多残方法测定蔬菜样品中农药含量的气相串联质谱

多残方法测定蔬菜样品中农药含量的气相串联质谱分析关键词:气相色谱农药残留多残方法蔬菜综述:一种进行对新鲜蔬菜中30多级中农药残留检测，量化，并确认的气相色谱串联质谱（GC-MS-MS技术）的方法已发展。电离的最佳模式有电子碰撞（EI-MS/MS）或化学电离（CI-MS-MS技术），用于不同类别的农药在一个单一环境中的运行。农药残留是用二氯甲烷从蔬菜中提取的。当被测样品使用顶空进样法直接注射10ul而不通过前处理回收效率可以达到70-119％，所有化合物在两个不同回收率研究中相对标准偏差<16.9％。化合物的最低检出限是30ng/kg-6ug/kg。该方法适用于温室蔬菜中常规农药分析（Almeria，西班牙）导言:，因为农药被大量应用于农作物，所以检测食品中农药是一个重要的问题。控制农药在食品中尤其是在新鲜蔬菜中的残留是一个生产者越来越关心的问题，消费者和政府都要对潜在的风险负责。许多政府和国际组织建立了食品中农药最高残留限制度。适量的使用农药是无可厚非的，所以要定期的检测食品中的农药残留。为此，有必要建立监测程序来保护消费者并且评估食品的质量。蔬菜中存在的干扰植物可能会对用于监测农药残留的目标化合物的信号产生掩蔽。这种分析方法较难分析农药在蔬菜中有较大浓度差的情况，更难的是，蔬菜基质成分和农药有较大浓度差。气相色谱（GC）的选择性探测器显示了其测定农药残留的能力，但前提是必须通过质谱(MS)这一个实验室中的必备工具提供明确的结果，甚至定量的测定农药残留。然而，现在更加流行用气相色谱串联质谱(GC-MS-MS)来测定蔬菜中的农药残留。它在复杂的分析中可以实现高灵敏度和高选择性，并且它不丧失识别功能。许多的实验室都在一个合适的价格下开始接受离子阱串联质谱要归功于它使用电子冲击(EI)和化学电离(CI)对大多数的农药都有一个大范围的可探测波段。另一方面，对于样品前处理，最常规分析实验室倾向于使用有机溶剂萃取法从蔬菜中萃取农药是因为化合物有广泛的极性并且其操作简单、速度快和回收率高。然而，他们一般需要一个清洗步骤以减少误差这个过程浪费了时间和金钱并且增加了实验的不确定度。这种清洗步骤将包括潜高峰期重叠和频繁的清洗仪器。当然，使用特定技术，减少样品基质进入柱和检测器，如使用顶空进样，加上选择性的MS/MS法，可避免的必要性清理步骤，使方法更适合实验室常规分析农药残留。本实验描述了气相色谱串联质谱使用不同的电子碰撞（EI-MS/MS）和化学电离（CI-MS-MS）方法检测并确定确定30多类农药的新鲜蔬菜。该方法已成功应用到大约8000新鲜植物实际样品检测中（Almeria，西班牙）。实验试剂：农药标准品和咖啡因（内部标准，IS）经过Ehrenstorfer博士（德国）进行纯度鉴定。二氯甲烷，环己烷，丙酮，甲醇（用于分析农药残留）来自Scharlau（西班牙）。已有解决方案是在丙酮中浓缩农药到75-550mg/L并存放在-30℃的低温环境，正在使用的方法是用适量的环己烷稀释并储存在-4℃无水硫酸钠中以待分析使用仪器：saturn2000GC-MS（瓦里安公司美国）该气相色谱仪（型号CP-3800）装有8200自动取样器（100ul注射器），分裂分流程序升温注射器1079，大容量注射模式和电子流量控制（EFC）系统。一个熔硅制成未经使用的毛细管柱2mx0.25mm（美国）作为备用柱连接到一个DB–5ms（30mx0.25mmi.d.x0.25um）的分析柱。离子阱电极加入SilChrom涂层以减少化学反应。质谱仪是使用EI和CI模式而串联质谱选择启用。根据我们的实验条件专门设立了一个目标组分质谱图库。此外，其他质谱图库提供的图谱也可以访问。使用的载气是氦气。一个断路器（HamiltonBeach美国），一个PolytronPT2100（Kinematica公司瑞士），一台旋转蒸发仪R-114（Biichi，Flawil，瑞士）用于加工蔬菜样本样品收集和储存：新鲜蔬菜按照79/700/CEE指令进行抽样和运输后，存放在4℃直到在24小时之内用于提取和分析，以避免出现稳定问题。提取工艺：将两公斤蔬菜样本切碎。准确称取50克到烧杯并用105mL二氯甲苯提取2分钟。加入80g无水硫酸钠。静置2分钟，然后用一个12cm的布氏漏斗过滤，再用滤纸和无水硫酸钠过滤一遍。滤液收集在一个圆底烧瓶中。溶剂在旋转蒸发仪上转干（水沐浴在35-40℃）。干燥物用5毫升环己烷重新溶解。取1毫升样品放入2毫升进样瓶中并加入50ul标准溶液（20mg/Kg）。用正己烷定容到2ml备用仪器条件：在进样口打开的情况下用'sandwich'注射技术注射10ul样品到气相色谱中。在0.5min的时候关闭，然后在3.5min的时候再次打开。载气压力设置在8psi（保持26min），以2psi/min的速度从8psi减少到6psi（保持13min），然后以3psi/min的速度增大到9psi（保持15.1min）。注射器温度设定为以100℃/min的速度从70℃（保持0.5min）升温到300℃（保持10min）。柱温修正为以50℃/min的速度从70℃（保持3.5min）升温到150℃，然后以5℃/min的速度升温到180℃（保持5min），接着以4℃/min的速度升温到205℃（保持5min），最后以4℃/min的速度升温到300℃（保持5min）。质谱仪要每周校准一次。所有的化合物利用非共振波的模式进行分析。电离模式（EI或CI）按照被分析物设定。两种模式电压都设定为1700V乘数补偿，+200;trap，多种传输线的温度分别为200℃，50℃和280℃;自动增益控制（AGC）打开。对于CI模式发射电流设置为30uA，自动增益控制电离扫描时间为100usec,自动增益控制目标值为2000，独立窗口5。在EI模式下，这些数值分别是80uA，1500usec，5000。在酶联模式这些价值分别为80剂，1500psec，独立窗口3.对每个分析物都用特定的ms/ms分析。表一为每个样品列出了具体的质谱。针结果拨与讨鬼论仗季迅酸熔气相亦色谱秤串联套质谱治工具稍变量搅该气辨相色尊谱色墙谱条苏件进忍行了以优化板，以杀单独背的农板药进蜻行监榆测。止第一偏个标桑准的兽混合冬物以贴不同盘温度圈和气蹄体流脉量的丛程序传进行属测试桂。为早了提蒸高灵截敏度疮，用龟10喂ul希的常录规注把射器冰。一叠个有什机塞鲜子被控插在胁了注裹射段喉，以积减少淡通过望分析静柱和鞠检测友器的坛弄药挣量。测对于姐质谱猴检测导器，约自动山增益焦控制肠（辰AG婆C彩）通务常是肚用目鞋标离谅子来哨填充翠离子晚阱来啦优化醉灵敏扁度。马优化岂到C津I模伞式达梨到2市00器0的对和E惩I模腾式达根到5夕00裂0。抗更大省的价雾值在败于每裹一种矮情况蒸下都格可能蔬导致慌储存箩目标立离子哀信号犁间的偏静电摆相互猪作用路。一笋般来壳说，束母公谋司离漠子被梢选定骄为最灰高分腥子量球的最搞高强汤度。格所有涉化合戏物都逼选定朗为非兔共振栋波的屑形式桐（碰拥撞诱壮导解朝离，搅CI风D）村。优猛化其缘余母蹦离子涂CI颠D参千数产胃生的歼MS批-挽MS愁谱在献10拌至3见0饼％巡之间午。大图多数斜情况傻下选伐择量湖化以知获得晚的高佩峰值蛮，除族了一尚些组搬分提帮产生税的顶疼峰（绪h王ep虑te涝no匆fo符s抖）或摧主要哄离子稀是一日组（丢α委-塔硫丹闷）泻。伴图呀1秘是系α只-硫养丹的渠一组匀串联竭质谱嗓图谱炊。图肥2是俊一个俭黄瓜似试样蜜中所拾有成僻分的预图谱踩。图穷3疮是甲辱胺磷酱在C拌I和富EI合模式灵下的管响应你值对途比图柔。粒提取专变量修二氯场甲烷温萃取哑是一势个有迹效、阀简单谱的方崖法，拥对大裕多数醉化合座物都博有良落好的王回收于率扶。对她比较假脏的眯试样鼓比如画蔬菜天建议疮先通剖过清芦洗步死骤在荣进行泼分析骆，特辫别是萄使用涨大容扩量注赖射。像这是初必要煎的，轮因为霸存在筒的干文扰物豪质可皇能与拦目标怖分析蹈物共楼同洗洗脱并照污染纠分析神系统终。描但是臭，干臂扰问得题可揭以通坟过有碰机分施离小屠柱和绿每周乱更换厕防御床柱来风解决屠。这旅样，姻样品跨处理坡会更婆简单舌，速肺度更胃快而茂且更混便宜沉。它想每天句都可宽以进抚行一争些样集品分范析，劈这对啄一个错常规胖的分挺析实朵验室块来说句是非丢常重好要的炸。姻确认怠方法领鉴定目目标砌样品旁保留糕时间域窗口国（址RT宇W父）被拣定义崖为从秘每个狡混合雪物的歼10曲个空率白样马品的果第二叼校准碰线补±培10吃标准状偏差记的平阶均保原留时蚁间（锁见表揪二）蛋。投量化敞目标安离子奏仪器恰的校尚准是洽通过覆注射框在三竞个不折同的峡浓度丸水平补下提支取的定农药兼空白敢样品锹（见筹表二脱）蛮。农必药的扛响应币值的骡线性无关系照是通零过测毕量相锣对于掉内标物的面第积来颤研究吨。用梅内标么与外伏标进罪行对硬比并臭且原星点（乞0.堂0）第包括外在线圾性回腿归曲节线内逼可以优获得谅更好深的量锹化结抄果。长在所签有情挥况下副基峰极由量抵的多秘少决引定。涛当R愿2戏>永0.话9校遭准曲骨线被经视为暮是有殊效的狼。对涉于所仇有的因农药上，良矩好的站仪器秀响应阴值线咬性关阴系的浊反应恩浓度赶区间蛮如表怕二所血示，闭所有拼情况龙下确显定系询数>迎0.亭98伟4。蛇被建麦议的粘方法径的效仙率由娃了评鞠价未菌被污犹染的抹黄瓜惨在两脆种不级同的功浓度新曲线煮下的啄农药添回收微率来逝研究锅（n脆=1泡0）骗（见跑表三川）仁。平询均回钱收率碑数据聪和相炎对标剥准偏虏差（布RS贫D性％躺）也察于表例三显搂示。丧回收材率在凝70桑％至找12负0护％表碑明假描定的或方法刮是有继效的忙。所胞有化植合物套在有先效的厕时间比区间算。隐在所牙有情律况下识RS姓D<遍16欣.9忧％。续10荒个已乏萃取辽并进捞样的绵蔬菜现空白波样品士的色下谱信劣号被片IU摩PA刘C推症荐为委鉴定围（L港ED贸）和猫定量岭(L团OD碍)的及方法方。结察果列洲于表流三。霞目标征离子形鉴定咏要确隔定一晚个实址际样斧品中豆先前船鉴定解的混休合物燃是通淋过样必品的维串联英质谱腰图谱誓和以政前的诚参考丸普进女行对叨比来清确认习。参洲考光谷谱是肚通过跃每天敬注射息的空俩白黄尊瓜样右品中隙农药须浓度技的第示二个岭校准蜡点来子获得府并保侦存的仆。对桃比结消果（扒FI惭T）细扩展预到1抱00丘0的手最佳亲匹配重（相追同的姿光谱捉）。嘉FI术T的列价值盲必须狼通过册>a辣FI清T对桨于每剩一个蒜混合那物开亿始细抄节被干定义思为F漫IT逃平均疤-2钱50青来得膀到。钳FI沫T的冤平均画值是跪通过怠注射歼10耍个无矮污染眼的黄聋瓜样坟品对库比混败合农卷药的暴第二粱校准新线来烘得到滤。表桂三列陪出了丢每一主个混卫合物妈的临粉界值状。墨样品含的质锻量标绪准常鲁规分颜析良为了颗保证贪在常仔规分伐析中糠所取订得的揭成果疫的质误量，闻一些站质量袖标准膏也已浩确定拥。对众于这那一点统，空规白的率提取合物，笑一个峰空白摘样品筛提取烦添加颠浓度究的第键二次藏校准识水平说，校叹准曲给线每躺天都亚在处让理同合一套跳样品蛛。空嫩白提刘取避丧免由赠于污黑染可西能在摩提取属过程吧或试刚剂使撇用造心成的例假阳方性。携无信签号检狡测应防该在披目标碑分析摇物的圈保留票时间毁内。修用空挣白样景品校源正提保取程损序的拖效率穴和帮候助检著测辉由于元提取泉不当矛或仪辽器原贞因造弯成的童问题大。当晋一个睡被测晴样品攀有确稠定的要波谱研，就辅能推姑得这条个被俩分析缸样品康的较戏好的窜结果仔。当榴结果角是阴咱性或陶低于乱第一毫校准森点，魂它们制可被漂加工责时加顷样回拒收率拿为6晌0％帜-奋13挖0滥％脖。校辱准曲岩线是术用来金检查朵的浓羡度的方线性傻工作是范围计，以猫避免枕由于缎基质取效应率或仪清器的嗓问题负导致草的量骂化错晒误。念表四昌总结暴的资遍料是恋参数洁和骂标准价审定潮通过袄的方耍法和宣常规黄分析肃质量流标准己。方方法睛的使图用绵接近星80涉00电种不邪同的母新鲜骂蔬菜行样品荷（绿匠豆，侨黄瓜晴，辣大椒，描番茄培，茄踢子，然西