鱼类生理学实验

鱼类生理学实验第一页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验一

鱼类生理学实验常用仪器

实验基本操作技术

第二页，共三十七页，编辑于2023年，星期四一、鱼类生理学实验的地位本课程共20学时，属专业基础课程。成绩计算：报告及修改（用红笔）90%，考勤10%。二、鱼类生理学实验方法第三页，共三十七页，编辑于2023年，星期四三、鱼类生理学实验目的1.掌握基本实验方法；2.掌握主要仪器的操作方法；3.掌握生理实验基本技能；4.独立分析实验结果、写出规范的实验报告。第四页，共三十七页，编辑于2023年，星期四四、鱼类生理学实验要求1.实验前：教师和学生均做好实验准备工作。2.实验中：教师简要讲解实验原理、关键步骤、实验要求等。学生领取器材，归还时复核，损坏登记，丢失赔偿。3.实验后：归还实验用品，动物尸体按指定位置放置，轮流打扫清洁卫生；转录、整理实验结果，及时上交实验报告。第五页，共三十七页，编辑于2023年，星期四五、常用生理仪器的使用

（一）刺激系统

1.刺激器

2.刺激电极（1）普通电极（2）保护电极（3）Zn-Cu弓（二）引导、换能系统

1.压力换能器

2.张力换能器第六页，共三十七页，编辑于2023年，星期四（三）放大系统（信号调节）放大器：可将生物电信号放大1000倍以上。（四）显示、记录系统1.生理记录仪常用有二道、四道及八道生理记录仪等，一个通道可记录一个信号。2.计算机生物信号采集处理系统

PCLAB-UE计算机生物信号采集处理系统。第七页，共三十七页，编辑于2023年，星期四六、鱼类生理实验基本操作技术（一）手术器械1.刀：姿势有指压式、执笔式及反挑式等。2.剪：手术剪与毛剪。3.镊：用于剥离、剪断和缝合。4.钳：止血钳。5.其他：探针、玻璃分针、蛙板、锌铜弓、蛙心夹、动脉导管、气管插管等。（二）实验动物选择：选择健康动物。第八页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验二计算机生物信号采集处理系统

一、系统组成与工作原理

PCLAB-UE由硬件和软件两部分构成，硬件主要完成对各种生物电信号与非电生物信号进行调理、放大，并对信号进行模/数（A/D）转换，使之进入计算机。软件主要对已经数字化了的生物信号进行显示、记录、存储、处理及打印输出，同时对系统各部分进行控制，与操作者进行人机对话。第九页，共三十七页，编辑于2023年，星期四二、主界面

从上到下依次分为：标题栏、菜单栏、工具栏、状态提示栏及采样窗、控制面板和数据窗等其他多个相应的子窗口组成。第十页，共三十七页，编辑于2023年，星期四三、使用方法1.设置：标准配置，恢复出厂时的配置。2.新建：选择实验项目，填写实验信息，进入实验窗口，开始实验。3.采样：记录实验数据。4.控制面板参数调节：（1）通道功能调节；（2）刺激参数调节。5.存储：文件保存位置：F：/，文件名：07水养3-呼吸（左2）。6.编辑：打开原文件→选择→复制→打开“工具”下的“画图”→处理文件→复制图片→存盘到F：/。第十一页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验三影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定血红蛋白的测定第十二页，共三十七页，编辑于2023年，星期四影响血液凝固的因素

表1血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间（秒）1空白2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境5肝素4滴6草酸钾4滴7肺组织浸液4滴5号管加CaCl24滴6号管加CaCl24滴第十三页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【注意事项】l.采血过程要尽量快，以减少计时误差，对比实验的采血时间要紧接着进行。2.每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。3.判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管达45°时试管内血液不见流动为准。第十四页，共三十七页，编辑于2023年，星期四红细胞脆性的测定

1.溶液配置表2不同浓度NaCl溶液配制管号123456789101%NaCl（mL）7.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)3.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.25第十五页，共三十七页，编辑于2023年，星期四2.结果观察①未溶血试管：液体下层有大量红细胞下沉，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。②不完全溶血试管：液体下层有红细胞下沉，上层出现透明淡红色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。②完全溶血试管：液体完全变成透明红色，管底无红细胞下沉。第十六页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【注意事项】1.试管要干净，加抗凝血的量要一致。2.配制NaCI溶液时应力求准确、无误。3.混匀时，轻轻倾倒1～2次，损少机械震动，避免人为溶血。4.静置时间足够，应在光线明亮处判定结果。

第十七页，共三十七页，编辑于2023年，星期四血红蛋白测定①先检查血红蛋白吸管和测定管是否清洁，如不清洁则依次用自来水→蒸馏水→无水乙醇清洗。②将0.1N盐酸加入测定管中至刻度“2”处。③用血红蛋白吸管吸取血液至刻度20μl处，用脱脂棉擦净外壁血液后，立即将血液缓缓吹入测定管的盐酸中，并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次（避免起泡），使吸管中的血液全部进入盐酸液层中，混匀。④酸化10min后，逐滴加入蒸馏水使液体颜色变浅，边加边混匀并与标准比色板比较，至二者颜色相同为止。⑤读出测定管内液体凹面最低处的刻度，即为每100ml血液中血红蛋白的克数。第十八页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【注意事项】1.吹血入测定管时，不宜用力过猛，避免起泡以影响读数。2.稀释时应逐滴加入，防止稀释过量。3.血液与盐酸作用时间不能少于10min，否则血红蛋白不能充分转变为高铁血红蛋白，使结果偏低。4.用血红蛋白吸管吸血时要准确，比色应在自然光下进行。第十九页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验报告的撰写1实验原理2材料与方法2.1主要器材2.2主要药品2.3实验动物2.4实验方法2.4.1Hb测定：按鱼类生理学实验方法进行[1]。2.4.2RBC脆性测定：按鱼类生理学实验方法进行[1]。2.4.3影响血凝因素：按鱼类生理学实验方法进行[1]。第二十页，共三十七页，编辑于2023年，星期四3实验结果3.1Hb含量及RBC脆性测定表1鳙鱼Hb含量及RBC脆性测定分组Hb测定含量（g/L）RBC脆性测定（NaCl%）最小抵抗最大抵抗实验组对照组750.48～0.400.33～0.21第二十一页，共三十七页，编辑于2023年，星期四3.2不同因素对血液凝固时间的影响表2血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间（秒）1空白2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境5肝素4滴6草酸钾4滴7肺组织浸液4滴5号管加CaCl24滴6号管加CaCl24滴第二十二页，共三十七页，编辑于2023年，星期四4分析与探讨4.1Hb测定结果比对照高（或低、或基本一致），从操作过程方面说明原因：……。4.2RBC脆性测定结果，比对照组相比，最小抵抗高（或低、或基本一致），最大抵抗……，从操作过程方面说明原因：……。4.3凝血时间测定结果表明，××处理能加快（抑制或不凝）血液凝固，为什么？××管加CaCl2后凝固，为什么？（从凝血机制分析）5参考文献[1]杨秀平.动物生理学实验[M].北京：高等教育出版社，2004.85-99.第二十三页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验四心肌收缩的特点【实验目的】

学习蟾蜍心脏活动描记的方法，观察心肌收缩的特点。【实验原理】

心肌的有效不应期特别长，几乎占据了整个收缩期和舒张早期。在此期内任何刺激均不能引起心肌收缩。因此心肌不会产生强直收缩，心脏总是有节律的舒缩。在心脏舒张早期之后，给心肌一次有效刺激，会引起心脏一次期前收缩，紧接着出现一次较长的间歇——代偿间隙。第二十四页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【实验对象】蛙或蟾蜍【实验药品】任氏液【实验方法与步骤】

1.实验准备（1）在体蛙心制备：取蛙一只，破坏脑、脊髓，仰卧固定于蛙板上。左手持镊子提起胸骨后端的皮肤剪一小口，然后向左、右两侧锁骨外侧剪开皮肤、肌肉，剪断左右锁骨，使创口呈一倒三角形，充分暴露心脏部位，并用眼科剪剪开心包膜，彻底暴露心脏。第二十五页，共三十七页，编辑于2023年，星期四（2）观察心脏的结构识别蛙心脏。自心脏腹面可观察到心室、心房、动脉球和主动脉。用玻璃分针向前翻转蛙心，暴露心脏背面可观察到静脉窦和心房。（3）连接实验装置将蛙心夹上的细线与张力换能器相连，让心脏搏动信号传入计算机生物信号采集处理系统。将铜丝与心室接触良好并固定稳妥后，与刺激器的输出连接。第二十六页，共三十七页，编辑于2023年，星期四2.实验项目（1）描记正常曲线，观察曲线的收缩相和舒张相。（2）用中等强度的单个阈上刺激在收缩期刺激心室，有何变化？为什么？（3）用中等强度的单个阈上刺激在舒张中后期刺激心室，有何变化？为什么？（4）心肌“全或无”反应：用丝线在静脉窦与心房之间作一结扎，心脏停止跳动。然后给予阈下及不同强度的阈上刺激，观察蛙心收缩强度的变化。第二十七页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【结果及分析】1.心缩期单个阈上刺激，心脏有何变化，为什么？2.心舒期单个阈上刺激，心脏有何变化，为什么？3.第一结扎后，心房、心室活动有何变化，为什么？4.阈下刺激心脏的收缩曲线幅度有何变化，为什么？5.不同强度的单个阈上刺激刺激，心脏的收缩曲线幅度有何变化，为什么？第二十八页，共三十七页，编辑于2023年，星期四【注意事项】1.破坏蛙的大脑和脊髓要彻底。2.经常给心脏滴加任氏液，以保持心脏适宜的环境。3.张力传感器与蛙心夹之间的丝线应保持适宜的紧张度。4.铜丝与心室接触良好的同时，还应尽量不让其阻碍心脏的自发收缩。第二十九页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验四心血管活动的神经体液调节1原理：心血管功能活动的稳定受神经及体液调节。2材料：家兔、采集系统、压力换能器、ＡＤ、Ach、

846。3方法：参照《动物生理学实验》和实验录像进行。４结果：见图。第三十页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验五呼吸运动的调节1原理：呼吸运动受内、外环境刺激的影响。2材料：家兔、采集系统、压力换能器、ＡＤ、Ach、

2%乳酸、CO2、“846”。3方法：参照《动物生理学实验》和实验录像进行。4结果：见图。第三十一页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验六离体小肠平滑肌的生理特性1原理：平滑肌具有特定的生理特性，对化学、温度和牵拉刺激非常敏感。2材料：家兔、采集系统、张力换能器、ＡＤ、Ach。3方法：参照《动物生理学实验》和实验录像进行。4结果：见图。第三十二页，共三十七页，编辑于2023年，星期四实验七影响尿生成的因素1原理：观察不同生理因素对动物尿液量的影响。2材料：家兔、垂体后叶素、10%NaCl、20%G.S、ＡＤ、Ach、“846”。3方法：参照《动物生理学实验》和实验录像进行。4结果：记录3min尿量。4.1正常尿量记录（3min）；4.2静脉注射0.9%NaCl20mL（37℃）；4.3静脉注射0.01%AD0.3～0.5mL；4.4