微生物常规鉴定技术2

微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察１、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。，以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。１）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。革兰氏染色:惧革兰事氏染毒色法薄是1阀88膛4年题由丹怜麦病跑理学痒家猎C.横Gr正am焰所创责立的塞。革置兰氏古染色危法可寿将所核有的朝细菌伟区分筋为革轧兰氏吧阳性滴菌（坏G锦+后）和革革兰肠氏总阴性乌菌（纯G捞—闹）两亿大类合，是宪细菌悬学上柔最常视用的慌鉴别街染色搞法。患该染郑色法付所以联能将棕细菌南分为亡G臂+皆菌和杠G除—污菌鸟，是选由这密两类彩菌的番细胞呀壁结颠构和开成分煎的不饰同所需决定敢的。脚G毒—伶菌的阿细胞迫壁中喂含有五较多巡易被案乙醇答溶解泊的类封脂质关，而纺且竹肽朋聚糖沸层较峰薄、穗交联坛度低铃，故碍用乙途醇或绣丙酮紫脱色素时溶幼解了甩类脂喜质，袜增加碗了细幼胞壁寒的通条透性禾，使赛初染遍的结弦晶紫毙和标碘的赵复合任物易勾于渗欲出，众结果神细菌究就被寨脱色事，再清经据蕃红琴复独染后绪就成匹红色筋。G欣+汁菌细脱胞壁醒中肽每聚糖皆层厚制且交笼联度觉高，壶类脂鞠质含胃量少岗，经便脱色过剂处冬理后秆反而促使肽薪聚糖病层的域孔径大缩小葵，通疤透性恼降低侨，因统此细达菌仍命保留泊初染检时的猴颜色土步骤文：快（1肆）涂邪片：守涂片宜方法钩与简宇单染表色涂世片相耕同。教（2柏）晾拜干：静与简学单染周色法蛇相同较。肿（3茎）固晴定，海与简贵单染笨色法模相同胶（4沙）结跪晶紫仁色染息色：弃将睬玻赛片置雪于废分液缸墙玻灭片搁彻架上浓，加剑适量冲（以沿盖满叉细菌谢涂面排）的疮结晶祥紫染横色液涝染色销1分完钟。造（5收）水喘洗：懒倾去饭染色墙液，姜用水枪小心掌地冲符洗。话（6弊）缴媒染减：小滴加季卢哥赖氏碘境液，搜媒染关1m宇in浓。被（7汉）水咸洗：搏用水醉洗艰去碘铺液窝。止（8帐）脱房色：靠将企玻奖片倾鹊斜，版连续砍滴加功95庸%乙阀醇脱溜色2修0—秋25逃s至躲流出喉液无水色，朗立即斯水洗堪。音（9肃）踪复染甩：滴浊加醋蕃红诊复染患5m忌in当。尊（1胜0）跪水洗昂：用专水洗潮去涂因片上美的维蕃属红染剃色液桶。幸（1岸1）胶晾干减：怜将染据好的皇涂片掀放空珍气中捏晾干细或者迫用吸齿水纸汗吸干咸。逝（1趣2）养镜检窗：镜纽检时姜先用依低巴倍精，再好用高物倍，茎最后牺用油倘镜观浑察，手并判亏断菌蚂体的觉革兰净氏染嘴色反精应性很。台（1个3）乡实验族完毕姿后的阁处理饥：依①斧将浸箱过怠油的煌镜头娱按下嫂述方章法擦祝拭干创净，蚁a.剑先用该擦镜区纸将燃油镜剪头上马的油暗擦去暖。b咏.用绑擦镜喉纸沾疤少许拢二甲弄苯将牛镜头脆擦2珠—3咳次。去c.励再用循干净蛋的筛擦镜吃纸将柿镜头齿擦2糊—3虹次。贪注意生擦镜砌头时艇向一仰个方压向擦奴拭。且②看所后的南染色钉玻荒片用弟废纸疗将香牌柏油压擦干缺As撞ep哭ti狭c脚te福ch叉ni竞qu筛e殿:音St扑re雨ak别p饲la刑te界:PourplatePourplateSpreadplateSpreadplate邪二、瞒生理敏生化深试验蔑闯微生界物生烈化反律应是柱指用秀化学漏反应降来测商定微食生物疑的代抢谢产熔物，泰生化旋反应私常用谨来鉴肾别一氧些在初形态自和其扣它方曾面不首易区总别的诸微生鸭物。刺因此兼微生类物生钢化反盏应是配微生顾物分客类鉴妹定中陕的重成要依味据之烛一。绢微生涝物检勾验中尝常用樱的生考化反所应有门：土1、长尿素谢酶（裂Ur毙ea蔑se攀）试恢验鸡烟有些吹细菌份能产至生尿淹素酶竞，将体尿素级分解确、产弦生龟2枯个分赤子的印氨，座使培此养基础变为歉碱性捧，酚伸红呈摔粉红培色。棕尿素震酶不杆是诱严导酶弃，因串为不漂论底尚物尿辣素是云否存驰在，厕细菌卷均能坑合成殖此酶糖。其准活性委最适烫pH雕为著7.兆0极。停裁试验钢方法自：挑呼取腊18美~2铅4h柿待试毅菌培嫂养物卸大量域接种拦于液蜻体培费养基赚管中躁，摇昼均，续于偏36产±码1袍℃蚀培养惊10斤，橡60蒸和邪12棚0m仆in臂，分授别观泄察结洗果。乐或涂咬布并尤穿刺跪接种后于琼确脂斜圆面，内不要洽到达辈底部仙，留峡底部疲作变糠色对痒照。泰培养勉2宿，悼4芒和妨24株h烤分别周观察盛结果萝，如郊阴性击应继寸续培采养至冷4搜天，稍作最络终判宣定，悟变为骆粉红办色为蚀阳性尝。枕2、挠氧化据酶（机Ox顾id落as背e绳）试击验日迎氧化凝酶亦扰即细枣胞色稠素氧求化酶肃，为苦细胞折色素电呼吸霸酶系浪统的柿终末盐呼吸刘酶，非氧化狐酶先投使细限胞色别素捧C集氧化设，然鬼后此寸氧化叶型细乘胞色袄素绑C互再使幸对苯炉二胺扑氧化孟，产萄生颜雷色反冻应。冠试验宝方法我：在锄琼脂率斜面殊培养傍物上泻或血豆琼脂渐平板玉菌落盘上滴妨加试唱剂瓶1~突2批滴，怀阳性宴者导Ko依va圾cs严氏试筋剂呈呆粉红浅色沸~膛深紫扣色，黄Ew箩in撤g抗氏改伶进试路剂呈蔽蓝色箱。阴迎性者作无颜双色改资变。伤应在嫩数分峰钟内拨判定贷试验寺结果宪。变注意案事项餐：吊盐酸崭二甲故基对妄苯撑筹二胺修溶液题容易全氧化含，溶话液应予装在劈棕色闸瓶中指，并棍在冰傍箱内依保存贸，如帐溶液移变为西红褐去色，先即不怀宜使弟用。渡铁、汁镍铬胖丝等向金属习可催的化二团甲基游对苯渔撑二提胺呈访红色版反应般，若诚用它物来挑昼取菌览苔，夏会出耻现假恐阳性胁，故赚必须大用白坐金丝浇或玻炒璃棒莲（或策牙签绕）来毒挑取袖菌苔牌。菜在滤煤纸上息滴加握试剂另，以水刚刚策打湿林滤纸区为宜帜，如栗滤纸菌过湿车，会列防碍摩空气有与菌境苔接命触，歼从而绞延长醋了反筋应时氏间，武造成弊假阴挡性。制3、乳过氧观化氢被酶的斜测定里过氧刘化氢链酶又虑称接浴触酶宪，能身催化浸过氧趣化氢丘分解滔水和隐氧。忧试剂各：3列－1润0％硬过氧南化氢链（H铃2喉O以2树）垃菌种冈培养只：将月测试打菌种侦接种祖于合嚷适的水培养粮基斜芳面上圾，适刚温培萝养1同8－畅24跑h。笛试验外方法牧：取裕一干艰净的惯载波叛片，重在上隆面滴南1滴裂3－表10邻％的臭H掀2驳O什2计，挑朽取1湖环培饼养1赛8－冶24玻h的绿菌苔渴，在厚H询2假O绕2章溶液培中涂聚抹，呀若有师气泡碧（氧刮气）洁出现狐，则捉为过脉氧化配氢酶忧阳性牺，无桥气泡劳者为象阴性怜。也坏可将遭过氧史化氢甩溶液绞直接玩加入遍斜面勤上，千观察竟气泡侄的产循生。辛注意煎事项监：过篮氧化疯氢酶却是1巴种以矩正铁杯血红挑素作预为辅平基的软酶，择所以吃测试牵菌所痰生长槽的培紫养基孙不可阀含有固血红跪素或刻红血毙球。酿4、声甲基并红（甘Me弊th炉yl崭R廉ed花）试喂验婶捕肠杆纲菌科炕各菌介属都锄能发备酵葡竹萄糖告，在深分解晕葡萄嫂糖过茎程中慧产生醒丙酮疾酸，讽进一助步分迁解中扫，由吐于糖归代谢语的途缸径不来同，煌可产额生乳假酸，业琥珀辨酸、喘醋酸倘和甲孙酸等睬大量纳酸性虎产物令，可劲使培缎养基该PH注值下共降至剖pH缘4.侨5展以下腿，使召甲基亭红指桶示剂吼变红驻。改豪试验阴方法耕：挑好取新毒的待设试纯警培养注物少兴许，吸接种园于M取R－啦VP致生化毕鉴定燃管，牵于3救6通神用培挽养基忘，培球养于裁36店±安1搏°沉C持或宪30礼°旨C萝（以政30笼°宗C或较好蜓）亦3~刃5裳天，秤从第搬二天句起，渣每日担取培默养液次1m渡l填，加仰甲基取红指嗽示剂欲1~斗2也滴，斩阳性恢呈鲜凯红色征，弱枯阳性边呈淡贼红色佛，阴灿性为澡黄色统。迄妖至发简现阳驶性或警至第当5量天仍倡为阴免性、脑即可尿判定犬结果纸。陆斜甲基速红为泉酸性究指示奴剂，霸pH渐范围钢为台4.焦4~蝴6.滋0揪，其失pK拍值为冠5.径0欠。故领在咏pH县5.聪0狱以下僵，随糕酸度淡而增损强黄曾色，糠在宗pH乐5.指0有以上酿，则艺随碱挤度而出增强个黄色街，在奸pH奥5.铜0拍或上侨下接贝近时捉，可房能变以色不蝇够明棕显，拌此时祝应延怜长培候养时护间，情重复日试验秧。璃5、巷V-懂P钟试验迁惑某些厘细菌辣在葡宰萄糖雨蛋白类胨水沙培养习基中渠能分题解葡简萄糖园产生饥丙酮晕酸，芦丙酮情酸缩竖合，晒脱羧弹成乙愚酰甲慢基甲报醇，蜘后者歪在强职碱环恋境下哲，被四空气鬼中氧层氧化况为二骨乙酰识，二因乙酰熔与蛋地白胨盏中的脂胍基喜生成哄红色柏化合点物，供称槐V左－破P谊（骨+仔）反喷应。牺危试验响方法军：限刮１）蛙O液’像Me浓ar农a砍氏法抽：将装试验马菌接畜种于黑通用恐培养饱基，穿于桑36蹈±痰1泼°音C寺培养否48处h镰，培蝶养液劲1m拉l唱加懒O拳’展Me岭ar即a渐试剂挠（加滚有淹0.略3%虾肌酸由Cr跟ea渐ti想ne级或肌剩酸酐订Cr缓ea锣ti划ni训ne草的盏40孕%待氢氧肌化钠剩水溶虚液）看1m桌l己，摇饭动试枣管末1~勒2m块in南，静幕置于降室温迎或排36棉±封1咸°前C五恒温宏箱，月若蜓4h哈内不娇呈现抵伊红晃、即凤判定乏为阴杯性。粮亦有储主张优在肌48笼~5桥0炼°同C演水浴牺放置滩2h水后判摧定结与果者良。导窑２）翁Ba钱rr绍it诵t勤氏法盏：将滚试验集菌接秤种于达通用颜培养债基，族于触36厦±压1技°围C饼培养恼4根天、凡培养升液鲜2.谜5m锄l起先加犬入搜5刷°关C研α霞萘酚里（比2-患na但-p拖ht挠ho球l全）纯醋酒精亲溶液议0.检6m羽l,聚再加装40啄%冈氢氧滋化钾召水溶孩液妄0.嚷2m家l规，摇菠动雾2~灵5m足in世，阳喜性菌有常立旷即呈宰现红储色，涝若无偶红色重出现全，静仓置于固室温扑或偏36桃±恳1昆°徒C舰恒温它箱，集如册2h宫内仍贺不显参现红地色、铺可判粮定为惨阴性约。晕锤３）顾快速然法：足将卸0.授5%努肌酸封溶液容2炊滴放卵于小茶试管立中、扒挑取妈产酸爷反应脏的三准糖铁议琼脂碌斜面践培养表物一孟接种码环，湿乳化斧接种驶于其便中，弄加入聪5%才α耳-霉萘酚程3乏滴，复40秆%逃氢氧划化钠嗽水溶亚液记2尽滴，自振动颂后放购置狭5m古in款，判拼定结让果。秃不产球酸的身培养怖物不膜能使仗用。怒本试垒验一孙般用经于肠道杆菌度科各样菌属酱的鉴梁别。宅在用超于芽汽胞杆晓菌和摄葡萄泉球菌唱等其辩它细证菌时如，通跨用培追养基筑中的何磷酸纷盐可嗓阻碍率乙酰判甲基浇醇的芝产生脊，故邻应省来去或休以氯帐化钠险代替纲。参6、豪含碳疑化合眨物的乳利用塞细菌蹈能否窗利用伤某些瞧含碳电化合骆物作凤为唯废一碳弦源，族反映遗该菌牢是否帜产生桐代谢咬这种殊化合产物的捞有关凭酶系肺，因降而作容为鉴猜定依惠据。卧测定哈的基沙础培惧养基尖配方欢很多欢，因恢种而阴异。俱现介件绍1画种合艰成的诱基础后培养虾基，坛有些底细菌欢还可限适当爬补加转各种里维生泽素。迷培养慕基可脂制成极液体亡，分卫装试阁管，吃也可闭制成础固体派平板男。可片用于住测定最的底爱物种血类很刘多，效有单钳糖、壤双糖久、糖胖醇、毯脂肪喘酸、肥羟基单酸及蔬其他鹅有机摧酸、迫醇、暗各种猫氨基招酸类亡胺类漆以及粪碳氢牧化合敏物等惰。糖芽的含传量一肯般为滴1％明，醇糊类酚碎类等秩的含轰量一亡般为述0.屠1－壳0.嘴2％着，氨举基酸摸的含柿量一晕般为猛0.摆5％惧。因阻碳氢洞化合剃物不腾溶于抄水，嫁可在跪液体师培养唐基中俊振荡旗培养楚，或恶加入鹿到4昼5呢℃邻的固炊体培刑养基每中，雪振荡边后立挑即倒叠成平塔板。撒有些求底物愈不宜旦用高削压灭鉴菌，消可用雪过滤锋法灭腿菌后溜加入尾已灭途菌的佳基础霜培养鉴基中公，某芝些醇椅类和诸酚类糟不必愿灭菌餐。查接种晚和观舒察结谋果：津菌种滥最好匪做成施悬液娘，避鼠免带舰入少旺量碳郑源干盒扰试票验结渐果。葡平板耍培养着用接障种环利点种挽，液塘体培游养则知用直虑针接汁种。猾每一慰测定觉菌必副须接烈种未巾加碳绪水化场合物散的空援白基陕础培巨养基映作对焦照。让适温颠培养血2、浸5、暖7天皂后观滨察，即凡测康定菌榜在有近碳水削化合规物的韵培养孟基中测生长健情况海，明丝显超帆过空之白培积养基队的生欢长量私为阳挥性，感否则剩为阴潮性。浩假若咐两种券培养帅基上太生长兼情况泰差别庸不明嘉显，烦开在沸同一鞠培养拉基上俱连续哪移种柱3次花，如姐差别矮仍不仁明显驰则以灶阴性哨论。医7、狸葡萄时糖的户氧化翁发酵暑试验箱在细量菌鉴林定中餐，糖拾类发怪酵产节酸是冲1项王重要薄依据四。细筛菌对题糖类轮的利史用有贞2种夺类型唯：1惑种是咽从糖毁类发阀酵产缎酸，辉不需模要以累分子思氧作躲为最心终受去氢体评，称兽发酵窑型产慈酸；苍另一竹种则紫以分压子氧鲜作为咸最终盟受氢猜体，亩称氧敌化型尖产酸俭。前灰者包则括的钉菌种轧类型极为多梅数。胸氧化窜型产描酸量字较少横，所芒产生它的酸侧常常照被培骡养基群中的君蛋白桐胨分劳解时玩所产们生的俘胺所枪中和折，而秆不表泄现产定酸。者为此盏，H铲ug遗h和磁Le开if史so具n提湖出一篇种含知有低蜂有机薪氮的扒培养繁基，象用以适鉴定个细菌皇从糖析类产路酸是导属氧识化型燥产酸沸或发书酵型音产酸抛。这剑一试四验广毛泛用鸭于细都菌鉴晕定。叠一般谅用葡酷萄糖挺作为灰糖类钱代表崖。也寇可利划用这羽一基沉础培颤养基究来测湾定细纵菌从小其他弦糖类利或醇慰类产辩酸的飞能力劳。站（1份）接钻种神：以死18纠－2旧4h村的幼因龄菌富种，田穿刺斜接种授在上衡述培块养基粘中，难每株茎菌接余4管违，其竟中2克管用首油封难盖（袋凡士巩林：薯液体纲石蜡漠＝1饱：1半混合绘后灭方菌）查，约谱加0近.5末－1储厘米错厚，乏以隔拥绝空流气为演闭管翠。另嗓2管丙不封递油为爆开管投，同陪时还饲要有裕不接谋种的维闭管非作对桐照。妹适温屑培养贩1、刃2、血4、闸7天催观察生结果椅。玩（2艘）结难果观轿察：石氧化俘型产属酸逗――购仅开去管产杂酸，霜氧化塌作用杜弱的袖菌株旷往往住先在虾上部取产碱搂（1德－2片d）抱，后尘来才祝稍变辜酸。加发酵遭型产累酸则学开管欢及闭贤管均迷产酸扎，如墙产气期，则三在琼着脂柱设内产蛇生气腿泡。孤8、置糖或委醇类乓发酵震试验脖咐不同牵微生飘物分距解利积用糖石类的寺能力勿有很页大差充异，宣或能伞利用验或不讯能利祸用，胃能利移用者爬，或丝产气绢或不扣产气间。可炕用指唇示剂析及发德酵管武检验持。俊封试验际方法诞：以饱无菌赔操作疗，用蓬接种新针或议环移捎取纯夜培养欺物少省许，臣接种声于发犯酵液颠体培虹养基呈管，盛若为扭半固呆体培骗养基蒸，则粪用接屠种针躲作穿蔑刺接司种。钢接种要后，搏置揭36霸±芬1.白0律°语C渴培养到，每选天观妻察结违果，铸检视到培养怖基颜虫色有消无改沸变（随产酸聪），效小倒台管中该有无追气泡袍，微京小气蜘泡亦漆为产疾气阳脆性，些若为盯半固拣体培依养基混，则守检视债沿穿森刺线高和管搬壁及裳管底母有无昂微小吉气泡领，有嘉时还呆可看棉出接超种菌店有无亮动力希，若些有动销力、溉培养党物可嘱呈弥笑散生凡长。嫁本试设验主叮要是图检查猜细菌巷对各狡种糖即、醇凝和糖欠苷等您的发链酵能诱力，赴从而玻进行醋各种氧细菌订的鉴坝别，往因而微每次柏试验警，常炼需同犯时接碎种多河管。捏一般昌常用礼的指辈示剂巩为酚膝红、题溴甲钥酚紫桂，溴胁百里琴蓝和竿An兼-d咸ra齐de住指示涛剂。泪注：今对于虫糖醇珍类发丢酵现垮在一细般用电糖、怀醇类铸细菌烫微量蹄生化事鉴定春管在广36艇℃按18朵－2去4h揪即可光出结债果。挖9、馆硝酸死盐（踢Ni允tr尺at朽e剪）还炊原试伐验牧缴有些违细菌蒸具有乏还原羞硝酸技盐的怀能力刃，可驾将硝个酸盐多还原备为亚渔硝酸面盐、出氨或驾氮气笑等。须亚硝挂酸盐瞧的存拾在可束用硝犹酸试昼剂检蛛验。付荐试验丝方法权：临雨试前代将试邀剂的唱A沉（磺摔胺酸里冰醋亮酸溶甜液）竿和溉B牙（桂α蹦－萘需胺乙染醇溶抓液）携试液筑各使0.携2m孕l享等量宽混合北、取吧混合玉试剂著约宿0.喘1m疫l嫂、加漂于液脑体培公养物震或琼软脂斜悟面培梢养物初表面借，立烂即或馒于笛10茫mi蹈n疏内呈卫现红钉色即塘为试首验阳缺性，译若无认红色绪出现鱼则为仅阴性招。爪寺用螺α毛-昆萘胺细进行适试验搭时，帜阳性针红色欲消退裁很快阻、故排加入制后应箱立即屿判定指结果豆。进禾行试扎验时夕必须障有未月接种订的培切养基策管作挎为阴割性对响照。呆α娱-傲萘胺者具有辉致癌撇性、顿故使霉用时泰应加汇注意欲。心10伙、靛岔基质革（组Im露do裕le煤）试负验邮庭某些册细菌狠能分袋解蛋垫白胨饱中的讲色氨瑞酸，糊生成惑吲哚予。吲卫哚的预存在斧可用撞显色石反应刑表现燥出来鞋。吲斤哚与也对二司甲基客氨基皱苯醛铸结合动，形碌成玫脊瑰吲末哚，挂为红坏色化申合物沃。纽钞试验漏方法僵：将芳待试大纯培母养物允小量逗接种识于试肿验培枣养基过管，极于吊36络±丘1C泊培养钢24故h借时后舰，取坝约碎2m商l期培养灰液，河加入帮Ko俗va板cs梦氏试少剂扶2~晚3椅滴，城轻摇傍试管瓜，呈供红色那为阳撤性，阻或先怠加少揭量乙础醚或拼二甲吉苯，叨摇动陪试管映以提拼取和批浓缩省靛基孟质，乡待其肝浮于所培养棒液表者面后货，再纹沿试亿管壁酱徐缓塌加入传Ko腐va挽cs旺氏试李剂数两滴，耕在接摆触面辆呈红锻色，仇即为阅阳性贱。钟柳实验吵证明鸦靛基势质试皮剂可译与潮17也种不卷的靛纸基质够化合僚物作握用而祝产生压阳性沈反应佩，若嘉先用什二甲驱苯或菜乙醚叶等进显行提高取，嗓再加猪试剂教，则辞只有粘靛基苹质或捧5-枣甲基滩靛基鼓质在展溶剂擦中呈捧现红励色，蹄因而司结果疮更为珍可靠抄。允11极、三窃糖铁寺（迫TS猪I缠）琼瞒脂试咳验摧拳试验土方法另：以鲁接种纤针挑健取待把试菌杀可疑娇菌落笔或纯胀培养慕物，盘穿刺膜接种物并涂秧布于赠斜面叶，置扫36摸±狐1楚℃玉培养古18抚~2渐4h页，观割察结瑞果。桌园本试糠验可呆同时侍观察凑乳糖谎和蔗摊糖发那酵产呢酸或蜻产酸疏产气销（变每黄）强；产研生硫混化氢表（变遇黑）沟。葡善萄糖白被分乎解产艳酸可优使斜传面先巷变黄宾，但煎因量鹿少，议生成恨的少扣量酸窝，因思接触攻空气允而氧缴化，肢加之举细菌怨利用透培养堆基中叙含氮倚物质传，生纪成碱浴性产蛛物，举故使事斜面胜后来泪又变茎红，夜底部北由于威是在匀厌氧苍状态蛋下，犹酸类坐不被是氧化跟，所碎以仍觉保持才黄色夕。旅12峰、氨放基酸碗脱羧拒酶的姨测定傍迈榨有些膊细菌轧含有岛氨基重酸脱登羧酶都，使蔽羧基棉释出袋，生嫌成胺长类和宣二氧婆化碳借。此迎反应冈在偏抖酸的委条件紧下进还行。节当培淋养基把含胺棕类时础呈碱泼性反方应，嚷使指月示剂红变色夹。死接种谜与观动察结嘴果：闭用幼缠龄培哈养液猪作为质菌种遵，直漫接接景种。梁接种陕后封亩油，合对照案管与葱测定冬管同网时接策种封帆油。独肠肝匆菌科绞的细思菌于由37身℃贱培养杠4天唉观察示。当涝指示吹剂呈漆紫色疮或带侨红色盟调的狗紫色上者为改阳性辫，呈炮黄色可者为哭阴性鞋。对雾照管登应呈弹黄色方反应啄。昏13堪、硫种化氢匪（畏H址2东S彻）试继验鼠页有些么细菌谜可分邀解培栗养基诉中含各硫氨辜基酸逮或含搏硫化席合物场，而塌产生追硫化狱氢气旱体，寿硫化抚氢遇租铅盐嫌或低屿铁盐多可生径成黑绕色沉剑淀物肢。秀额试验屯方法握：在尺含有努硫代粘硫酸闻钠等幼指示丙剂的蚀培养胳基中恩，沿誉管壁称穿刺佛接种去，于丙36确±泰1蹈℃石培养星24嘱~2肿8h旱，培未养基猾呈黑脚色为杂阳性挖。阴戏性应摇继续苍培养菠至赴6吐天。魂也可栋用醋贿酸铅元纸条分法：辞将待你试菌仁接种垂于一铸般营总养肉喊汤，瓜再将破醋酸铜铅纸稀条悬臭挂于挨培养蕉基上泼空，壮以不般会被蚀溅湿境为适绿度；载用管士塞压茎住置姨36嚷±油1织℃泼培养易1~宽6棍天。鸭纸条汤变黑珠为阳无性。薄14钓、柠诞檬酸彻盐或特丙酸塔盐的到利用销某些刘细菌跌能利脊用柠傅檬酸叙盐或僚丙酸租盐作并为碳蛋源，叼及磷纤酸胺为作为侨氮源探，将劫柠檬舱酸分裂解为痛二氧罩化碳森，则肤培养集基中柳由于办有游稍离钠逼离子叮存在糕而呈统碱性砌。乖接种彼与观悬察结鼠果：华取幼贩龄菌腰种接蜻种于觉斜面鸽上，轻适温师培养岂3－翼7天剧，培钩养基弃呈碱厘性（劲蓝色灶）者织为阳烦性反长应，垮不变站者则煌为阴烧性。疼15害、利隶用丙攀二酸辛盐试丢验盗丙二闷酸盐蔑是三秃羧酸估循环境中琥到珀酸帜脱氢联酶的倍抑制狱剂。岔能否帽利用粒丙二深酸盐仙，也我是细恐菌鉴格定中到的一汗个鉴澡别性存特征恭。钱许多绿微生话物代诞谢有决三羧盛酸循驼环，四而琥镜珀酸诊脱氢舞是三透羧酸组循环呀的一编个环请节，采丙二券酸与脉琥珀阅酸竞歌争琥欣珀酸婆脱氢碗酶，帮与丙央二酸建不被倾分解蛙，所课以琥僵珀酸邪脱氢母酶被影占据企，不蒜能释斥放出编来催健化琥片珀酸纽脱氢寸反应床，抑冷制了宽三羧廊酸循谎环。评接种搅和观材察结泪果：批用幼侵龄菌美种接蝇种测山定培始养基殃和空投白培洪养基调，于叫适温滔培养浊1－紫2d君，观谊察培武养基袜变色对情况速。绕如测猪定培键养基推生长敢并变糠蓝色醉，表稿示可企利用款丙二亏酸盐东，为斑阳性有结果规。反绪之，馒如测关定培说养基最未变让色，鹿而空泽白对狭照培揪养基避生长某，则子为阴滩性，停即不关利用铜丙二菌酸盐袖。趁16殊、葡骂萄糖炊酸盐塑的氧脆化侄假单胖胞菌陕属和趣肠道抄杆菌殖科的中细菌翻，可松氧化堂葡萄吐糖酸煌为2虹－酮争基葡掉萄糖爱酸。四葡萄芹糖酸柳无还玉原性蜜基团眉，氧话化后崭形成笔酮基溜，则甲可将汗斐林绿氏试覆剂的腊呈蓝锡色的剧铜盐加还原量为砖秃红色捡的C权u退2码O沉弃淀。锅试验款方法敞：用胀pH林7.哭2的呼磷酸蚂缓冲间液配乒制成辞含1赚％葡贯萄糖垮酸盐料（可犬用葡济萄糖珍酸钠馆或葡概萄糖则酸钙河）的秤溶液片。分宇装试饰管，轮每管水2m筐L。例刮取胆适温找培养密18端－2虹4小誉时的酱菌苔塞至2傲mL会的葡评萄糖资酸盐茫溶液借中制惊成浓检的菌轨悬液胜，置夜30启℃软过夜棋，然丛后每庆管加墙入0灿.5谅mL接的斐宋林试岂剂，喜放在流沸水寺浴中章加热搅10浆分钟倡，试捐管中撞液体币由蓝顶色变筹为黄抢绿，然绿橙币色或双出现菜红色辛沉淀脖者为蚂阳性客反应刑，如菜溶液膏不变讯色者辛为阴絮性。缸17今、硫丈化氢唯-盆靛基液质伐-固动力哗（赞SI岛M错）琼屈脂试赠验椅汁试验恭方法液：以雨接种魂针挑防取菌乔落或怖纯养稀物穿蛋刺接懂种约押1/智2抓深度桃，置糠36纽±拼1伍℃砖培养悬18掘~2性4h掉，观吗察结催果。蜘培养眉物呈顾现黑映色为堤硫化胜氢阳僚性，刃混浊题或沿舟穿刺膀线向燥外生辰长为肉有动旨力，宜然后基加冷Ko沟va祖cs绑氏试份剂数瑞滴于挎培养壮表面眠，静疏置男10喂mi引n液，若难试剂直呈红付色为肯靛基其质阳普性。俘培养毛基未私接种感的下物部，彼可作春为对线照。竟本试真验用慢于肠绢杆菌雅科细警菌初崖步生崭化筛于选，碎与三峰糖铁剂琼脂恳等联否合使即用可粥显著辅提高尊筛选杰功效拐。歉18锁、内β鸽-半庙乳糖充苷酶案（O凡NP恰G）钻的测违定敌本试笑验应街用于师肠肝蜻菌科桃的鉴渴定。凝测定汪步骤光：街将测遗定菌铲接种损于T钓SI嚼斜面锁上，读培养允于3约7挑℃辆18稍h（腹或其岭他最蜻适温成度）溉挑取臣1大此环菌赠苔入疫约0樱.2蚂5m摸L的动生理多盐水教中制可成菌随悬液社，每晶管加打1滴多甲苯各，摇捕匀（雁有助宗于酶切的释调放）唇，于衰37急℃滩放置读5分手钟。迈在菌挎悬液阳中加导入0恒.2甚5m害L的警0.樱75灯mo灯l/盛L徐ON犬PG侵，测铃定管辅置于勺37晒℃简水浴巨培养跨。经誓30享分、蓝1、梅2、英3、追……牵24采h进蚁行观捐察，晶如有丰黄色驾者则斩为阳抢性。拢19适、耐征盐性朱试验顾本试索验是队观察衬渗透嫌压对起细菌律生长跨的影值响。脸由于项不同早菌类娘耐盐辣性不表同，厦故常菊以此让作为盆鉴别路特征鹿。一是般可阳根据宰不同乒种类键的菌裤株，是选择组其适证合生服长的印培养府基，郑在其粥中加特入不夺同量寺的N宫aC付l，卸接种东后观盏察其查生长伶与否蚂，以肾判断捞其耐牢盐性摘。腿以肉洋汤培施养液殃根据窗鉴定舒需要约，配远成不便同浓妖度的冤Na寸Cl声，如扛2％嚼、3遣.5特％、唤5％率、7赠％、犹10糊％等娇。培难养基宵要求浪十分吼澄清彩，接摧种时证应采转用幼姐龄菌贯液，恶直针秤接种或，适甩温培伯养3监－7拥d，览与未悉接种街的对咱照管元对比汇，目闲测生弹长情望况。灾20崭、卵糠磷脂盼酶的辫测定明菌体选如存卖在有抓卵磷递脂酶蹲，就桐能使科卵磷茫脂分摄解生箩成脂轰肪和挡水溶拿性的须磷酸么胆碱排。朱接种请与观玻察结输果：婚将测跟试菌易的菌天液，茎环接兰在有滑卵黄翼的试企管和散不加嫁卵黄设的对困照管税中，轧适温牲培养辨1、竿3或调5天杆观察片。假狸若与闸对照设管相附比较傲，在隔卵黄励胰胨崖液中敢或表畜面，往形成顶白色绘沉淀监者，秘则为擦阳性尽反应规，表腿示卵惜磷脂俊被分间解，轧生成叉脂肪丢和水那溶性筒的磷艰酸胆亲碱，堂说明景有卵币磷酶隐的存组在。论另一剩种方趟法：驱以无怠菌操餐作取杰出卵赖黄，锅放入贸灭菌嗓的三抹角瓶炼中，亮加相市当于叮等量厕的生输理盐谦水摇锯匀后域，取止10枣mL与卵黄晴液加伞入到睡溶化闻的约湾50忘－5响5渐℃炊的2偶00根mL碗肉汁尝胨琼机脂培驴养基棕中，恰混合香均匀抄后倒艇入培志养皿度，制研成卵酒黄平娘板，然过夜缎后即欣可使毅用。络接种坑与观盆察结届果：法将测辰试菌继点接错在卵潜黄平乡板上白，每舞皿可畅分散堂点接滤4－怀5株疯菌、幅（芽阀孢杆发菌以切点接排1－六2株般菌为瓦宜）宵以不烈影响医结果旋观察增为度们，如惹测试蹄厌氧健菌，丛则须唇在上陪面加户盖无筐菌的贴盖玻积片。满每株关菌至劈少重星复点慰接两感皿。另适温讲培养古1－搭2d昏观察棚，在挡菌落察周围浪形成稀乳白充色混思浊环抢，表船示卵宏磷脂葱被分网解，燥生成蚕脂肪意，说壳明该雁菌株们有卵忠磷脂汪酶存农在。集21灵、石千蕊牛背奶的坦反应辫牛奶肉中主扶要含趣有乳踪糖和虚酪蛋盾白，饼在牛料奶中银加入吉石蕊焰是作丝为酸特碱指乱示剂昆和氧垒化还摊原指辩示剂术。石掏蕊在氏中性佛时呈忽淡紫萌色，贫酸性洲时呈勺粉红僵色，保碱性碍呈蓝泉色，歌还原缓时则熄自上级而下秒地褪霉色变苗白。夜细菌岛对牛产奶的之作用殃有一兰下几时种：冒产酸愤――芬细菌拆发酵话乳糖为产酸爷，使剃石蕊老变红毁。渴产碱逃――挥细菌魂分解年酪蛋所白产叫生碱猛性物幸质，鞋使石列蕊变店蓝。局胨化壤――斜细菌幕产生申蛋白欣酶，裕使酪急蛋白潜分解挺，故以牛奶奶变得决比较渐澄清妹。微酸凝装固抬――献细菌叨发酵卫乳糖狡产酸窄，使欢石蕊石变化费，当咬酸度赖很高饮时，农可使芬牛奶悔凝固横。额凝乳苏酶凝利固徒――秋有些参细菌棍能产康生凝哭乳酶仗，使计牛奶也中的狼酪蛋拘白凝但固，置此时典石蕊谱常呈赢蓝色惠或不梅变色勾。第还原稼――弯细菌迟生长展旺盛劈，使告培养氏基氧糖化还妹原电橡位降敲低，净因此碧石蕊训还原访褪色骡。刑接种喝与观遵察结浙果：煎接种劲待测播菌株稻，适互温培锣养3套、5惨、7号d或悄14盐d，眼按上牧述特浸征观材察和联记录孔牛奶加产酸女、产洗碱、瑞凝固宣或胨子化等纽反应零。扯22嫩、酪谎素水散解试背验（邻酪蛋绍白水馒解）相牛奶惠平板池的制处备：察取5份g脱疮脂奶扣粉加损入5泛0m挪L蒸沉馏水糠中（腥或用精50碰mL订脱脂变牛奶井），框另称敢1.策5g坛琼脂喉溶于盟50令mL触蒸馏棵水中很，将热两液粥分开仔灭菌股。待垄冷至愁45枣－5锅0母℃徐时，毛将两扬液混哥匀倒悲平板倍，即两成牛雅奶平膏板。悄将平海板倒挑置过翁夜，蔬使表础面水兴分干僵燥，雨然后芝将菌攀种点攻接在珠平板妇上，阅每皿累可点购接3缠－5教株菌叶。适蜻温培既养1配、3纹、5推天，厕记录积菌落揪周围偷和下乔面酪枕素是晶否已仙被分害解而斥呈透始明。道配制膨该培泻养基驼时，榜切勿惰将牛堪奶和雾琼脂漏混合乌灭菌汇，以侮防牛蛛奶凝债固。书23克、酪卫氨酸穿水解擦将L储－酪贞氨酸教0.中5g啊悬浮贺于1月0m袄L蒸摇馏水辆中，作8磅厚20径分钟男灭菌水，然崖后于吐10镜0m快L无毙菌的遣营养之肉汤供琼脂肉混合地，倾扑倒平鼻板，下待凝忧固后施，将棋测试迈菌接国种于孟平皿透上，期培养朱7到猛14近d，受记录才酪氨垒酸结旁晶是冬否被国水解警而变泄透明漏。巴24寨、苯重丙氨绪酸脱菌氨试健验户某些轿细菌片（如束变形衡杆菌喜）具递有苯抄丙氨晒酸脱餐氨酶酱，能导将苯苏丙氨轻酸氧代化脱砖氨，佳形成暴苯丙渐酮酸袖，苯甲丙酮置酸遇触到三介氯化垂铁呈率蓝绿赵色。核本试沉验用斥于肠沾肝菌描科和脆某些脚芽孢纤杆菌零属的丧鉴定丸。坦接种傲与观伪察结较果：盟将菌都种接番种于洽该培厨养基呆斜面震上，渐适温痛培养把3－凉7d吃（某叠些芽奉孢杆罪菌须项培养穴21腊d）译。取大10压％的续Fe屑Cl旗3布水溶秋液4驻－5厨滴，终滴加便在生竟长菌葡苔的跪斜面唐上，汁当斜异面和童试剂堵液面稀处呈猪蓝绿漏色时草为阳单性反时应，某表示青从苯厚丙氨站酸形赖成苯花丙酮器酸。懂25进、产业糊精晴结晶蚁试验象某些红需氧通芽孢叫杆菌绑能产恨生淀傲粉酶桶，使帽淀粉浅水解陪为糊幅精。割该反堵应仅耻用于嫁区别货多粘筝芽孢伴菌，骂浸麻蒜芽孢亿菌和禽环状晴芽孢教菌的饶培养淹物。撤在大哪试管鞋中（甩20植0X谋20盼mm刻）装堂碾过住的小叉麦（县或燕穴麦）稍0.锄5g继，C贯aC楚O央3估0.驻2g稻，蒸跑馏水等10飞mL孟，灭江菌后浴接种朽，3辟5漫℃宁培养喉3、瓶5和拿7d待后，哗取1寒滴卢洲哥尔舅氏碘犯液混召匀，恢干燥啦后，宇用显温微镜职观察谁有暗狠褐色列或蓝猜色的减六角雄形结表晶的胁糊精哲，假繁若大组量形端成，坦则排凉列为赶扇形怨或针旱状。么26武、从槐甘油蜡产生竞二羟织基丙闭酮燥本试素验主套要是贸用于触区分俯醋酸氏单胞通菌属这和假俱单胞丝菌属晒以及题某些红芽孢厌杆菌逼的鉴团定。黄生酮必反应樱是由留相应偶的多扩元醇味的脱旁氢酶姑的作遍用，其此反聪应就谈是测秤定有去否这刻些脱渠氢酶勒。冒接种渠与观蜓察结润果：哭融化妖三角很瓶中培的培击养基喷，倒害成平叨板，匪凝固耳后在免平板举上划践短线乒接种腊，适剑温培瓶养1气0天亡，在塑平板追上倒诵入斐浓林试够剂A柔、B维混合协液，染以覆坑盖菌冷落为条度，胁2小蹦时内蔬检查蛛，若裂在菌贱落周罪围出首现红第色的杏晕者活为阳咽性反退应。亿为了旦能掌拐握这赵一试协验，副可接骨种多梁粘芽百孢杆赏菌作圆阳性炊对照甩。怠27纷、厌毙氧硝趴酸盐巡产气草在厌挽氧情仔况下拘，有忆些好衰氧细边菌，翼能以习硝酸步盐代强替分芬子氧匹作为持受氢艳体，邻进行乐厌氧隙呼吸撒，将杜硝酸块盐还睡原为救气态枝氮，照即为页土壤铜中的吊反硝母化作荒用。则某些旁芽孢熟杆菌辨，假求单胞钩菌及匙产碱析菌等屯属的豪细菌丸具有冷此反亲应。霞接种腿封油爽：以详斜面吉菌种助用接孩种环目接种占后，切用凡共士林驼油（摧凡士喊林和旋液体蔬石蜡喷为1赚：1经）封连管，关封油瞧的高落度约户1厘烧米。蓄必须镜同时您接种刺不含秋有硝坡酸钾途的肉转汁胨盾培养镇液作或对照美。票观察军结果刊：培洒养2鼻－7杆d，低观察缘在含探有硝紫酸钾牲的培富养基三中有傻否生畅长和苍产生着气泡毫。如合有气佣泡产房生，评表示俗反硝蔽化作破用产份生氮晕气，哲为阳润性反酒应。烫但如只不含龄硝酸烦钾的茅对照端培养和基也彼可产雹生气盆泡，掘则只慧能按医可疑竞或阴渗性处码理。替28点、马校尿酸皆盐水远解试姐验耻本试贞验作唐为区达分某述些芽降孢杆逆菌的谱鉴定尖和黄湿单胞惯菌属鲁的鉴完定之扫用。原接种巨和观烘察结挤果：病以幼侄龄菌恰种接态种于温上述懒培养菌液中辱，适愿温培稀养4靠周（待高温售芽孢照菌培亦养2落周）吼，取积1m颗L培腹养物雅，和腿1.湾5m拥L5混0％烛的；悟硫酸禾混合色，静虑置片材刻，厚在酸肚性混吊合物雪中有文针状辫结晶柴出现纯为阳缘性，以证明杨从马季尿酸驴盐形铺成安艘息香酬酸。盼29缎、对欧叠氮验化钠和的抗糟性挺本试虹验用界于高响温芽投孢杆贡菌的辣测定谱。奇接种梅和观膜察结企果：律取1察环幼两龄的劲菌液炒，接希种于县上述亲培养喝基中钉，同威时接椒种营放养肉筋汤作娘为对剂照。校45桑℃详培养盾7至搭14限d观猾察生歇长情远况。赴30茅、氰界化钾判试验蜜氰化姐钾（掏KC烤N）站是呼块吸链已末端戚抑制御剂。闸能否但在含扁有氰舅化钾朵的培舞养基名中生啊长，绞是鉴筑别肠侮杆菌苦科各干属常轨用的火特征施之一同。嗽接种矮和观病察结溜果：拣用幼葡龄菌厚种接汇种于捷加氰菌化钾详的测杠定培枣养基甘和未榨加氰否化钾挠的空箭白培荡养基废中，难适温倍培养歇1－封2d更，观叨察生支长情咱况。软能在徐测定寄培养光基上市生长贯者，佛表示测氰化片钾对彼测定斤菌无王毒害薄作用评，为追阳性需。若量在测虑定培狱养基主和空扎白培述养基熟上均别不生三长，腐表示也空白超培养邮基的刃营养焦成分戏不适撑于测咽定菌唯的生叨长，笋必须猛选用炕其它椅合适火的培围养基居。而盒测定病菌在谊空白挪培养歉基上愉能生吸长，考在含唐氰化膊钾的蒸测定始培养队基上唯不生乖长，歇为阴须性结扮果。框应该盾注意梨：氰衡化钾挂是剧伍毒药算品，胞操作宝时必档须小检心。端培养销基用龟毕，醋每管抗加几央粒硫蛋酸亚肺铁和谊0.饼5m酿L2术0％溪KO半H以释解毒脸，然聚后清撞洗。北31糟、对枣溶菌俭酶抗搞性的焰测定敌在1猜00气mL冻的三于角瓶汽中，谣放入能60效－6犹5m蚕L无逃菌的毛0.圣01括mo似l/同L榨HC货L，棉在其头中加盏入0甘.1治g溶股菌酶痰，瓶微上塞所无菌膝棉花佛，在能小火神上煮杀沸2禁0分约钟后搜，冷洲到室握温，升加无概菌的港0.顽01兔mo走l/防L症HC计L补迟足到挡10烤0m洋L。话取1许mL卷溶菌井酶溶牌液与俘99捡mL乌无菌仁的肉刚汤培难养液助混合巨，分钟装无款菌试当管，令每管定2.毁5m策L，掉在含板有0盏.0池01扬％溶贪菌酶振肉汤穗管子持及无腐溶菌片酶的心营养进肉汤初对照伙管中纹，各纺接种踏1环倦菌液涌，适叔温培相养5佩－7驶d，叉记录萄两管斯的生棵长情池况。华32波、在书pH掉5.龟7营添养肉羞汤上杨的生优长爱本试托验应钩用于乏芽孢厘杆菌腊属中曲种的惑鉴定听。腊接种仗和观披察结佳果：找取菌傅液一共环，落接种私于上跳述培晨养基金中，哈同时照接种各普通猛肉汤费液（慧7.瞎2p丧H）侄作对民照。解适温哭培养洋1－沉3d舰后观炕察生辨长情宴况。送该培饲养液料要求丧十分读澄清捉，p柜H必施须准郑确，课最好烧用p蜂H计景调测喇。治33夹、需邻氧性短试样仗若在严培养滑基中巧加入衡还原缺剂，驻如巯漂基醋野酸钠歪和甲之醛次铸硫酸着钠等卡，以锐除去状培养妇基中炎的氧播气或肤氧化趟型物傻质，寇使厌撞氧菌随能在俩有氧度情况碗下生锁长。援接种兔与观裁察结晃果：短用1坑小环诉（外哈径1算.5泰毫米史的接斑种环项）的舍肉汤幕菌液踩，穿湖刺接弟种到卧上述看培养们基中跌，必阁须穿奴刺到菜管底疮。3缝0绍℃雷培养啦，分预别在我3至下7天惑观察抹结果惰。如书细菌耐在琼兆脂柱肥表面达上生南长者葱为好塑氧菌馒，如什沿着尿穿刺梅线上增生长抽者为垂厌氧丝菌或钱兼性意厌氧搬菌。斩34葵、明逼胶（蚀Ge茧la宵ti赴n些）液腹化试甘验辫党有些夫细菌支具有在明胶或酶（们亦称患类蛋探白水死解酶肤），落能将出明胶朵先水来解为妻多肽歉，又膨进一宁步水逢解为锯氨基公酸，料失去岭凝胶糕性质侄而液焦化。余桶试验察方法啊：挑称取煤18刻~2愁4h缸待试谦菌培额养物动，以读较大主量穿隙刺接读种于延明胶企高层送约吹2/市3仇深度斑或点疤种于销平板匠培养汽基。格于愈20蛙~2从2泻℃条培养阔7~止14种天。敬明胶去高层胜亦可毁培养边于哨36惹±燥1横℃逼。每伏天观索察结重果，潜若因项培养宋温度急高而锐使明趟胶本尿身液安化时您应不屑加摇老动、棵静置蚀冰箱钟中待返其凝滑固后愿、再障观察腊其是职否被雨细菌皱液化眠，如要确被长液化孔，即公为试枣验阳暴性。坚平板虾试验每结果术的观鸟察为的在培正养基错平板苦点种衣的菌酒落上假滴加渡试剂泽，若课为阳潜性，稳10旨~2递0m式in撕后，军菌落近周围宗应出悄现清顾晰带奋环。叙否则朵为阴谢性。疲35旷、淀汁粉水洽解试幼验州丈某些纵细菌妈可以挎产生先分解伪淀粉膏的酶拳，把边淀粉缝水解述为麦呼芽糖楼或葡皇萄糖庸。淀却粉水艰解后糖，遇元碘不迟再变碧蓝色归。己导试验染方法刘：以策18卸~2庭4h贞的纯处培养犹物，秀涂布允接种龙于淀荡粉琼裁脂斜歪面或绸平板钓（一细个平戏板可矿分区灵接种驱，试蓄验数晓种培朋养物碍）或晴直接要移种基于淀呼粉肉邪汤中傻，于扯36狠±1论°C置培养婚24林~4尤8h挠，或子于寇20逃°围培养瑞5烟天。俯然后贺将碘真试剂滥直接尸滴浸施于培厌养表跃面，逆若为朋液体怪培养漆物，吸则加度数滴靠碘试伍剂于缘试管葡中。侵立即截检视斜结果布，阳抬性反爪应（案淀粉舍被分瞒解）茅为琼匀脂培蛮养基检呈深饭蓝色津、菌济落或乳培养谋物周倘围出恨现无邪色透凉明环蛛、或漂肉汤核颜色姿无变蜘化。隶阴性笼反应壁则无斯透明功环或恭肉汤羽呈深亲蓝色服。踏散淀粉母水解问系逐属步进腾行的库过程背，因瓶而试龙验结睛果与毯菌种稀产生票淀粉凡酶的画能力孩、培崇养时月间，踩培养缎基含闲有淀奶粉量拉和建pH捐等均的有一饮定关担系。辱培养失基锦pH蛮必须迈为中孔性或话微酸衬性，爆以潜pH桌7.来2陶最适荡。淀阶粉琼贫脂平吧板不你宜保谎存于绳冰箱考，因坛而以浴临用受时制呆备为秋妥。倍36蚕、生皇长温房度的旺测定遵细菌杀生长俗的最毕高、尘最适露和最巡低温临度，木常常阴是某牛些细约菌鉴什定的稠特征恨之一怨。测出定细亏菌的兽生长抬温度谢，要惧求培魂养液夏十分靠清晰触（如拜普通飘肉汤能培养险液）矩，并刻采用支液体毙菌种牧直针仁接种望（不速用接矿种环耀接种畜）。星放置繁于恒税温水辨浴培执养。拐指示养温度津计应疑放在吓同样诱的试举管和复培养幸基内柜，在形指定还温度够下培罚养2耀－5缘d，慧观察门生长久情况女。在拨接近鸣0沿℃业的低拴温培私养，垦则观冶察时腔间可爷延长另至7队－1普0d职，甚质至3贴0d幅。认观察毕记录点结果猫：前目测牢生长岸情况循，与怒未接咬种的俘空白却培养胃基对刺比，告注意责混浊狸度、否沉淀稻物和服悬浮仿物等姐项，日并分格级记我录如套下：仇（1秤）编“瞒＋估“疮：表缩示生晕长良蓬好；加与对植照管推相比仪，可街清楚惧地判拜定是液混浊寿的。词（2矿）绣“语＋－慨“仓：表击示生替长差葡；与烤对照多管相炭比，祥只有岛在某请一观蜓察角渔度时腥方能惰看到厨明显励的混烦浊。携（3乖）粘“为－银“敬：表熊示不饿生长祖；在毅适宜踪的角剂度下消观察药，与迹对照枯无差言异。州总之住，培论养5盖d，旬能生雪长者督均按狱生长寿计，很否则再按不剃生长机计，点凡培随养5码d仍晚属可拼疑者韵或不勉生长巷者必神须重酒测，询在重氏测时泡，可斥能出岸现有甲时生川长，拨有时组不生弹长的盾不稳抓定现普象，助这可莫能有伍两种作原因品：一江种是脱水浴蛛温度缴不稳理定，垃培养唯时温击度波雷动大杠；另瑞一种扣原因忍可能野是所炊测定他的温奏度，押恰好苹是测稿定菌齿的临戚界生辣长温妙度，发在这运种情故况下次，可禽用提扰高一漫度或词降低已一度牌的办伟法肯蕉定之渠。怒必须哪注意蜘，当级测定镇的试困管较咏多时胁，不苍可将纱试管豆捆成备一捆牲浸于栽水浴喉中，腊这样尾捆着花的试侧管内渗外温左度不滤一致鄙，易崇出现购误差燕。最章好用充特制吸试管耗架放胶试管模，所值用温常度计硬应用护标准闻温度黄计标屋定过观。昌37蚕、形源成芽拒孢的魂培养为基析形成示芽孢声是芽筒孢杆准菌的询关键蝇性特阶征，旗但不赵是所揉有的心芽孢破杆菌赏都能葬在任殃何条痒件下坡形成份芽孢塑。在女鉴定厕细菌服时，厦为了伤确定及是否钩属芽御孢菌婶，需析要对者那些捧在一报般条坏件下均不形该成芽聋孢的昏细菌抵，采痛用生毒孢子讲培养究基，碎来确威定是枝否能源形成斯芽孢艺。纤38桌、O苏/1挨29洞的敏航感性裕试验多O/千12垃9即绞2，垄4－侧二氨去基－塑6，给7－闸二异嗓丙醇群喋啶合，为倡弧菌陕抑制竞剂。村该试浪验用壤于弧袖菌属举、气旨单胞撤菌属虹和假陷单胞各菌属像的鉴汽定。浑取2怖，4慕－二黑氨基弟－6榴，7酿－二古异丙帖醇喋年啶1足50午mg邻，溶籍于1慢0m朱L1尼：1就的乙饶醇：扮二乙劲基乙贝醚中普。把戚6m爹m大相小的护滤纸墙片浸建入该鞭溶液伏后取唐出，密在空受气中扎晾杆螺，然德后放主在带键菌的匙半固食体培捆养基雹上做俊扩散惜敏感脆试验肠。忙三、痕血清环学试饶验异贝血清标学反从应是裕指：吩相应恨的抗效原与落抗体慎在体赏外一促定条房件下椒作用禽，可朵出现妖肉眼翼可见些的沉脆淀、上凝集变现象第。在皮食品厅微生乏物检程验中糠，常订用血宅清学沈反应役来鉴渴定分陵离到丹的细亏菌，策以最醋终确犯认检慎测结盐果。筒克血清脖学反胳应的赔一般总特点蚂：肤盼1)柜抗原利体的余结合刘具有站特异料性，讨当有眉共同谱抗原妄体存画在时虑，会刻出现狭交叉购反应汇。凤捧2)乞抗原察体的耽结合咏是分说子表饥面的类结合收，这域种结悟合虽糖相当级稳定给，但巷是可宝逆的泻。岭答3)拢抗原园体的苹结合农是按扭一定膜比例塘进行筛的，盲只有章比例票适当虑时，查才能垮出现妖可见饲反应繁。邻摔4)横血清躺学反玉应大闲体分箩为两成个阶猫段进呜行，胃但其合间无匆严格迁界限弱。第著一阶降段为像抗原奉体特荐异性叛结合损阶段锄，反脆应速厨度很腐快，贤只需暖几秒白至几慈分钟播反应萍即可理完毕独，但摊不出顷现肉似眼可帐见现属象。叉第二枣阶段接为抗召原体茂反应翼的可梦见阶逮段，喉表现诊为凝昏集、酒沉淀柱、补腰体结列合反阅应等共。反伶应速台度慢攻，需叠几分忌、几含十分鲁以至谣更长真时间皆。而想且，填在第踪二阶额段反旦应中归，电顷解质纤、根PH伞、温盛度等扔环境混因素下的变窗化，润都直尘接影模响血剪清学炸反应伤的结突果。畏馋习惯踢上将悬经典腿的血任清学恨反应差分三帖种类嫁别：释凝集甚反应刷、沉君淀反谋应和狡补体收结合相反应百。怕１、虚凝集娘反应绿秒颗粒誓性抗镜原（赞细菌额、红闪细胞吹等）划与相爆应抗降体结兄合，丢在电恭解质翅参与滤下所提形成束的肉胶眼可授见的只凝集飘现象往，称趴为凝奇集反索应（答Ag燃gl趣ut偶in盏at否io映n死re写ac壶ti日on篮）。安其中脚的抗边原称伶为凝岛集原啦，抗串体称狐为凝屑集素迫。在对该反蹦应中备，因阻为单酱位体绣积抗腊体量督大，节做定撑量实震验时全，应梯稀释攻抗体狡。弱商１）浮直接欢凝集培反应骂