细胞工程专用设备

细胞工程专用设备第一页，共四十七页，编辑于2023年，星期三一、实验室设备３灭菌设备1）高压灭菌锅(autoclave)适用于耐高温高压（大约121摄氏度和1.1个大气压）的各种固体物质和溶液的灭菌；高压灭菌锅有多种规格和型号；有立式和卧式的不同；全自动和半自动和完全手工操作的不同。灭菌锅是利用高压蒸汽进行灭菌，因此，灭菌的彻底程度和压力、温度、额定温度和压力下的持续时间、灭菌材料的体积或容积、灭菌材料的传热性等都有关系。通常是在达到121摄氏度后保持15－20分钟进行灭菌。第二页，共四十七页，编辑于2023年，星期三卧式高压灭菌锅

双层结构，两层之间有总阀控制，可按需要将蒸汽放入消毒灭菌室或保持在夹套内，使灭菌物品干燥、预热和连续操作。

灭菌温度自动控制：适应各类物品灭菌需要，装有三档自动温度控制器。a：115℃（0.07MPa）b：121℃（0.11MPa）c：126℃（0.14MPa）

功率：15kw/380V、50Hz。灭菌室尺寸：600mmX600mmX1000mm

外形尺寸：500mmX810mmX1860mm。

产品净重：480kg

第三页，共四十七页，编辑于2023年，星期三卧式高压灭菌锅1)安全阀：当蒸气压力超过最高允许压力时，能自动起跳，释放超压蒸汽，确保安全。(2)压力表：灭菌室和夹套分别装有压力表，能同时显示灭菌室、夹套内蒸气压力(温度)。(3)温度表：灭菌室排放口装有水银温度表与控制箱装有指针式温度表各一只，能指示灭菌室温度，保证温度的准确性。(4)冷凝排放阀：能将灭菌室内的冷空气和冷凝水汽在灭菌过程中排出，确保灭菌效果。(5)压力式调压阀：能有效控制蒸汽源进入灭菌器，使压力恒定，确保压力和温度正确。(6)电磁阀：自动控制蒸汽源进入灭菌器，进行正常消毒灭菌。第四页，共四十七页，编辑于2023年，星期三培养基冷却第五页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第六页，共四十七页，编辑于2023年，星期三一、实验室设备2）干热灭菌箱(oven)适用于耐150-170摄氏度的各种不含水分的物质的灭菌；灭菌的彻底程度和时间和温度有关系:温度越高，所需要的时间越短：120度，3小时以上；140度，1个半小时；160度，半小时。纸张、棉布在超过170度时容易炭化变脆；化学纤维织布在超过120度时容易熔化或变形。第七页，共四十七页，编辑于2023年，星期三一、实验室设备3）射线辐射(radiation)适用于不耐高温的物质和物品，主要是塑料制品的灭菌；射线辐射灭菌需要有专门和受政府部门严格监管的辐照设备，操作人员也需要有上岗资格，因此，进行此项工作一般是委托进行。玻璃瓶经过辐照后会改变颜色。辐照灭菌的培养基和经过高温高压灭菌的培养基的培养效果有所不同。第八页，共四十七页，编辑于2023年，星期三一、实验室设备4）化学灭菌剂适用于植物材料的灭菌。常用的灭菌剂有次氯酸钠、次氯酸钙、氯化汞（升汞），通常的使用浓度依次为1-2%,4-5%和0.1-0.2%。灭菌时间一般为10—20分钟。次氯酸钠为黄色液体，不稳定，需要低温保存，质量下降的商品黄色变浅甚至没有颜色。氯化汞是剧毒药物，应该尽量少用。第九页，共四十七页，编辑于2023年，星期三一、实验室设备5）微孔滤膜过滤器(micro-poremembranefilter)适用于各种热不稳定的溶液的灭菌。

有两种不同形式的过滤器：注射器型的过滤器用于小量液体灭菌；抽滤瓶型过滤器用于较大量的液体灭菌。过滤器使用的过滤膜的微孔的孔径一般为0.22微米。过滤效率和孔径和孔密度有关。第十页，共四十七页，编辑于2023年，星期三其他灭菌方法灼烧熏蒸紫外光照射第十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期三二、无菌操作场所和设备1、无菌操作场所1）无菌操作室无菌室的建造要求严格，要求用紫外光灯灭菌后，能较长时间保持细菌密度很低状态。除出入口和通气口外应当密闭。通气口要安装具有能够过滤细菌的过滤网和压缩风扇,使操作室能够保持正的压力，确保外部空气只能经过过滤才能进入操作室。第十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期三二、无菌操作场所和设备1、无菌操作室

无菌室设内外二间，外间小些，为缓冲室，供工作人员换衣、鞋、口罩之用。内间要稍大些，接种和分注灭菌过的培养基等无菌操作时用，放置有工作台，放物台，小型离心机，真空抽气机等。内外间分别安装紫外光灯，操作前至少开灯二十分钟。室内定期用甲醛混合高锰酸钾熏蒸。

第十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期三2、无菌操作设备超净台(cleanbench)是目前使用最普遍的无菌操作设备，价格不高，无菌效果好，使用方便，操作人员舒适等优点。超净台放置在较清洁的房间内即可使用。接种规模较大时，最好开辟一间专用接种室，里面可放４－６张工作台，配２只放物架。接种室内壁应用涂上油漆等涂料以减少灰尘，延长超净台的寿命和增加无菌效果。室内也要安装紫外线灯，用后清扫，保持整洁。第十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期三超净工作台的工作原理是通过高压风机不断将空气过滤并使这些过滤过的空气从工作台面吹出，这样，工作台面上就能够保持没有细菌和真菌的洁净的工作环境。超净工作台有很多的生产厂家和规格型号，主要的差别有：需要三相或单相电源；单人用或双人用；单面或双面；过滤气体为平流或垂直；气体流量是否可调，等。第十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期三超净工作台洁净等级：100级@≥0.5μm(美联邦209E)平均风速：0.3～0.6m/s(可调)噪音：≤62dB(A)振动半峰值：≤3μm照度：≥300Lx电源：AC，单相，200V/50Hz最大能耗：0.4－0.８KW工作区尺寸：重量：100Kg－200Kg第十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期三三、培养设备

1、培养箱1）调温培养箱：供暗培养之用，即普通温箱；2）调温调湿培养箱：供暗培养之用，可防止培养基干枯；3）光照培养箱：供光照培养之用，用于植株分化培养和试管苗生长之用。光照培养箱也要求能够进行比较精密的温度控制；4）人工气候箱室：可以进行程序控制的全自动的调温调湿控光的人工气候装置。小的叫人工气候器，中的叫人工气候箱，大的叫做人工气候室。第十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期三光照培养箱具有光照功能的冷热恒温设备。结构特点：左右测装有相应功率的光源，在外门两侧镶有保温性和透光性良好的特种玻璃，以减少光源入射光的热量传人但能满足室内样品所需光照度，同时便于观察。温控采取集成线路，LED显示，并有限温保护。光照控制采用智能时间程序控制仪自动控制。加热系统采用加热元件。箱内气流循环选用微型轴流风机达到箱内温度均匀。第十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期三光照培养箱规格指标容积300立升光照强度0-10000LX分10级可调温度范围5-50℃温度波动性±1.5℃温度均匀性±2℃消耗功率加热器200W；压缩机232W；日光灯360W(最大)外形尺寸660×650×1750mm载物搁架475×540mm

第二十页，共四十七页，编辑于2023年，星期三三、培养设备

2、培养室

室内要求清洁干净，最好能保温和利用部分自然光，室内要有足够的电源。培养室内的设备主要应有：空调机，供升降温用；加热器，供加温用；温度控制器，供恒温用；定时器，供控制光照时间用；培养架，供放置培养瓶用，并要求有照明灯管；摇床供悬浮培养之用，有往复式和涡旋式的摇荡方式；日光灯供光照之用。

第二十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第二十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第二十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第二十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期三四、接种工具

1，镊子:

尖头镊子，适于解剖等精细操作的用途；枪形镊子，其腰部弯曲，适于转移外植体和培养物。2，剪刀:大小解剖剪和弯头剪，适于剪取材料。3，解剖刀:有活动和固定的两种。活动的可以更换刀片，适于分离培养物；固定的适于大外植体解剖。4，接种铲:用不锈钢片制成，可以比镊子更高效率地转移松散的愈伤组织。5，酒精灯:用于金属工具的灭菌和在火焰圈内进行无菌操作。

第二十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器三角瓶试管培养皿罐头瓶塑料袋其它第二十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器1三角瓶(Erlenmeyerflask)三角瓶的好处采光好，小的瓶口便于用各种材料封盖瓶口，有利于控制水分蒸发，保持培养基的含水量，同时，比较大的培养基表面可以进行植物组织的培养；小的瓶口可以减少污染，但太小时不利于培养操作。第二十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器2试管也是常用的培养容器。试管的培养基表面小，应在培养基还没有凝固前以一定的角度适当斜放，做成斜面培养基；试管容器的好处在于培养基的用量少，适用于进行多种培养基成分的比较和污染率高的初代外植体培养，试管同时还是滚动式液体培养的理想容器。第二十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器3培养皿（Petridish）具有大的培养表面，便于进行解剖显微镜观察和倒置显微镜的观察以及拍照，特别适宜原生质体和花药、花粉的培养。多个培养皿可以叠在一起存放，因此能够节省培养室的空间。缺点是容易污染以及需要特殊材料进行封口。实际上，培养皿最适用的是微生物培养，因为微生物增殖很快，培养周期短，没必要进行封口。在国外普遍使用一次性的塑料培养皿，是使用得比较多的培养容器。第二十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器

4罐头瓶(canbottle)现在可以买到配有可以进行高温高压灭菌的透明塑料盖的组培专用瓶子，特别适用于进行具有一定规模的种苗快繁生产。这种瓶子四面透光，水分保持好，价格低廉，强度也相对较好。但由于塑料盖瓶子不透气，容易积累乙烯或乙醇等植物代谢产物，对某些植物种的组织增殖和分化产生不同程度的抑制作用。第三十页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器5塑料袋透明轻便，不透气，不适用于愈伤组织等的继代，主要作为组培苗最后长根和出苗用。塑料袋采用封口机进行封口，最好是封口后袋子呈充气的肿胀状态，使袋子内有较大的空间。第三十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期三第三十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器6专用组培瓶这种新型容器采用高分子PC(俗称太空玻璃)为主要材料，辅以增韧剂、防老化剂、增塑剂等助剂进行合成，用中空成型及瓶口处理设备加工而成。该产品具有优良的机械物理性能异的冲击强度、无嗅、无味、无毒、耐寒耐热性良好，对酸碱类介质也较其他塑料稳定，尤其对油类介质稳定。在高压蒸汽灭菌条件下反复使用不破裂、不变形，成本低、寿命长、透光率高于玻璃容器，使用清洗方便，尤其符合机械化洗瓶要求。

第三十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器7微室培养器用于单细胞，原生质体以及原生质体融合后的杂种细胞的培养的特殊容器，有利于培养基中密度很低的细胞的生长以及原生质体融合后形成的杂种细胞的定位观察。第三十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器附：封口材料棉花塞：用于试管或三角瓶。通气性好，但不能够对容器口进行遮盖，常配合包头纸使用但还是容易污染；制作费工，蒸汽灭菌时容易进水甚至是脏水，影响培养基成分的准确性。铝箔：通气性差，但能够克服棉花塞的缺点。各类纸张：通气性可进行控制，具有铝箔的优点并避免了棉花塞的某些缺点。其他：各种塑料盖和塑料膜。有些能够透气但水分子不能通过，因此，培养基水分不会蒸发。第三十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期三五、培养容器附：封口材料选择原则第一是要保持无菌；第二是保持培养基水分。完全不透气可能不好，容易积累有害气体；太透气也不好，培养基水分蒸发太快会使培养基中各成分的浓度变得太高，不利于培养物的生长。生长速度特别慢，继代间隔时间长的植物材料的培养要选择保湿性好的封口材料。第三十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期三六、培养基灌装设备液体培养基自动搅拌定量灌装机，适合各种不同浓度的液体培养基的灌装．能够进行自动搅拌和均匀的定量灌装，解决了手动分装量不等和搅拌不均等的问题。

机体采用全不锈钢制作，容积桶特制成圆锥形，保证液体充分搅拌，而且能够完全灌装干净。有脚轮可随意移动位置，控制调节及操作板在正前面，一目了然，操作方便。

第三十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期三六、培养基灌装设备正反搅拌控制系统，能够自动搅拌，可根据液体性质进行正转、停、反转、停、正转来依次循环，进行时间和转速调节，保证悬浮液体中的悬浮物（琼脂，等）不会沉淀。定量灌装部分是由一台电动液体泵输送到到分装口，当需要灌装液体的空瓶触动分装口下方的磁性控制系统时流出液体，当设定量到时自动关闭出口，工作效率可达每分钟40次(根据灌装量不等可进行调节)。

第三十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期三六、培养基灌装设备规格和参数（列举）容积：40L

灌装量：20－60

mL，可调工作量：35mL/瓶20瓶/min

正反搅拌转速：可调，1、2、4、8、16/S

外型尺寸：710×560×710

电源：AC

220V

50Hz

功率：300W重量：38Kg第三十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期三培养基自动分装第四十页，共四十七页，编辑于2023年，星期三培养基分装第四十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期三培养基半自动分装第四十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期三七、洗瓶机冲洗盘孔数：12孔外形尺寸：1000×600×1000(厘米)洗瓶数(每分钟)：30只喷咀数：4只电机功率：0.18(千瓦)电源电压：220伏重量：70公斤(近似值)包装尺寸：120×80×120(厘米)毛重：120公斤第四十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期三八、观察和记录设备

1，立体解剖显微镜观察细胞，组织或器官的外部形态；2，透视显微镜通过切片观察组织和器官的内部情况;3，倒置式透视显微镜倒置式透视显微镜的光源在上方，用来观察一般透视显微镜不能观察的