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文档简介

离子交换法演示文稿1本文档共43页;当前第1页;编辑于星期六\8点42分(优选)离子交换法本文档共43页;当前第2页;编辑于星期六\8点42分3本文档共43页;当前第3页;编辑于星期六\8点42分4本文档共43页;当前第4页;编辑于星期六\8点42分树脂的选择5比如:蛋白质带正电荷还是负电荷?本文档共43页;当前第5页;编辑于星期六\8点42分树脂的选择6本文档共43页;当前第6页;编辑于星期六\8点42分第二节

离子交换树脂的结构和种类

载体:惰性的不溶性高分子固定骨架。功能基团:与载体共价键连接的不能移动的活性基团平衡离子:与功能基团以离子键连接的可移动的活性离子7离子交换树脂构成本文档共43页;当前第7页;编辑于星期六\8点42分一、离子交换树脂的分类8本文档共43页;当前第8页;编辑于星期六\8点42分阳离子交换树脂分类强酸型树脂(有好的解离能力):磺酸型树脂,功能基团为磺酸根(—SO3H)甲基磺酸根(—CH2SO3H)中酸性树脂磷酸型树脂(—PO3H2

)弱酸性树脂(酸性环境中解离度受到抑制)羧酸型树脂(—COOH)

酚型树脂(

)9本文档共43页;当前第9页;编辑于星期六\8点42分阴离子交换树脂强碱型阴离子交换树脂季铵基

弱碱型阴离子交换树脂(在碱性环境中解离度受到抑制)

伯、仲、叔胺基中强碱性阴离子交换树脂

兼有以上两类活性基团10本文档共43页;当前第10页;编辑于星期六\8点42分离子交换树脂的性能

11本文档共43页;当前第11页;编辑于星期六\8点42分12本文档共43页;当前第12页;编辑于星期六\8点42分“strongandweak”

refertotheextentthattheionizationstateofthefunctionalgroupsvarieswithpH.Thetermsstrongandweakdonotrefertothestrengthwithwhichthefunctionalgroupsbindtoproteins.StrongionexchangersshownovariationinionexchangecapacitywithchangeinpH.StrongionexchangersincludeQ(anionic),SandSP(cationic).TheseexchangersdonottakeuporloseprotonswithchangingpHandsohavenobufferingcapacity,remainingfullychargedoverabroadpHrange.TitrationcurvesshowtheionexchangecapacityofstrongionexchangersQandS.Approximately5mlofQorSSepharoseFastFlowareequilibratedin1MKClandtitratedwith0.1MNaOH.本文档共43页;当前第13页;编辑于星期六\8点42分weakionexchanger:Advantage:theycanofferadifferentselectivitycomparedtostrongionexchangers.Adisadvantage:becauseweakionexchangerscantakeuporloseprotonswithchangingpH,theirionexchangecapacityvarieswithpH.suchasDEAE(anionic),ANX(anionic)andCM(cationic),本文档共43页;当前第14页;编辑于星期六\8点42分二、离子交换树脂的命名:15交联度:是合成载体骨架时交联剂重量的百分数,用“×”将树脂编号与交联度分开。如:强酸×7其交联度为7%。编号:本文档共43页;当前第15页;编辑于星期六\8点42分三、离子交换树脂的骨架(载体)

由苯乙烯与二乙烯苯经过氧苯甲酰催化聚合而成。16(一)苯乙烯型离子交换树脂本文档共43页;当前第16页;编辑于星期六\8点42分由丙烯酸甲酯与二乙烯苯经过氧苯甲酰催化聚合而成17(二)丙烯酸型离子交换树脂本文档共43页;当前第17页;编辑于星期六\8点42分18(三)多乙烯多胺——环氧氯丙烷树脂弱碱301树脂,同时含有伯、仲、叔胺,还含有少量季铵基团。(四)聚乙烯吡啶系离子交换树脂本文档共43页;当前第18页;编辑于星期六\8点42分1、蛇笼树脂19(五)其它离子交换树脂

两性离子交换树脂以交联的强碱性阴离子交换树脂为笼,以丙烯酸盐负离子在树脂内聚合生成线型聚合物作为蛇而得名。树脂中的羧基(-COO-)和季铵基(-N+(CH3)3)是等摩尔的,故树脂是中性的。应用:脱盐。如,Na+被树脂中的-COO-除去,而Cl–被季铵基除去。本文档共43页;当前第19页;编辑于星期六\8点42分20(五)其它离子交换树脂

2、选择性交换树脂应用:含重金属离子的废水应用:除去色素(氧化还原树脂,略)本文档共43页;当前第20页;编辑于星期六\8点42分第三节

离子交换动力学*

21本文档共43页;当前第21页;编辑于星期六\8点42分离子交换速度的影响因素:1、树脂粒度:树脂粒度大,交换速度慢。2、搅拌速度3、树脂交联度:交联度大,交换速度低。4、离子半径和离子价:离子每增加一个电荷,交换速度下降一个数量级。5、温度。6、离子浓度:交换速度随离子浓度的上升而加快。22本文档共43页;当前第22页;编辑于星期六\8点42分第四节

离子交换树脂的性能

23一、离子交换对树脂的基本要求:23本文档共43页;当前第23页;编辑于星期六\8点42分二、影响树脂性能的几个因素24本文档共43页;当前第24页;编辑于星期六\8点42分第五节

离子交换的选择性

25影响离子交换选择性的因素:本文档共43页;当前第25页;编辑于星期六\8点42分一、离子的化合价与水合半径的影响:相对亲和力和相对浓度。26电荷效应越强的离子与树脂的亲和力越大。本文档共43页;当前第26页;编辑于星期六\8点42分二、离子化合价与离子浓度的影响:27在稀溶液中,树脂吸附高价离子的倾向很大。

本文档共43页;当前第27页;编辑于星期六\8点42分三、交换环境的影响1、溶液的pH:解离度、交换容量、选择性。2、离子强度:交换容量、选择性、交换速度3、有机溶剂:减弱树脂对有机离子的吸附能力。28本文档共43页;当前第28页;编辑于星期六\8点42分第六节

离子交换操作方法

一、

树脂的选择29目的物是弱酸性或弱碱性的小分子物质时,宜选用强酸强碱树脂(氨基酸的分离)。蛋白质、酶和其它生物大分子的分离多采用弱碱或弱酸性树脂,减少生物大分子的变性,利于洗脱,提高选择性。本文档共43页;当前第29页;编辑于星期六\8点42分

二、树脂的处理和再生1、

外观特征302、

树脂的预处理(1)

物理处理:去杂,过筛。(2)化学处理:用8~10倍的1mol/L盐酸或氢氧化钠溶液交替浸泡。

本文档共43页;当前第30页;编辑于星期六\8点42分氨基酸分离前树脂的处理31本文档共43页;当前第31页;编辑于星期六\8点42分不同类型树脂的处理32本文档共43页;当前第32页;编辑于星期六\8点42分树脂的再生

树脂再生:使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程。

33再生过程本文档共43页;当前第33页;编辑于星期六\8点42分三、基本操作方法34本文档共43页;当前第34页;编辑于星期六\8点42分三、基本操作方法35洗脱液本文档共43页;当前第35页;编辑于星期六\8点42分酸、碱洗脱液:改变吸附物的电荷或改变树脂活性基团的解离状态,以消除静电结合力,迫使目的物被释放出来;盐类洗脱液:通过高浓度的同种电荷的离子与目的物竞争树脂上的活性基团,使吸附物游离。

36本文档共43页;当前第36页;编辑于星期六\8点42分洗脱方式37改变溶液pH及离子强度:本文档共43页;当前第37页;编辑于星期六\8点42分思考题1.混合溶液中,待分离目的蛋白质T的pI为7.9,杂质蛋白A的pI为5.4,杂质蛋白质B的pI为4.9,实验室现有SPSepharose™FastFlow(一种强阳离子交换树脂),请设计一套实验方案,使用离子交换技术纯化目的蛋白质T。38本文档共43页;当前第38页;编辑于星期六\8点42分第七节应用实例39本文档共43页;当前第39页;编辑于星期六\8点42分氨基酸制备、分离猪血粉水解制备6种氨基酸:40本文档共43页;当前第40页;编辑于星期六\8点42分无盐水制备氢型阳离子交换树脂羟型阴离子交换树脂41除去水里所有离子Me:金属离子本文档共43页;当前第41页;编辑

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