蜈蚣药材的质量检测方法

蜈蚣药材的质量检测方法专利01专利背景附图说明发明内容技术领域目录03020405权利要求荣誉表彰实施方式目录0706基本信息《蜈蚣药材的质量检测方法》是鲁南制药集团股份有限公司于2015年7月13日申请的专利，该专利的公布号为CNB，授权公布日为2017年2月8日，发明人是张贵民、苏瑞强、刘武占。《蜈蚣药材的质量检测方法》公开了一种蜈蚣药材的质量检测方法，该方法以蜈蚣中3，8‑二羟基喹啉为指标成分，采用高效液相色谱法或薄层色谱法对蜈蚣药材进行质量检测。该发明技术方案首次将3，8‑二羟基喹啉作为蜈蚣药材质量检测的指标成分。该方法操作简便，条件可控，专属性强，稳定性和重现性好，可有效弥补中国药典中蜈蚣药材质量检测方法的不足，具有很强的实用性。2020年7月14日，《蜈蚣药材的质量检测方法》获得第二十一届中国专利奖优秀奖。（概述图为《蜈蚣药材的质量检测方法》摘要附图）专利背景专利背景蜈蚣为蜈蚣科动物少棘巨蜈蚣ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch的干燥体。春、夏二季捕捉，用竹片插入头尾，绷直，干燥。具有熄风镇痉，通络止痛，攻毒散结之功效，用于肝风内动，痉挛抽搐，小儿惊风，中风口歪半身不遂，破伤风，风湿顽痹，偏正头痛，疮疡，瘰疬，蛇虫咬伤。蜈蚣主要含组织胺样物质及溶血性蛋白质，此外尚含氨基酸、脂肪酸、胆固醇及微量元素（苗明三.现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2000：1055）。《中国药典》2010年版一部中蜈蚣的质量检测项目仅有性状、水分、总灰分、浸出物（国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].2010年版一部.化学工业出版社，2010：335-336），缺乏专属性强的薄层色谱鉴别或含量测定等质量检测项目，使得蜈蚣药材的质量难以得到有效地保证。中国国内有报道对蜈蚣中氨基酸类成分（吴刚.少棘蜈蚣研究[J].生物化学杂志，1992，24（11）：650）和组织胺（邓芳，方红.蜈蚣药材中毒性成分组织胺的含量测定[J].中草药，1997，28（8）：472）进行测定，氨基酸类成分及组织胺在多数动植物组织中广泛存在，此类成分专属性不强，难以有效检测蜈蚣的质量。韩国学者从蜈蚣中分离得到喹啉类化合物3，8-二羟基喹啉，具有抗肿瘤活性（Surk-SikMoon等.Jineol，aCytotoxicAlkaloidfromtheCentipedeScolopendrasubspinipes[J].Nat.Prod.1996，59:777-779），但未见以对蜈蚣中的3，8-二羟基喹啉为指标成分建立测定方法的报道。该发明人从蜈蚣中分离得到了3，8-二羟基喹啉，其为黄绿色粉末，以此成分作为蜈蚣的指标成分，首次建立了蜈蚣药材的质量检测方法。发明内容专利目的改善效果技术方案发明内容专利目的《蜈蚣药材的质量检测方法》的目的是提供一种蜈蚣药材的质量检测方法。该方法是以蜈蚣中的3，8-二羟基喹啉为指标成分，采用高效液相色谱法检测蜈蚣中指标性成分3，8-二羟基喹啉的重量百分比或用薄层色谱法鉴别蜈蚣中3，8-二羟基喹啉。

技术方案《蜈蚣药材的质量检测方法》技术方案以高效液相色谱法测定蜈蚣中的3，8-二羟基喹啉，包括下列步骤：1）对照品溶液制备：精密称取3，8-二羟基喹啉对照品，用甲醇溶解，配制成对照品溶液；2）供试品溶液的制备：取蜈蚣药材粉末，精密称定，加25倍量甲醇，称重，超声处理30分钟，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，作为供试品溶液；3）样品的测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，色谱条件：进样体积5微升；流速：0.6-1.0毫升/分钟；检测波长252纳米；柱温：35-50℃；流动相:甲醇-10毫摩尔/升磷酸二氢钾溶液＝28-36:72-64。优选地，步骤1）所述3，8-二羟基喹啉对照品浓度为0.00362毫克/毫升。优选地，步骤3）所述色谱条件为：进样体积5微升；流速：0.6毫升/分钟；检测波长：252纳米；柱温：40℃；流动相:甲醇-10毫摩尔/升磷酸二氢钾溶液＝28:64。《蜈蚣药材的质量检测方法》技术方案已薄层色谱法鉴别蜈蚣中3，8-二羟基喹啉，包括以下步骤：1）对照品溶液的制备：取3，8-二羟基喹啉对照品适量，加甲醇溶解，配制成浓度为0.1毫克/毫升-1.改善效果与2015年7月之前的技术比较，《蜈蚣药材的质量检测方法》蜈蚣药材的质量检测方法首次将3，8-二羟基喹啉作为蜈蚣药材质量检测的指标成分，采用高效液相色谱法和薄层色谱法对蜈蚣药材进行质量检测，操作简便，条件可控，专属性强，稳定性和重现性好，可有效弥补中国药典中蜈蚣药材质量检测方法的不足，具有很强的实用性。该发明技术方案也可为中药制剂中蜈蚣的质量检测提供参考。

附图说明附图说明图1是3，8-二羟基喹啉对照品的HPLC图；图2是蜈蚣药材的HPLC图，其中峰1是3，8-二羟基喹啉；图3是不同批次的蜈蚣的薄层色谱图。

技术领域技术领域《蜈蚣药材的质量检测方法》涉及一种蜈蚣药材的质量检测方法，属于中药领域。

权利要求权利要求1.一种蜈蚣药材的质量检测方法，其特征在于，该方法采用高效液相色谱法检测蜈蚣中指标性成分3，8-二羟基喹啉的重量百分比或采用薄层色谱法鉴别蜈蚣中3，8-二羟基喹啉；所述高效液相色谱法包括以下步骤：1）对照品溶液制备：精密称取3，8-二羟基喹啉对照品，用甲醇溶解，配制成对照品溶液；2）供试品溶液的制备：取蜈蚣药材粉末，精密称定，加25倍量甲醇，称重，超声处理30分钟，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，作为供试品溶液；3）样品的测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，色谱条件：进样体积5微升；流速：0.6-1.0毫升/分钟；检测波长252纳米；柱温：35-50℃；流动相:甲醇:10毫摩尔/升磷酸二氢钾溶液＝28-36:72-64；所述薄层色谱法包括以下步骤：1）对照品溶液的制备：取3，8-二羟基喹啉对照品适量，加甲醇溶解，配制成浓度为0.1毫克/毫升-1.实施方式实施方式实施例1蜈蚣药材质量检测方法1）对照品溶液的制备：精密称取3，8-二羟基喹啉，用甲醇溶解，配制成0.00362毫克/毫升的3，8-二羟基喹啉对照品溶液；2）供试品溶液的制备：取蜈蚣药材粉末1克，精密称定，加甲醇25毫升，称重，超声处理30分钟，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，作为供试品溶液；3）样品的测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，色谱条件：色谱柱：KromasilC18（4.6毫米×250毫米，5微米）流速：0.6毫升/分钟；检测波长252纳米；柱温：35℃；进样体积5微升；流动相:甲醇-10毫摩尔/升磷酸二氢钾＝28:64。4）标准曲线的绘制：精密吸取浓度为0.00362毫克/毫升的3，8-二羟基喹啉对照品溶液1微升、2微升、4微升、8微升、10微升、12微升，按上述色谱条件测定的峰面积，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程Y＝7774.301X-44.053，r＝9994，线性范围0.00362微克—