃和钢材建成，被一致公认为“新一代

P4的首创”。

2023/6/2771中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第71页；编辑于星期二\3点19分主楼分三层：上层是空气处理区，保证实验室人员和动物呼吸用气及实验室空气的消毒；下层是废物处理区，对实验室器材和实验垃圾进行消毒；中层为真正的P4区。方形主楼的旁边，还有一个两层的、半圆柱形的、金属附属楼，负责进行实验准备，控制实验室的安全，全部由计算机实行中央控制。P4区主要有两个面积为60至70平方米、相互独立的实验室和一个动物试验室2023/6/2772中山大学微生物与生化制药实验室张革本文档共83页；当前第72页；编辑于星期二\3点19分研究人员进出入实验工作台，必须经过这样的程序：用通行卡和个人密码打开实验区的第一道门，进入房间脱衣、进行清洁淋浴、穿上类似潜水员的密封服；进入另一室检查服装的密封性；再开一道门，即可进入动物实验室；此后，还有两道门将存放病菌的恒温箱和实验厅分开。在进入动物实验室之前的每一个房间都是逐步减压的，房间的门上都安装充气密封垫，以防止病菌往外扩散。与外界完全隔离的P4级无泄漏病毒实验室

2023/6/2773中山大学微生物与生化制药