医学微生物学课件 第2篇-第34章 朊粒

第34章

朊粒潘晓玲cheer718@*又称朊病毒，是一种由宿主细胞编码的、构象异常的具有自我复制能力的和传染性。

*是人和动物传染性海绵状脑病（TSE）的病原体。朊粒（prion）StanelyB.Prusiner1997诺贝尔生理学或医学奖DanielC.Gajdusek1976诺贝尔生理学或医学奖生物学性状

朊粒的本质是一种异常折叠的朊蛋白（prionprotein，PrP）。异常蛋白在电镜下呈纤维状或杆状（直径为10-20nm），称为羊瘙痒病相关纤维（scrapieassociatedfibril，SAF）。PrPC

与PrPSC

正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人类PrP基因位于第20号染色体，小鼠PrP基因位于第2号染色体。

PrPC与PrPSc由同一染色体基因编码，其氨基酸序列完全一致（253～254个氨基酸），根本的差别在于它们空间构象上的差异。

正常情况下，细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋白（cellularprionprotein,PrPC），PrPC以α螺旋为主，对蛋白酶K敏感，无致病性。PrPC

与PrPSCα螺旋β折叠

某些条件下，PrPC构型发生异常变化（以β折叠为主）形成致病的PrPSc（羊瘙痒病朊蛋白，scrapieprionprotein），对蛋白酶K有抗性，具有致病性与传染性。α螺旋PrPC转变为PrPSC的因素外源性朊粒的侵入，和体内PrPC结合催化转变为PrPSc，见于传染性朊粒病；体内PrP基因突变使PrPC结构失去稳定性，自发转变为PrPSc，常见于遗传性朊粒病；自发性的PrPC异常折叠形成PrPSc，散发性朊粒病。有致病性与传染性无致病性感染动物正常及感染动物存在抗性不可溶敏感可溶对蛋白酶K的抗性在非变性去污剂中β-折叠占43％，ɑ-螺旋占30％ɑ-螺旋占42％，β-折叠仅占3％分子构型

PrPC

PrPSCPrPC与PrPSc的主要区别人类及动物prion病人类prion病动物prion病库鲁病羊瘙痒病（Kurudisease）（scrapieofsheepandgoat）克-雅病水貂传染性脑病（Creutzfeld-Jakobdiease，CJD）（transmissibleminkencephalopathy，TME）格斯特曼综合症鹿慢性消瘦症（Grestmann-Strausslersyndrome，GSS）（chronicwastingdiseaseofdeer，CWD）致死性家族失眠症牛海绵状脑病（fatalfamilialinsomnia，GSS）（bovirnespongiformencephalopathy，BSE）变异型克-雅病猫海绵状脑病（variantCJD，vCJD）（felinespongiformencephalopathy，FSE）

*动物TSE，如：

羊瘙痒病（scrapieofsheepandgoat）

牛海绵状脑病（bovine

spongiform

encephalopathy,BSE）疯牛病

*人类TSE，如：

库鲁病（kurudisease）克－雅病变种（variantCJD,v-CJD）传染性海绵状脑病（transmissiblespongiformencephalopathy,TSE）

Prion对理化因素有很强的抵抗力

*

抵抗蛋白酶K的消化作用；

*

标准的高压蒸气灭菌（121.3℃,20

min）不能破坏Prion，需高压蒸气灭菌134℃、≥2

h，才能使其失去传染性。

*

对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。抵抗力

*

传染性（TSE）：

如库鲁病、克雅病变种

多种途径传播（消化道、血液、神经及医源性）

*

遗传性：

如家族性克雅病，与遗传有关（PrP基因突变）

*

散发性：

如散发性克雅病，传播途径尚不明人类Prion病的传播途径库鲁病（Kurudisease）疯牛病，与病牛接触或进食病牛肉是人v-CJD最主要的发病原因。疯牛病（madcow

disease）v-CJD病人大脑组织切片：示海绵状病变（左）和淀粉样蛋白沉淀（右）变异型克雅病（variantCJD，vCJD）免疫组化法：标本先用蛋白酶K处理破坏PrPC，然后再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测对蛋白酶K有抗性的PrPSc。Westernblotting：目前国际上诊断Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K处理组织标本，电泳后转印至硝酸纤维膜，再用PrP单克隆抗体或多克隆抗体检测PrPSc。病原学确诊-检测致病因子PrPSc

医源性Prion病的预防

对污染物必须彻底灭菌：1mol/L

NaOH处理1h，再高压灭菌134℃，2

h。

BSE及vCJD的预防

禁止用牛羊等反刍动物的骨肉粉作为饲料添加剂喂