人教版-生物-高二-选修一教案：-第一节-DNA的粗提取与鉴定含答案

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精教学目标1、理解DNA初步把握DNA2、理解相关溶液的作用机理，培育学生的分析力量,通过试验使学生能够简述科学探究的根本过程。3、通过探究培育科学的疑心精神和创精神；通过试验结果,学生树立生命物质性的观点.教学重难点DNA的相关原理和步骤教学难点：提取DNA的相关原理和步骤教学工具教学课件教学过程(一〕导入课现状：很多学校很难开展“DNA缘由：1。试验的成功率普遍较低；2。背景学问较多；3。操作相对简单，学生不易准确地操控试验。〔二)、提取生物大分子的根本思路1大分子.对于DNA的粗提取而言．就是要利用DNA与RNA、蛋白分.学必求其心得，业必贵于专精2、探究试验原理：屏幕展现表格1不同浓度的NaClDNA.95％酒精可提取DNA。在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而渐渐降低;在0。14mol/L时，DNA溶解度最小;〔3)NaClDNA填表1：填表2：保证理解试验。3。DNA的粗提取试验原理1〕不同浓度NaCl中DNA溶解度不同.2)DNA,DNA中某些蛋白质则溶于酒精。DNA学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精质。但是对DNA没有影响。DNADNA热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。5)DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响.DNA的原理包括DNA4.试验材料DNA和DNA的鉴定，其中提取DNA本试验的重点和难点.提出问题:“DNA 主要存在于什么构造上？”“如何提取DNA?”“选什么材料好？”①动物：DNA，既经济又易取提示：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作为DNA达成共识：1、造适宜材料:选动物细胞，易打破细胞构造2、破坏细胞膜、核膜构造,得核物质。3、将DNADNA4DNADNA。粗提取：利用该特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉提纯：DNA可以将DNA与蛋白质进一步地分别.DNApH简洁失活；并且蛋白质的空间构造多种多样，理化性质各不一样，使得蛋白质的提取没有一种统一的方法，只能依据特定蛋白质的特性摸索提取的条件，设计特定的方法。(三、以鸡血为试验材料进展DNA的粗提取为什么用鸡血细胞做试验材料？本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由:一是由于鸡血细胞核的DNA要匀浆和离心,对设备要求较高，操作繁琐,历时较长.能否选用牛、羊、马血做试验材料?为什么？细胞中的少数DNA，在试验中很难提取到。DNA(、制备鸡血细胞液(、裂开细胞，释放DNA、溶解细胞核内的DNA、DNA的析出—-提取、DNA的初步纯化-—提纯(、DNA的鉴定1、制备鸡血细胞液取质量浓度为0。1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧杯中，注入颖的鸡血(约180mL，同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免血液分散。将烧杯中的血液置于冰箱内，静置1d得到鸡血细胞液.柠檬酸钠可防止血液凝固2、裂开细胞,释放DNA用玻璃棒搅拌可以加速细胞的裂开.留意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛，防止打碎DNA.蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细的裂开〔细胞膜和核膜的裂开，从而释放出DNA释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起,应用3～4层纱布进展过滤，除去一些颗粒较大的杂质。糖和RNA等杂质.3、溶解细胞核内的DNA在浓度较高的NaClDNA液中。在溶液中参加两倍体积的浓度为2mol/LNaCl1min。留意应沿一个方向搅拌，使DNA料，必需研磨充分。研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响试验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等.4、DNA的析出—-提取将溶液中的DNA与其他杂质分别，这一步骤是试验成败的关键。加蒸馏水降低NaCl溶液浓度,使DNA析出。试验中应当缓慢贴壁参加蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌，以利于DNA分子的附着和缠绕。同时应留意掌握加水量，NaCl01～02mol/L会使DNA分子又重溶解为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？(1、用高盐浓度的溶液溶解DNA质；(2)、用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA的多种杂质。5、DNA的初步纯化-—提纯假设提取的DNA量不够多且其中含有较多杂质，或者参加溶液和搅拌等操作过程不标准，都会导致试验现象不明显，常常使制取的DNA粗制品不能显示出DNADNA6、DNA的鉴定二苯胺法：DNADNA含量的多少有关。紫外灯照耀法:0。05％的溴化乙锭〔EB〕溶液,将玻璃棒1滴EB吸取顶峰在260nm。电泳法:适合鉴定纯度较高的DNA。提取DNA的试验操作主要步骤的目的：提取DNADNA含量较高的生物材料，否则会由于试验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；其次步是DNA的释放和溶解，这一步是试验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化，即依据DNA最大限度地将DNA与杂质分开；最终一步是对DNA进展鉴定,这是对整个试验的结果的检测。本试验中有三次过滤，分别有什么作用？目的：获得含核物质的滤液〔2〕0。14mol/LNaCl目的：猎取纱布上的粘稠物〔3)DNA2mol/LNaCl目的:得到含DNA的滤液试验中有五次用玻璃棒搅拌？分别有什么作用？第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液：加速细胞的裂开学必求其心得，业必贵于专精其次次搅拌加2mol/LNaClDNA与溶液混合均匀第三次搅拌加蒸馏水至0。14mol/LNaCl溶液：稀释NaCl溶液，析出DNA第四次搅拌放入2mol/LNaClDNA多的溶于溶液中95％的酒精：提取含杂质较少的DNA总结:投影展现试验设计思路：鸡血细胞液①aDNA释放 ②bDNA与蛋白质的分别③cDNA析出④dDNA浓缩〔提纯〕试验步骤：引导学生争论、回忆并答复目的①～⑨.①防止血凝.②加速血细胞裂开.③溶解DNA。④使2mol/LNaCl014mol/L,促DNA最大限度地析学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精出。⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上。⑥使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。⑦除去含DNA⑧提取DNA。B：无变化争论与结论:投影给出如下争论提纲，供学生争论。DNA粗提取过程中的关键是哪几步？提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液中的上清液？DNA2nm，试验中消灭的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小？学生分组进展争论并发表争论结果.教师对争论进展全程指导,并与学生一起归纳总结〔1〕a．提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌，可得到最大量的DNA.b．析出DNAc．沉淀DNA(2〕提取DNA，不含DNA，所以要除去〔含蛋白质)。(3〕试验中消灭的丝状物是肉眼可以观看到的，这种丝状物的直径要比DNA分子的直径2nm示一个DNADNA，DNA〔四〕以菜花为例提取DNA1、鉴定DNA的其他方法用紫外灯照耀法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。(1)．配制染色剂.用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭〔EB〕溶液。〔．将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴一滴EB溶液染色.〔3)．将蜡纸放在紫外灯〔260nm〕下照耀〔暗室中)，可见橙红色的萤光〔DNA280nm处。2、DNA(1)材料用具颖菜花(或蒜黄、菠菜)。夹,漏斗,酒精灯,石棉网，三角架，火柴，刀片，天平。95%的酒精溶液,二苯胺试剂，蒸馏水.(2〕方法步骤A．DNA的粗提取〔1〕预备材料：将颖菜花和体积分数为95％的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少24(2〕取材：称取30g研磨:将碎菜花放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min。过滤:在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液滤入烧杯中〔有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进展离心,用1000r/min的几分钟后,再取上清液。〔5)加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为插烧杯底部。沉淀3～5min后，可见白色的DNA玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。B.DNA的鉴定〔1)配制二苯胺试剂：取0.1mLB10mLA(2〕4mLDNA4mL混匀后观看溶液颜色〔不变蓝〕.用沸水浴(100℃〕加热10min。在加热过程中，随时留意试管中溶液颜色的变化〔渐渐消灭浅蓝色〕.课后小结这节课咱们验证了细胞是由化合物依据肯定的方式组成的这一结一般的物质提取方法；三要留意不同的化学物质要用不同的原理鉴定。从试验过程角度来说，要理解各种溶液和试剂的作用和目的。理解D