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第五章微生物养分与培育基习题及答案(总8页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-CompanyOne1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除10第五章微生物养分习题及参考答案一、名词解释1.生长因子:2.选择培育基(seclectedmedia):3.根底培育基合成培育基化能异养微生物化能自养微生物光能自养微生物光能异养微生物单纯集中促进集中主动运输基团移位pH渗透压水活度二、填空题微生物生长生殖所需六大养分要素是 、 、 、 和 等。碳源物质为微生物供给 和 ,碳源物质主要有 、 、、 、 等。生长因子主要包括 、 和 ,其主要作用是 、 。依据 ,微生物可分为自养型和异养型。依据 ,微生物可分为光能养分型和化能养分型。依据 ,微生物可分为无机养分型和有机养分型。能源和电子供体性质的不同,微生物的养分类型可分为 、 、和 。按用途划分,培育基可分为 、 、 和 等4种类型。常用的培育基凝固剂有 、 和 。养分物质进入细胞的方式有 、 、 和 。三、选择题〔4个答案选1〕1.以下物质可用作生长因子的是〔 A.葡萄糖 B.纤维素 C.NaGl D.叶酸2.大肠杆菌属于〔 〕型的微生物。A.光能无机自养B.光能有机异养 C.化能无机自养D.化能有机异养3.硝化细菌属于〔 〕型的微生物。A.光能无机自养 B.光能有机异养 C.化能无机自养D.化能有机异养4.某种细菌可利用无机物为电子供体而有贾稀为碳源,属于〔 〕型的微生物。A.兼养型 B.异养型 C.自养型 D.原养型5、化能无机自养微生物可利用〔 〕为电子供体。A.CO2 B.H2 C.O2 D.H2O6.用来分别产胞外蛋白酶菌株的酪素培育基是一种〔 〕。A.根底培育基 B.加富培育基 C.选择培育基 D.鉴别培育基7、固体培育基中琼脂含量一般为〔 〕。A.0.5% B.1.5% C.2.5% D.5%8.用来分别固氮菌的培育基中缺乏氮源,这种培育基是一种〔 A.根底培育基B.加富培育基C.选择培育基D.鉴别培育基9.水分子可通过〔 〕进入细胞。A.主动运输 B.集中 C.促进集中 D.基团转位10.被运输物质进入细胞前后物质构造发生变化的是〔 〕。主动运输 B.集中 C.促进集中 D.基团转位四、是非题90碳源对配制任何微生物的培育基都是必不行少的。氨基酸在碳源缺乏时可被微生物用作碳源物质,但不能供给能源。嘧啶。为使微生物生长旺盛,培育基中养分物质的浓度越高越好。对含葡萄糖的培育基进展高压蒸汽灭菌时可以121.3℃加热20min即可。半固体培育基常用来观看微生物的运动特征。根底培育基可用来培育全部类型的微生物。伊红美蓝〔EMB〕培育基中,伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长。体蛋白只能运输一种物质。五、简答题能否准确地确定微生物对微量元素的需求,为什么?是生长因子?以伊红美蓝〔EMB〕培育基为例,分析鉴别培育基的作用原理。与促进集中相比,微生物通过主动运输吸取养分物质的优点是什么?pH决方法。有一培育基如下:甘露醇,MgSO,KHPO,HPOCuSONaCl,4 2 4 2 4 4CaCOA.碳素来源;B.氮素来源;C.矿质来源,该培3养基可用于培育哪类微生物?列表比较微生物的四大养分类型。A20g10g5g,NaCl5g,水1000ml,pH7.415ml0.7kg/km2灭菌15min,用于肠道杆菌培育。柠檬酸盐培育基:NHHPO1g,KHPO1g,NaCl5g,MgSO0.2g,柠檬4 2 4 2 4 42g18g,1000ml,pH6.8110ml,1.1Kg/cm220六、论述题1.以紫色非硫细菌为例,解释微生物的养分类型可变性及对环境条件变化适应力量的敏捷性。你该如何设计试验?生物分析”〔microbiologicalassay〕对样品中维生素或氨基酸进展定量。试设计B12的含量进展分析。某学生利用酪素培育基平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在酪素培育基平板种,为什么?以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统〔PTS〕为例解释基团转位。试分析在主动运输中,ATP结合盒式转运蛋白〔ABC转运蛋白〕系统和膜结合载体蛋白〔透过酶〕试设计一种分别纤维素分解菌的培育基,并说明各养分物质的主要功能〔只写明成分,不要求定量〕。试从能源、碳源的角度来比较Anabaena、Rhodospirillum、Nitrobacter、E.coli《微生物养分习题》参考答案一、名词解释微生物生长不行缺少的微量有机物,包括维生素,氨基酸及碱基等是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分别出来的培育基。是含有一般微生物生长生殖所需的根本养分物质的培育基。是由化学成分完全了解的物质配制而成的培育基,也称化学限定培育基。以有机碳化合物为能源,碳源和供氢体也是有机碳化合物的微生物。化能自养微生物:利用无机化合物氧化过程中释放的能量和以CO为碳2源生长的微生物。光能自养微生物:利用光作为能源,以CO为根本碳源,供氢体是复原2在无机化合物的微生物。以光为能源,以有机碳化合物作为碳源和供氢体营光合生长的微生物。又称被动运输,只疏水型双分子层细胞膜〔包括孔蛋白在内〕O2,CO2,乙醇和某些氨基酸分子。指溶质在运送过程中,必需借助存在于细胞膜上的底物特异载相等为止。主动运输指一类须供给能量〔包括ATP,质子动势或离子泵等〕并通过细胞膜上特异性载体蛋白设想的变化,而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运送方式。指一类既需要特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式。其特点是溶质在运送前后还会发生分子构造的变化。主要用于运送各种糖类,核苷酸,丁酸和腺嘌呤等物质。靠磷酸转移酶系统即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统进展。pHpH转变的代谢产物,如步准时调整,就会抑制甚至杀死自身,因而在设计此类培育pHpH是某水溶液中一个可用压力来量度的物化指标。它表示两种不同浓度的溶液间假设被一个半透性薄膜隔开时,稀溶液中的水分子会因水势的推动而透过薄膜流向浓溶液,直至浓溶液所产生的机械压力足以使两边水分子的进出到达平衡为止,这时由浓溶液中的溶质所产生的机械压力,既为它的渗透压值。表示在自然或人为环境中,微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。其定量含义为:在同温同压下,某溶液的蒸汽压与纯水蒸汽压之比。二、填空题碳源,氮源,无机盐,生长因子,水,能源碳素来源,能源,糖,有机酸,醇,脂,烃组分的前体碳源性质能源电子供体光能无机自养 光能有机异养 化能无机自养 化能有机异养根底,加富,鉴别,选择琼脂,明胶,硅胶集中,促进集中,主动运输,膜泡运输三、选择题1.D;2.D;3.C;4.A;5.B;6.D;7.B;8.C;9.B;10.D四、是非题123.-45.-6.-78910.-五、简答题1.能否准确地确定微生物对微量元素的需求,为什么?答:不能。微生物对微量元素需要量极低;微量元素常混杂在自然有机化合化,难以定量分析检测。为什么生长因子通常是维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶,而葡萄糖通常不是生长因子?答:维生素、氨基酸或嘌呤(嘧啶)通常作为酶的辅基或辅酶,以及用于合成蛋白质、核酸,是微生物生长所必需且需要量很小,而微生物(如养分缺陷型菌株)自身不能合成或合成量缺乏以满足机体生长需要的有机化合物。而葡萄糖通常作为碳源和能源物质被微生物利用,需要量较大,而且其他一些糖类等碳源物质也可以代替葡萄糖满足微生物生长所需。以伊红美蓝〔EMB〕培育基为例,分析鉴别培育基的作用原理。答:EMB培育基含有伊红和美蓝两种染料作为指示剂,大肠杆菌可发酵乳泽的深紫色,而与其他不能发酵乳糖产酸的微生物区分开。与促进集中相比,微生物通过主动运输吸取养分物质的优点是什么?进集中将养分物质运输进入细胞,需要环境中养分物质浓度高于胞内,而在自然界中生长的微生物所处环境中的养分物质含量往往很低,在这种状况下促进集中难以发挥作用。主动运输则可以逆浓度运输,将环境中较低浓度什养物质运输进入胞内,保证微生物正常生长生殖。pH决方法。pH变化:pHNH而使pH3以〔NH〕SO作N源,会过剩SO2-,而使pH下降。4 2 4 4分解利用阳离子化合物如:NaNONa+pH3pHpH有一培育基如下:甘露醇,MgSO,KHPO,HPO,CuSO,NaCl,4 2 4 2 4 4CaCO,蒸馏水。试述该培育基的A.碳素来源;B.氮素来源;C.矿质来源,该培3养基可用于培育哪类微生物?答:〔1〕该培育基的碳素来源和能量来源均来自甘露醇。在无氮培育基上生长。该培育基的矿质养分物质包括:Mg2+,K+,Cu2+,Na+,PO3-,SO2-4 4HPO2-,PO3-,CaCO主要用来作缓冲物质调整培育基的pH值,以保4 4 3pH据此我们可推知该培育基可用于培育自生固氮菌等微生物。列表比较微生物的四大养分类型养分类型养分类型光能无机养分型〕〔光能异养型〕化能无机养分型〕〔化能异养型〕能源 氢供体根本碳源实例光无机物蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类光有机物CO2及简洁有机物红螺菌科的细菌〔即紫色无硫细菌〕硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌等有机物绝大多数细菌和全部真核生物分析下述培育基各组分的作用,依据其功能推想其所属培育基的类型:20g10g5g,NaCl5g,水1000ml,pH7.4加1%中性红5ml分装与有发酵管的试管0.7kg/km2灭菌15min,用于肠道杆菌培育。柠檬酸盐培育基:NHHPO1g,KHPO1g,NaCl5g,MgSO0.2g,柠檬4 2 4 2 4 4酸钠2g,琼脂18g,水1000ml,pH6.8加1%溴麝香草酚兰10ml,1.1Kg/cm2灭20A蛋白胨A蛋白胨乳糖NaCl牛胆酸盐功能氮院碳源生长因子适宜菌生长NHHPO42 4KHPO24B氮源生长因子NaCl、MgSOKHPO4 2 4柠檬酸钠琼脂1%中性红指示剂1%溴麝香草酚兰发酵管推断是否产气属于半组合培育基PH6.8无机物碳源檬酸钠适宜菌生长属于合成培育基简述什么是主动运输和基团转位二者有什么区分和联系答:主动运输是物质进入细胞的一种方式,,即细胞会针对某些特定物质通过消耗能量,借助载体进展逆浓度的输送。基团转位是一种特别的主动运输,其根本特征与后者一样,区分在于被转运的物质一旦进入细胞后,分子构造发生转变,通常是接上某种基团〔通常为磷酸基团〕,使之不能穿过细胞膜重回到细胞外。六、论述题适应力量的敏捷性。答:紫色非硫细菌在没有有机物时可同化CO进展自养生活,有有机物时利2用有机物进展异养生活,在光照及厌氧条件下利用光能进展光能养分生活,在黑暗及好氧条件下利用有机物氧化产生的化学能进展化能养分生活。假设要从环境中分别得到能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培育物,你该如何设计试验?答:〔1)从苯含量较高环境中采集土样或水样;(2)配制培育基,制备平板,—种仅以苯作为唯一碳源(A),另—种不含任何碳源作为比照(B);(3)将样品适当A(4)将平板置于适当温度条件下培育,观看是否有菌落产生;〔5ABBCO(6)ABA培育,获得单菌落,初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培育物;(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为惟一碳源的液体培育基中进展摇瓶发酵试验,利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的状况。某些微生物对生长因子的需求是具有较高的专一性,可利用它们通过“微生物分析”〔microbiologicalassay〕对样品中维生素或氨基酸进展定量。试设计B的含量进展分析。12答:(1B但含有过量其他养分物质的培育基分装于一系列试12管,分别定量接人用于测定的微生物;(2)在这些试管中分别补加不同量的维生B标准样品及待测样品,在适宜条件下培育;(3)以微生物生长量(如测定12OD600nm)值对标准样品的量作图,获得标准曲线;(4)测定含待测样品试管中B的含量。12某学生利用酪素培育基平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在酪素培育基平板上觉察有几株菌的菌落四周有蛋白水解圈,是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大,就断定该菌株产胞外蛋白酶的力量就大,而将其选择为高产蛋白酶的菌种,为什么?答:不能。由于,(1)不同微生物的养分需求、最适生长温度等生长条件有差异,在同一平板上一样条件下的生长及生理状况不同;(2)不同微生物所产蛋白酶的性质(如最适催化反响温度、PH、对底物酪素的降解力量等)不同;(3)该学生所承受的是一种定性及初步定量的方法,应进一步针对获得的几株菌分别进展培育基及培育条件优化,并在分析这些菌株所产蛋白酶性质的根底上利用摇瓶发酵试验确定蛋白酶高产菌株。以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统〔PTS〕为例解释基团转位。答:大肠杆菌PTS由5种蛋白质〔酶Ⅰ、酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶Ⅱc及热稳定蛋白质HPr〕组成,酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶Ⅱc3个亚基构成酶Ⅱ。酶Ⅰ和HPr为非特异性细胞质蛋白,酶Ⅱa也是细胞质蛋白,亲水性酶Ⅱb与位于细胞膜上的疏水性酶Ⅱc相结合。酶Ⅱ将一个葡萄糖运输进入胞内,磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基团逐步通过酶Ⅰ和HPr的磷酸化和去磷酸化作用,最终在酶Ⅱ的作用下转移到PTS试分析在主动运输中,ATP结合盒式转运蛋白〔ABC转运蛋白〕系统和膜结合载体蛋白〔透过酶〕答:〔1〕ABC转运蛋白常由两个疏水性跨膜构造域与胞内的两个核苷酸结合构造域形成复合物,跨膜构造域在膜上形成一个孔,核苷酸结合构造则可结合ATP。ABC转运蛋白发挥功能还需要存在于周质空间〔G+菌〕或附着在质膜外外表〔〕的底物结合蛋白的帮助。底物结合蛋白与被动运输物质结合后再与ABC转运蛋白结合,借助于ATP水解释放的能量,ABC转运蛋白将被运输物与透过酶结合,而膜内外质子浓度差在消逝过程中,被运输物质与质子

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