东北藜蒿提取物体外抗菌作用的初步研究

第第页东北藜蒿提取物体外抗菌作用的初步研究【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheantibacterialfunctionofArtemisiaselengensisturczextractinnortheastchinainvitro.Methods:Thetubebrothmethodswereusedtodetermintheminimalinhibitionconcentration(MIC)for13commonbacteriastrains.Results:ItwasshownthatChineseMedicineinnortheastchinaexerteddifferentantibacterialeffectsonthe13commonbacteriastrains.Conclusion:ArtemisiaselengensisTurcz.innortheastchinaholdsantibacterialeffectsoncommonpathogensinvitro.

【KEYWORDS】ArtemisiaselengensisTurcz,TheMinimalInhibitionConcentration,MicrobialSensitivityTests

藜蒿为菊科植物，又称蒌蒿，在我国主要生长在鄱阳湖一带，东北、华北和中南地区均有野生分布，含有丰富的人体必需的微量元素［1］。远在唐代，孙思邈就记载了藜蒿的药用价值“藜蒿性平，味甘辛”,具有健体补虚、清心解毒、利胆退黄作用，主治肝胆湿热、脾虚纳滞等病症。近年来讨论说明藜蒿提取物具有降压作用［2］，也有少量报道其有不同程度抑菌作用［3］。为了开发藜蒿的药用资源，为临床应用供应科学根据，我们对东北藜蒿的体外抗菌作用进行了初步讨论。

1材料与方法

1.1一般资料

1.1.1药材枯燥藜蒿原植物产于东北。

1.1.2菌种乙型副伤寒沙门菌，铜绿假单胞菌，大肠埃希菌，表皮葡萄球菌，痢疾志贺菌，鲍曼不动杆菌，嗜麦芽假单胞菌，肺炎克雷伯氏菌，金黄色葡萄球菌，变形杆菌，而茎平滑念珠菌，热带念珠菌，白色念珠菌，均购自北京生物制品检定所。

1.1.3培育基

1.1.3.1液体培育基Mueller-Hinton(MH)肉汤。

1.1.3.2固体培育基Mueller-Hinton(MH)琼脂，沙氏培育基。

1.1.4仪器721分光光度计，培育箱，无菌超净工作台。

1.2方法

1.2.1藜蒿水煎剂的制备中药煎制：参照陈奇的方法［4］进行，取藜蒿粉碎，加蒸馏水浸泡30min后加热煮沸。开头用强火，沸腾后改用文火，保持微沸30min至1h，搅拌、趁热过滤。药渣再加蒸馏水煮沸30min，滤过。合并滤液，浓缩成含生药2g/mL的药液，灭菌后备用。

1.2.2藜蒿醇提物的制备参照陈奇的方法［4］进行，用60%乙醇提取，浓缩成含生药2g/mL的药液，灭菌后备用。

1.2.3菌液的`制备

1.2.3.1标准比浊管配制0.048mol/L(1.175%)氯化钡0.5mL,加0.18mol/L(1%)硫酸溶液99.5mL，混匀后用530nm波长比色调整其浊度，使汲取值为0.1。相当于5×(107～108CFU/mL)。其操作参考医学微生物学试验指导［5］。

1.2.3.2试验菌液制备将试验所用13种菌的培育物〔菌落〕用无菌生理盐水制成菌液，浓度相当于0.5麦氏比浊。

1.2.4藜蒿提取物〔药液〕的稀释藜蒿提取物采纳试管稀释法［4］，每一组试验取试管5支，分别标记1、2、3、4、5，共13组，用MH肉汤〔细菌〕、沙氏液体〔真菌〕倍比稀释药液至待测的浓度，依次为1.5g/mL、1.0g/mL、0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL。另取3支试管作为对比管，分别标记为“MH肉汤对比”,“药物原浓度对比”,“测试菌生长对比”。

1.2.5试验方法药液稀释好之后将13种试验菌液分别加入13组含药液培育基的试管中，除MH肉汤对比管外每管0.1mL菌液。全部试管放置温箱内37℃，培育24h后观看结果，在对比管符合要求的状况下，将各试验管的培育物接种至相应培育基的琼脂平板上，确定是否有细菌生长。37℃，24h观看结果，以琼脂平板上完全无细菌生长的药物最高稀释度为最低抑菌浓度〔MIC〕。

2结果

2.1东北藜蒿水煎剂对13种病原菌的最低抑菌浓度〔MIC〕见表1。表1东北藜蒿水煎剂对13种病原菌的最低抑菌浓度注：有病原菌生长“+”无病原菌生长“-”

结果显示：东北藜蒿水煎剂对细菌和真菌均有不同程度的抑菌作用，对鲍曼不动杆菌抑菌作用较强，MIC为0.25g/mL。对真菌中热带念珠菌抑菌效果较好，MIC为1.0g/mL，重复性试验结果全都。

2.2东北藜蒿醇提物对13种病原菌的最低抑菌浓度见表2。表3东北藜蒿醇提物对13种病原菌的最低抑菌浓度结果显示：东北藜蒿醇提物对表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌抑菌作用很强，MIC为0.125g/mL。对真菌中近平滑念珠菌有较强抑菌效果，MIC为0.25g/mL。

3商量

试验结果说明东北藜蒿水煎剂及醇提物均有体外抗菌作用。与已报道的藜蒿水煎剂对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，痢疾杆菌的MIC值［4］不完全相同，与我们试验的其它藜蒿MIC值也不同，可能由于药材产地不同导致药材化学成分含量不全都，以致抗菌效果也不同。

试验结果说明东北藜蒿水煎剂及醇提物对13种病原菌抑菌作用不完全相同。水煎剂对鲍曼不动杆菌和热带念珠菌抑菌效果较好，醇提物对表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、近平滑念珠菌的抑菌作用较强。在临床上真菌感染及其治疗越来越受到关注，中药抗真菌讨论及治疗倍受关注。本试验说明东北藜蒿醇提物对近平滑念珠菌有肯定抑制作用，MIC为0.25g/mL，藜蒿抗念珠菌感染有潜在开发价值。东北藜蒿醇提物