化妆品中无机砷的测定　液相色谱-原子荧光光谱法

化妆品中无机砷的测定液相色谱-原子荧光光谱法范围本标准规定了化妆品中无机砷含量的测定方法——液相色谱-原子荧光光谱法。本标准适用于液态、半固态等乳霜类和部分膏霜类化妆品中无机砷含量的测定。本方法检出限：无机砷0.02mg/kg。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理化妆品中无机砷经稀硝酸提取后，以液相色谱进行分离，分离后的目标化合物在酸性环境下与还原剂反应，生成气态砷化合物，以原子荧光光谱仪进行测定。按保留时间定性，外标法定量。试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂磷酸氢二铵。硼氢化钾。氢氧化钾。硝酸。盐酸。甲酸。正己烷。试剂配制流动相（15mmol/L磷酸氢二铵溶液）：称取1.98g磷酸氢二铵，溶于1000mL水中，以甲酸调节pH至6.0，经0.45μm水系滤膜过滤后，于超声水浴中超声脱气30min，现配现用。盐酸溶液[10%（v/v）]：量取100mL盐酸，溶于水并稀释至1000mL。硝酸溶液[20%（v/v）]：量取200mL硝酸，溶于水并稀释至1000mL。硝酸溶液[1%（v/v）]：量取10mL硝酸，溶于水并稀释至1000mL。氢氧化钾溶液（100g/L）：称取100g氢氧化钾，溶于水并稀释至1000mL。氢氧化钾溶液（5g/L）：称取5g氢氧化钾，溶于水并稀释至1000mL。硼氢化钾溶液（30g/L）：称取30g硼氢化钾，用5g/L氢氧化钾溶液溶解并定容至1000mL。现配现用。标准品三氧化二砷（CAS号：1327-53-3），纯度不低于99.0%。砷酸二氢钾（CAS号：7784-41-0），纯度不低于99.0%。标准溶液配制亚砷酸盐[As（Ⅲ）]标准储备液（100mg/L，以As计））：准确称取三氧化二砷0.0132g，加100g/L氢氧化钾溶液（4.2.5）1mL和少量水溶解，转入100mL容量瓶中，加入适量盐酸调整其酸度近中性，加水稀释至刻度。4℃保存，保存期一年。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。砷酸盐[As（V）]标准储备液（100mg/L，以As计）：准确称取砷酸二氢钾0.0240g，水溶解，转入100mL容量瓶中并用水稀释至刻度。4℃保存，保存期一年。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。As（Ⅲ）、As（V）混合标准使用液（1.00mg/L，以As计）：分別准确吸取1.0mLAs（Ⅲ）标准储备液（4.4.1）、1.0mLAs（V）标准储备液（4.4.2）于100ml容量瓶中，加水稀释并定容至刻度。现配现用。As（Ⅲ）、As（V）混合标准系列溶液：取6支10mL容量瓶，分别准确加入1.00mg/L混合标准使用液（4.4.3）0.00mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.50mL和1.0mL，加水稀释至刻度，此标准系列溶液的浓度分别为0.0μg/L、10μg/L、20μg/L、30μg/L、50μg/L和100μg/L。现配现用。材料有机相微孔滤膜：0.45μm。水系微孔滤膜：0.45μm。塑料离心管：50mL。仪器和设备液相色谱-原子荧光光谱联用仪（LC-AFS）：由液相色谱仪与原子荧光光谱仪组成。分析天平：感量分别为1mg和0.1mg。恒温超声波提取机（常温～90℃）。涡旋混合器。离心机：转速不低于6000r/min。pH计：精度为0.01。玻璃器皿使用前经硝酸（4.2.3）浸泡24h后，清洗、晾干后备用。试验步骤试样提取液态化妆品称取试样1.0g（精确至0.1mg），置于50mL具塞离心管中，准确加入20.00mL硝酸溶液（4.2.4），涡旋混合均匀，浸提12h后，于90℃超声提取2.5h。提取完毕，取出冷却至室温，6000r/min离心15min，取上清液经0.45μm有机滤膜（4.5.1）过滤后上机测定。同时作空白试验。乳、膏霜类化妆品称取试样1.0g（精确至0.1mg），置于50mL具塞离心管中，准确加入20.00mL硝酸溶液（4.2.4），涡旋混合均匀，浸提12h后，于90℃超声提取2.5h。提取完毕取出，冷却至室温，6000r/min离心15min。取5mL上清液置于离心管中，加入5mL正己烷（4.1.7），振荡1min后6000r/min离心15min，弃去上层正己烷。按此过程重复一次。吸取下层清液经0.45μm有机滤膜（4.5.1）过滤后进行测定。同时作空白试验。液相色谱参考条件色谱柱：阴离子交换色谱柱，250mm×4.6mm（i.d.），或性能相当者。阴离子交换色谱保护柱，250mm×4.6mm（i.d.），或性能相当者。流动相：磷酸氢二铵溶液（4.2.1）。流速：1.0mL/min。柱温：常温。进样体积：20μL。原子荧光检测参考条件负高压：320V。砷灯总电流90mA；主电流辅助电流：55/35。原子化器炉温：200℃。载气流速：400mL/min。辅助气流速：400mL/min。载液：20%盐酸溶掖，流速4mL/min。还原剂：30g/L硼氢化钾溶液，流速4mL/min。测定分别上机测定标准系列溶液和试样溶液。试样溶液与标准溶液中As（Ⅲ）、As（V）的保留时间相对偏差在±2.5%之内，As（Ⅲ）、As（V）标准溶液图谱参见附录A。以As（Ⅲ）、As（V）的浓度为横坐标，以其响应值（峰面积）为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线相关系数不低于0.997。As（Ⅲ）、As（V）的响应值应在标准工作曲线测定的线性范围内。如超出线性范围，应稀释（n倍）后，重新进样分析。As（Ⅲ）、As（V）含量的加和为总无机砷含量，平行测定次数不少于两次。试样数据处理试样中无机砷含量以质量分数计，数值以毫克每千克（mg/kg）表示，多点校准按式（1）计算： （SEQ标准自动公式\*ARABIC1）式中：X——试样中无机砷的含量（以As计），单位为毫克每千克（mg/kg）；C——测定溶液中无机砷化合物浓度，单位为微克每升（μg/L）；C0——空白溶液中无机砷化合物浓度，单位为微克每升（μg/L）；V——提取液的体积，单位为毫升（mL）；m——试样的质量，单位为克（g）；n——上机测定的试样溶液超出线性范围后，进一步稀释的倍数。总无机砷含量为As（Ⅲ）含量与As（V）含量的加