病原微生物实验室生物安全管理手册范本

微生物实验室生物安全管理手册***疾病预防控制中心生物安全管理体系文件目录备注备注序号名称1实验室人员和项目准入制度2人员培训考核制度3人员健康监护制度4生物安全检查制度5实验室人员生物安全行为规6事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度7实验室生物危险标识使用规定8实验室务管理制度9实验室菌〔毒种和生物样本安全保管和档案管理制度10实验室废弃物管理制度11实验室消毒隔离制度12实验室应急处置预案13实验活动生物安全标准操作规程一、实验室人员和项目准入制度..PAGEPAGE10/16目的规生物安全二级实验室的使用和管理,保证操作人员,实验对象和环境安全,确可靠。适用围适用于生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的所有检测工作。职责进入生物安全二级实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。具体要求：概述,列规定：,验室。,必须遵照生物安全手册的规定进行。实验室污染的空气需通过高效过滤器后方能排出室外。必须经过消毒后方可进入公共污水系统。,实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下,才能携出实验室。,操作以保证实验室空间的安全。实验室运行的安全性要求本手册规定的各项要求,首先是为了保证实验室的安全运行,包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染,确可靠。实验室工作的质量要求,,据,,必须明确完整。实验室操作规程启动实验室开始工作前半小时。开启实验室主电源,使实验室及生物安全柜投入运行。开启顺序：①开启屋顶风机②开启全排风③开启空调④开启安全柜⑤打开房间紫外线灯。个人防护工作人员按照下列要求进行个人防护,才能进入实验室区域：〔1在更衣室中换穿工作服和工作鞋。〔2在清洁区,根据实验要求做好防护。〔3,在胶乳手套外加带一次性塑料手套需加戴防护面罩。进入实验室,再开启下一道门。,关闭房间紫外线灯。检查实验室运转是否正常。做好开始实验的各项准备。启用标本、试剂,使其在冰箱外停留的时间尽可能短。操作,避免产生汽泡或汽溶胶。,,1,离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。观察结果不打开容器的观察允许在生物安全柜外进行,否则,必须在生物安全柜观察结果。准予携出实验室的材料确保不含感染性的实验材料,才可以从实验室携出。容器表面应用75%乙醇消毒。实验室清洁每一实验步骤完成后,均应清理台面。所有用过的试剂均应归还原位；使过的吸管等长形器材放入储存污物的盒；锋利品放入专用的污物盒；纸巾软物品放入污物袋；在台面上喷洒75%乙醇,保持20分钟,然后以纸巾擦干。实验室的其他表面,也应经常用75%乙醇擦拭。污染物品处理放置污染物品的容器装满时,应更换新的容器。实验结束后,对用过的污染物品进行高压消毒。更换工作服。工作完毕的更衣顺序是,先用消毒液浸泡手套5分钟,然后依次除去口罩、防护服、鞋套,放入高压消毒袋,再次浸泡手套后除去手套,用75%酒精棉球擦面部裸露部位。实验室消毒每次工作完毕,生物安全柜用75%酒精擦拭台面,消毒液消毒地面,开启紫外线灯照射1小时后,逐一关闭实验室送风和通风设备{关闭顺序与开启顺序相反}。实验记录与实验报告实验记录,,数,以避免录入错误。实验记录带出实验室80,6阁着实验室玻璃窗由清洁区工作人员抄录一份。实验记录录入计算机24小时录入计算机。记录准确的实验报告和录入时间。再按照准确地记载实验结果和数据书写记录保存1周,实验记录录入后,一般不得修改。因数据记录错误,录入错误,或实际观察到的实验结果改变,必须更改记录时,不要删除已经录入的描述和数据,而应录入新的描写和数据,并注明更改原因。实验室记录备份每月一次,将上月计算机的实验记录做出备份,备份的实验记录不得修改。实验室负责人应定期检查实验记录,核对备份与原始的实验记录,对记录中的缺陷提出修改意见。实验记录的保存年限,>,备份的实验记录一般永久保存。出具实验报告在需要出具正式实验报告的场合,报告由实验者填写署名,交实验室负责人记录核对后签字再由单位签发人签字并加盖公章发出。标本保管规则标本进入实验室,的等相关信息。实验目的等相关信息。标本的保管,,并重新备份。标本的销毁确定不用的标本,采用高压灭菌后焚烧的方式销毁。实验室装备保养实验室定期保养实验室的定期保养按照提供实验室设备厂商的规定进行,主要是对机械和电器部分进行维护。实验室仪器设备的保养和维护,其它仪器设备也应根据实际需要清洁保养。实验室仪器设备的维修更换仪器设备需要更新,需要离开实验室进行维修,或损坏需要更换,以及必须临时进入实验室使用,使用完毕后必须撤出实验室的贵重仪器,在撤出实验室之前必须以恰当的方式严格消毒方可处理或重新投入使用。意外情况处理实验室意外事件的处理原则,例如实验过程中。由于标本、试剂益处溅落造成操作台或地面的污染等,应立即喷洒消毒液待消毒液彻底浸泡30,2并检查处理效果。,实验室,贴禁止入的标识。用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域,24小时再进行终末消毒,实验室负责人除立即采取对应措施外,应向上级部门报告,并填写意外情况登记与处理记录表。,,在实验室昏倒或发生身体严重不适,也有实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作,验室人员或派人迅速着装进入实验室,清除造成伤害的原因,清理实验材料,帮助受伤人员紧,,方可重新使用。,,首先进行局部处理,用肥皂和水清洗污染的皮肤,挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液,用肥皂和清水冲洗净。实验室负责人应向上级部门报告,对受伤害者进行隔离观察,同时根据情况预防性用药,并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。实验室人员的隔离观察,[]同时给予有效的隔离治疗二、人员培训考核制度目的规实验室相关人员的培训考核适用围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员培训考核制度实验室工作人员的培训新工作人员进入实验室前,必须经过培训,取得进入实验室工作的资格。培训由实验室负责人组织进行,并指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。培训容包括：〔1相关检验的国家诊断标准、处理原则以及本手册容。〔2实验室所有设备的使用方法。〔3个人防护方法。〔4实验室基本技术。〔5实验室消毒净化的方法。实验室工作人员的资格考试新工作人员经过培训后,由实验室负责人组织考核。通过考核后,还须与有资格的工作人员一同工作3个月,才能获得独立进行实验室操作的正式资格。三、人员健康监护制度目的规实验室相关人员的健康监护适用围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员健康监护制度工作人员从事工作前必须进行HIV每半年进行一次HIV并保留血样一年以上。工作人员应每年进行一次体检,并将可能涉及生物安全危害的体检结果存档,物安全危害是否发生。从事涉及生物安全危害人员的健康状况进行跟踪。实验室工作人员的适合工作状态不力下降的状况：妊♘、在实验室连续工作4小时以上或其他原因造成的疲劳状态。四、生物安全检查制度目的规实验室生物安全,保证设备正常运行。适用围适用于生物安全涉及的仪器设备〔比如生物安全柜等3、生物安全检查制度,22个41个,25,每平板菌落2,需要对实验室或污染部位进行甲醛熏蒸消毒。五、实验室人员生物安全行为规目的规实验室人员的生物安全行为规适用围适用于生物安全涉及的所有工作人员生物安全组织管理与行为规组织框架图单位法人{或授权}负责人↓实验室负责人↓生物安全员↓实验室工作人员各类人员相应行为规}负责人〔1负责组织生物安全实验室的立项、选址,施工队的资质验证。〔2负责成立生物安全委员会负责生物安全,制定管理制度,监督有关法规和操作规程的执行情况。〔3负责组织对造成外环境污染、实验室污染、人身伤害事故的调查与处理。实验室负责人〔1组织制定安全手册、操作规程等文件。〔2按照上述文件要求组织实验室的各项工作,保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠。〔3组织进入生物安全二级实验室的人员进行业务培训,保证工作人员熟知微生物的操作规程和技术,掌握实验室设备的特殊要求并熟练操作,对培训的结果进行考核,决定进入实验室工作人员的资格。生物安全员〔1,立即停止工作并上报实验室负责人。〔2与有关人员讨论研究安全政策的问题。〔3确认所有工作人员都具有进入实验室工作的资格。〔4为所有人员提供连续性的安全要教育与指导。〔5针对操作程序、技术方法和各种条件要求的变更,以及新设备的引进,为全体工作人员提供最新的安全文献和信息资料。〔6定期检查实验室的各项技术参数,组织对实验室装备的常规保养。〔7并向实验室负责人员和安全委员会报告调查结果和提出建议。〔8当任何实验室工作人员的疾病或缺勤与工作有关,并被记录为可能的实验室获得性感染时,协助随访调查其疾病或缺勤情况。〔9监督消毒净化程序得到正确执行事件和事故进行详细的书面记录。〔10确保任何需要修理和维护的仪器设备在消毒与净化之后方可运出实验室。生物安全员由主管检验师以上的人员承担,必须具备如下资质：具有实际工作的经验；对操作的微生物有全面、完整的了解；具有组织实验室工作的能力；对工作有高度的责任心。实验室工作人员〔1生物安全二级实验室,只允许进行实验室目的规定的操作,与此无关的活动一律不得进行。〔2必须按规定进行个人防护,方得进入实验室。〔3保持实验室环境的整洁,每项工作完成之后,必须清理和清洁台面,离开实验室〔4注意个人的健康状况,出现身体不适情况,应及时向实验室负责人报告。〔5实验室禁止饮食、吸烟、访客和喧哗。实验室工作人员的技术要求〔1必须了解实验室安全原理,熟悉本手册的各项规定,熟记紧急情况下的正确应对措施。〔2掌握病原微生物操作的基本要求,正确、安全地实用标本,避免污染,以获得准确、可靠的实验结果。〔3必须熟悉相关实验的国家标准,能够完成标准所规定的任务。〔4一旦发生意外,立即向生物安全员汇报。4、个人防护程序个人防护用品的使用要求N951216,31860型如有,使用应始终保持口罩与脸紧贴。一次性使用口罩应在使用后4,,换。,重复使用前应进行彻底消毒。防护服：实验人员工作时应穿戴一次性防护服。最好是连体式,防水及抗静电性能好,面部、腰部应有弹性收口或拉绳收口。,根据需要及时更换。个人防护用品的穿戴顺序进入清洁区前穿上普通白大衣和实验室专用鞋。进入清洁区时穿戴一次性口罩,手术帽,套。注意将手套和鞋套分别套在袖口和裤口外。戴N95口罩及防护面罩、穿防水隔离服、防水鞋套、再戴外层手套。个人防护用品脱卸顺序在半污染区先用75%{}。N95,隔离服的外表面,应从里反脱,以保里面超外}。将脱掉的物品放入专用消毒袋中就地高压消按有关规定消毒处理。75%乙醇溶液消毒层手套。袋高压消毒。六、事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度1、目的2、围3、职责4、工作程序事故分类凡违反各项规定所造成的事故均为责任事故,按其经济损失和人身伤害和大小分为以下几种：损失情况小事故损失情况小事故一般事故大事故重大事故经济损失≤100100~10001000~10000≥10000人身伤亡一人受伤,一人受伤,休工3两人受伤或一人受伤,三人以上受伤,休工休工≤3日 日以上 休工1-6个月 一年以上,或一人致残或死亡。事故的处理级领导。事故发生3事故发生后5会,对事故进行分析并对事故责任人作出处理事故报告处理单等记录材料由业务质量管理科归档保存责任人技术档案。七、实验室生物危险标识使用规定目的规生物安全二级实验室的使用和管理。适用围适用于生物安全二级实验室。具体要求：在具有生物安全二级实验室门口加贴专门的生物安全警示标识,,造成感染的危险。在有可能对人员造成威胁的生物标本储存处加贴生物安全警示标识,险标本带入安全区域对人员造成威胁。八、实验室务管理制度目的确保生物安全二级实验室的正常运行、实验人员、物品和环境的安全适应围适应于生物安全二级实验室。职责进入生物安全二级实验室工作的所有工作人员严格遵照本管理制度执行。基本制度在主实验室设置清洁区、半污染区和污染区。入口处贴有醒目的生物危险标志。非实验室有关人员和物品不得进入。,或者进行其他与实验无关的活动。验室负责人的批准。,降低剪除和气溶胶的产生。,严禁口吸。,方可开始工作。实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育,实验室工作。实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。,疫苗必须进行免疫注射。所有培养物、废弃物在运出实验室前必须经可行的消毒方法进行消毒。活性物质溅出后要随时消毒。实验室特殊管理制度,或必须经实验室负责同意方可入。毒处理程序。实验室人员应接受必要的免疫接种和相应的抗体水品测定。,,,立即进行紧急处理。具体措施按《实验室应急处置预案》执行。并按规定报告给有关部门。,禁止在实验室使用锐器。剩余的标本应密封后置于适当条件下保存。实验过程中应使用鉴定合格的二级生物安全柜。,九、实验室菌〔毒种和生物样本安全保管和档案管理制度1.目的规实验室菌〔毒种和生物样本的保管和档案管理2.适用围3、和生物样本的保管时上报科长和中心主任。移及销毁情况、保存者、部门负责人等。2人参加办〔毒种安全防工作。4、档案管理制度、非实验室人员不得随意查看实验室记录销毁、专人负责保管感染者档案、未经领导批准不得向无关人员或单位提供任何实验室及感染者信息、HIV性报告及告知受检者本人或有关单位十、实验室废弃物管理制度目的规废弃物处理适用围尖锐器具和其他废弃物的处理。具体方法：尖锐器具的处理,璃器材。段、重新盖帽或从注射器上取下,禁止用手直接操作。用过的针头、注射器直接放入防刺破,进行高压消毒处理。尽可能使用带针头套的的注射器、无针头的系统和其他安全装置。,,盛污染针、锐器及碎玻璃的容器在丢弃前必须彻底消毒。废弃物的处理实验后的废弃物如不及时处置则会污染环境,从而对人造成危害,格按照规定执行。,待实验结束后立即就地高压消毒。并及时加盖。,,加盖密封。,就地高压消毒。,确保在121,高压30,要求。所有实验产生的废弃物,必须经严格高压消毒后方能运出实验区,焚烧处理。十一、实验室消毒隔离制度目的规微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。适用围微生物实验室和生物安全二级实验室。职责所有工作人员都必须遵从本规程。具体步骤实验室基本要求,区,并有明显标识。2000的含氯消毒剂溶液浸湿的脚垫。,须带出时必须严格消毒。并防止操纵过程中的交叉污染。培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。血清学试验、样品的处理和分装应在BSL-2安全柜进行。,以防溅出。实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物处理程序进行消毒处理。,应有专业人员立即消毒和清理。,,并进行空气消毒。,必须按有关规定消毒双手。消毒方法用含有效氯1000的消毒液或75%,20分钟以上。实验器材的分类消毒：将使用后的锐器方入防刺破、防渗漏的密闭专用锐器处置盒,121℃高压消毒302000mg/L的含氯消毒液浸泡1处理时应避免皮肤损伤。2000mg/L的消毒液或,20分钟以上。将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121301000mg/L,30-60分钟。75,1-3分钟。1,每立方米空间安装紫外灯瓦数≥1.5W,距紫外灯1米处照射强度≥70W/㎡。80ml/m36小时后方可带出。2000mg/L的消毒液喷洒拖地。,12130分钟废弃物集中收集、焚烧处理。实验室高压消毒安全操作以及不正确使用而导致的灾难性后果。按照操作规程使用高压锅合上高压灭菌器左侧总电源开关。注水至加热器罩的水位水准器配件尖端浸入水中为止。设定灭菌温度,先按"编集"键,然后按上下键调节到灭菌所需温度,然后按"实行"键,设温度存进程序。设定灭菌时间,先按"编集"键,然后按上下键调节到灭菌所需时间,然后按"实行"键,设时间存进程序。按实行此时灭菌灯闪烁。灭菌程序自动停止运行。0取出灭菌样品。,并按照规定进行设备的维护。每1,每月检测一次消毒效果。或门必须拧紧。,保证消毒灭局效果。高压灭菌安全操作步骤废物在灭菌袋中的体积不能超过袋子体积的3/4,否则蒸汽不能进入所料袋影响灭菌效果。,,在存放期间确保袋子无损坏。,取出物品放在废物收集处。高压温度和时间设置正确30,,清理困难。十二、实验室应急处置预案目的规紧急情况的处理工作。适用围微生物实验室和微生物安全二级实验室。职责遇有紧急情况所有工作人员严格按此规程处理。具体要求：,,等消毒液彻底浸泡30,灭菌。并填写生物安全二级实验室意外情况登记与处理记录表,实验室负责人应指导这些处,并检查处理效果。,,由实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作,用消毒液清洗未破损的皮肤表面,伤口以碘伏消毒眼睛用洗眼器反复冲洗。有在同一实验室工作人员或派人迅速着装进入实验室,清除造成伤,,,,方可重新使用。感染性液体,首先进行局部处理,用肥皂和水清洗污染的皮肤,挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液并包扎伤口。在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面等情况,首先使用喷淋装置,尽快将污染物冲洗掉,然后再进行局部处理。暴露的粘膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。实验室负责人应向上级部门报告,对受并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。,,,疏散现场的所有人员,对所有暴露人员提出相应的医学建议。立即通知实验室负责人及生物安全员。至少在1,填写意外情况登记与处理记录表。培养物等传染性物质的破碎被传染性物质物质污染的小玻璃瓶及其他容器破碎时,用布或纸巾覆盖,尔后将消毒剂倾倒其上,放置30分钟。其后即可清除掉,玻璃碎片应当用镊子清理。污染区域应当用消毒剂清洗。破碎物品清理时如果使用了簸箕,应将其进行高压灭菌或用有效的消毒剂浸泡24小时。清理使用过的布、纸巾、抹布及拖把,放入污染废弃物容器中。上述步骤均应佩戴手套。,,弃入污染废弃物容器。试管破碎于密闭式安全离心杯中所有密闭式安全离心杯在生物安全过程中装载和卸载。如果怀疑发生了破损,应当将其盖子拧松；尔后,将整个离心杯高压灭菌。蓄意破坏坚固、厚重的门、牢靠的锁具以及限制出入,都是合适的防措施。发现蓄意破坏情况后报告,,处理记录表。十三、实验活动生物安全标准操作规程〔一艾滋病初筛检测实验操作规程目的保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。适用围艾滋病病毒抗体ELISA实验。具体要求样品采集,-20℃样品运送样品转送,除特殊需要外,必须是血清或血浆,置于带有盖帽的试管,或将塑料试管用酒精灯封死,,,,,,容器外标有HIV,4℃以下运送。这样同时附送检单。样品登记和处理,,,结果和实验方法及所用试剂情况。,等情况。如有溢漏应立即将尚存的血样移出,并对管壁和盛器消毒。检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。1-2300015分钟吸出上清,2-8置于-20℃冰箱。实验准备按试剂盒要求时间恢复室温。检查并记录冰箱、温箱温度。,标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。加样和稀释,每道上的酶标板条必须保持完整{不足部分可用废弃的微孔添充},检查加样器加样刻度是否与试剂盒要求的加样,,加样量和稀释度严格按照试剂盒说明书规定的操作,一般先加样品稀释液后再加入样品。加,,最好使用多孔道,使用时注意防止吸头间的交叉污染。温育贴好封板膜,,最好选择湿育方法。洗板,再换上洗液瓶。,,根据所用酶标板的条数确定,加酶结合物对于二步法ELISA,按试剂盒要求完成。,需加自配的底物应现配现用。终止反应在规定的时间用试剂盒中的或根据要求自行配置的终止液终止反应。酶标仪读物按照试剂盒的要求选择滤光片,确定空白孔位置,式,读数并打印结果。所用仪器在使用后及时填写使用记录。结果判断计算根据试剂盒说明书要求的阴阳对照OD,阴阳性对照OD之,,整个实验重做。在指控图上标出外部指控血清的S/CO值判断实验结果是否被接受。,根据试剂盒要求计算cutoffcutoff,大于或等于cutoff值得标本为阳性,在cutoff±10%的标本为灰色带反应。阳性及灰色反应区标本,用原有的试剂盒另一种试剂重复试验。结果登记和报告,将OD,HIV阴性结果填写HIV抗体筛查阳性送检单。冷藏运送送确认实验室。支持性文件全国艾滋病监测工作规艾滋病实验室安全操作及防护措施〔二、结核杆菌实验室生物安全规程实验室管理制度〔1实验室入口处必须贴上生物危险标志,注明危险因子,生物安全级别,试验室负责人和相关负责人和。〔2实验室应有明显的区域划分,清洁区,办污染区和污染区。〔3无论进入实验室时间长短,必须填写工作日志。要严格遵守实验室的一切操作规程。〔4进行结核菌操作时,需有两名工作人员同时进入实验室,尽量避免单独工作。〔5在对大批量的痰标本和菌株进行分离培养和药敏试验前,讨论必要时加强预防措施。〔6,,并做好登记记录7外来进修入实验室。标本采集人员安全要求〔1标本采集人员的防护：痰标本有病人自行留取,采集咽拭子等特殊标本,采集人员应穿防护服,戴一次性口罩,帽子,戴医用手术手套。〔2采集标本污染器材的处理：采集标本的痰盒,试管等污染器材军需高压处理。标本运送安全要求4cm,高2cm,运送箱及时用乙醇或是碳酸