动态激光散射仪操作规程

动态激光散射仪操作规程〔WyattGPC/SEC-MALS〕一试验前预备溶剂预备水相体系预备：超纯水或配制其它盐溶液〜1L,0.22um滤膜过滤〔必需0.02%NaN3抑菌剂〕。有机相体系预备：HPLC0.22um滤膜过滤〔进口试剂视具体状况而定〕。样品预备浓度配制〔定量环lOOuL〕:分子量〜lOOOkda：0.5-lmgmL；分子量〜lOOkda:1-2mg/mL；分子量〜lOkda:3・5mg/niL； 分子量〜5kda:5・lOmg/mL。检查仪器电路连接检查仪器电源线是否连接，电源开关、交换机〔适用于信号连接通过网线的情形〕是否翻开。二仪器系统开机及平衡操作分别依次翻开泵、柱温箱〔设定温度〕、进样系统〔手动/自动进样器〕、示差或紫外检测器、粘度检测器、多角度激光光散射检测器电源及计算机。待仪器正常开机后，翻开工作站Astra软件。开启泵使用超纯水purge泵〜5min；关闭purge阀。冲洗系统。待系统平衡完毕，使用最配制的流淌相冲洗系统。〔注：有机体系：直接使用流淌相冲洗系统〕将其流速调至O.linL/miii〔假设接入粘度检测器，必需待粘度检测器进入工作界面才能开启泵的流速，且IP&DP处于purgeon〕；假设系统中未接入GPC/SEC0.1-l.OmL/min冲洗系统〔无粘度检测器〕,示差检测器purge阀必需处于“PurgeOn“状态。假设系统中已接入GPC/SEC柱，则必需以O.lmVmiii1-20.1ml0.4-0.5mL/min,充分平衡系统；〔注：为了使系统充分平衡，建议提前一天冲洗和平衡系统；其次天开头试验〔水相系统〕3-12h〕。三试验操作及数据采集与处理待系统充分平衡。逐步调整流速至试验流速；调整示差检测器的Purge阀处于处于“Purge0住状态；待信号稳定后，归零〔Zero〕；粘度计〔ViscoStar〕的操作方法见附件。待基线稳定。在Astra软件中调用相应的试验模板〔推举使用安装工程师创立的Template.”Method〕；点击Expeiiment Run〔此时，软件消灭“waitingfor对话框“〕；〔注：单针进样调用模板的根本操作如下：File一New-ExperimentfromTemplate/Method-MyTemplates/methods；选择相应试验Tempalte/method自动进样器进样调用模板的根本操作如下：oFile一New-samplesetTemplate/blanksequence-MyTemplates/method；选择相应试验Template/methodo)进样，并将进样阀由load转至inject状态。将已配制样品，通过进样系统进样。〔0.22um0.45膜过滤或离心处理。样品尽可能使用流淌相配制〕。数据采集。一旦进样系统进样。Astra软件自动开头采集数据；当数据采集完毕；软件依据事先设定时间运行至停顿。也可承受手动停顿的方式：Experiment-Stop。5数据保存。待数据采集完毕。依次点击File-Saveas...；命名文件。数据处理。其流程为：Baselines一peaks一dirdc输入〔且nonnalise〕一查看reporto注：〔假设该Template/Method中，已使用v50kDa标准样品〔例如BSA、dextran〕在该体系下nonnalize,则不需要重复进展该操作〕。查看reporto四关机操作关闭激光检测器、紫外检测器；调整示差检测器、粘度检测器purge阀处于“On”状态。充分冲洗系统；水相体系：使用流淌相充分冲洗系统；待系统处于平衡状态；逐步0.05%NaN3冲洗柱子至少50niL〔—根柱子〕，然后摘下柱子，拧堵头，收起，备用；系统保存液：使用超纯水冲洗系统〔3-1211〕10-50%甲醇或乙醇水溶液冲洗系统〔不能冲洗GPC柱子〕。关闭全部仪器电源开关。留意事项对于样品处理、溶解要严格依据要求样品和溶剂都要严格过滤示差构造特别，不要遗忘翻开PURGE冲洗替换溶剂要留意溶剂之间的互溶性。泵流速升降肯定要慢，否则会造成柱子的损坏。柱子为耗材，不再保修范围之内做单机试验最好选择进口滤头，国产滤头易破，会造成管路堵塞。关于多角度激光及示差检测器使用的留意事项―、用户应当将仪器托付给具有肯定根底的液相色谱专业学问和较为生疏现代器的技术专业人员。二、请使用人员认真认真阅读仪器说明书或操作手册及其它随机文件，以期对仪器的性能、操作程序、维护保养有充分的了解，三、请预备好具备有良好环境的仪器室：1-房间内干净干净；15~25°C.85%,也可依据房间面积配置适当的空调机；四周不应有猛烈的机器震惊、强磁场及电磁波干扰源；室内不能侵入腐蚀性气体。如有机溶剂蒸气，应设有通风装置。四、为仪器供给稳定的电源。〔请特别留意〕10欧姆。〔请特别留意〕六、仪器应安放在结实的工作台上。七、使用的试剂、流淌相试剂必需要过滤，必要时要经过提纯后使用，其它特别要求按规定进展。尽量使用配制的流淌相•尤其是水作为流淌相时。〔请特别留意〕0.2um甚至更细的〕和器内。〔请特别留意〕十、在转变试验条件时，肯定留意流淌相之间的互溶性〔请特别留意〕十一、测试完毕，必需对仪器进展充分清洗，特别是盐水作为流淌相