第十二章 毛细管电泳法

第十二章毛细管电泳法第一页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.1基本概念电泳：一个“自由”带电粒子在一定介质中在电场作用下的迁移淌度：μep表述物质电泳特性的参数，与粒子电荷、质量、半径、介质等有关第二页，共十七页，编辑于2023年，星期五电渗：

μeo由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶剂同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到大小相等方向相反的作用力，因此通常观测不到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动，则作用于溶剂的力便失去了平衡，溶剂发生单向流动，这种流动称电渗。

第三页，共十七页，编辑于2023年，星期五

在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。一般情况下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。式中E：场强μeo电泳淌度

μep电渗淌度第四页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.2原理电渗流方向：高电位低电位正溶质离子所受的力：电场力+电渗力负溶质离子所受的力：电场力电渗力中性分子所受的力：电渗力

柱效：N＝5.54（tR/W1/2)2tR、W1/2取同一单位第五页，共十七页，编辑于2023年，星期五溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定，一般来说，溶质迁移方向与电渗流同。流出顺序：①正离子②中性粒子③负离子高压(+)ΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘ电渗流(－)地第六页，共十七页，编辑于2023年，星期五电渗流ΘΘΘΘΘΘΘΘΘΘX－X－X－X－X－（－）高压（＋）地第七页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.3高效毛细管电泳仪器装置图清洗记录检测器高压电源毛细管电解液第八页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.3.1高压电源0--30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝为电极

12.3.2进样系统A、重力（高度差）进样B、负压进样C、电渗法进样

12.3.3分离系统毛细管：I.D.：50m-75m，长30-100cm

第九页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.3.4检测系统商品仪器：UV-VIS，加石英聚焦镜；激光荧光实验室：质谱，电分析

12.3.5清洗系统一般用负压法，NaOH洗液，减少吸附，清洗对重现性影响重大

第十页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.4分类

常规区带电泳（CZE）胶束电动毛细管色谱（MECC）毛细管离子分析SO3－SO3－SO3－SO3－SO3－SO3－第十一页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.4.1常规区带电泳（CZE）电解质缓冲液，正高压分离阳离子和大分子阴离子12.4.2胶束电动毛细管色谱（MECC）

揉合了毛细管电泳和液相分配色谱的原理，将表面活性剂加到电解液中，溶质分子进入体系后在胶束相和水相之间进行分配，不同的溶质分子因电泳速度和分配系数的不同而分离。

第十二页，共十七页，编辑于2023年，星期五主要用于分离中性分子，正高压MECC体系存在着类似于色谱的两相，一是流动的水相，另一相是移动的“固定相”--—胶束相，溶质在这两相之间分配。表面活性剂的浓度足够大时，单体结合在一起，形成一个球体，称为胶束，这个足够大的浓度称为临界浓度。第十三页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.4.3毛细管离子分析

加电渗流改性剂使电渗流反向，用于淌度很大的离子的分离，主要是无机阴离子的分离。负高压

加阳离子表面活性剂，e.g.十六烷基三甲基溴化铵第十四页，共十七页，编辑于2023年，星期五12.5应用及前景特点：A、分离效率高：104理论塔板数，接近GCB、

分离速度快：优于LC，接近GCC、进样量少：nLD、可分离GC受限制的物质第十五页，共十七页，编辑于2023年，星期五应用：A、药物分析：旋光异构体B、

生化分析：氨基酸衍生物、蛋白、DNAC、环境分析：PAH、阴离子、酚

弱点：检测器的绝对灵敏度高，但浓度灵敏度仅为ppm

第十六页，共十七页，编辑于2023年，星期