中药制剂检测的新技术中药指纹图谱技术概述 中药制剂检测技术课件

项

目

七追求极致-中药制剂检测的新技术全面检测和控制中药制剂质量中药指纹图谱概述药品安全，重于泰山中药指纹图谱（FingerprintsofTraditionalChineseMedicine）是指中药材、饮片及其制剂经适当处理后，采用一定的分析方法与技术所建立的能够标识其化学特征的色谱图或光谱图。特点：中药指纹图谱是一种综合的，可量化的检验技术，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药及其制剂质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。中药指纹图谱概述（1）按研究与应用对象分类

●中药材指纹图谱●中药原料（包括饮片、中药提取物）指纹图谱●中间体（工艺生产过程中的中间产物）指纹图谱以及中药制剂指纹图谱（2）按研究方法、手段分类●中药化学指纹图谱●中药生物学指纹图谱（3）按质量控制目的分类

●指纹图谱●特征图谱1.

指纹图谱的分类中药指纹图谱概述（1）中药指纹图谱建立的原则中药指纹图谱的建立，应以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征性和稳定性三个基本原则。2.

中药指纹图谱建立的原则和研究思路①系统性指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部位所含大部分成分，或指标性成分的全部，如中药两头尖中抗肿瘤的有效成分为皂苷类化合物，则其指纹图谱应尽可能地反映其中的皂苷类成分；银杏叶的有效成分是黄酮类和银杏内酯类，则其指纹图谱可采用两种方法，针对这两类成分分别分析，达到系统全面的目的。中药指纹图谱概述②特征性

指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。③稳定性

所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度，即不同操作者、不同实验室所重复做出的指纹图谱应在所允许的误差范围内，以体现其通用性和实用性。因而要求包括样品制备、分析方法、实验过程、数据采集、处理、分析等全过程都要规范化操作，同时，还应建立相应的评价机构，对其进行客观评价。2.

中药指纹图谱建立的原则和研究思路中药指纹图谱概述（2）中药指纹图谱研究思路中药指纹图谱构建的一般程序包括：设计方案、样品采集、方法建立、数据分析、样品评价、方法检验和建立标准指纹图谱及其技术参数。2.

中药指纹图谱建立的原则和研究思路中药指纹图谱概述2.

中药指纹图谱建立的原则和研究思路中药指纹图谱构建思路示意图中药指纹图谱概述

中药指纹图谱的建立可针对不同用途，选用不同的分析方法。如对于药品进行质量控制，应考虑生产企业和药检部门常规配备的仪器，方法耐用，一般以光谱法、气相色谱法和高效液相法为主。若用于配伍理论或新药研究，特别是化学成分与药理、药效相关性研究，可考虑联用技术。方法检验室是在方法确立后的一段时间内对更多未知样品进行检验分析，进一步考察方法的可行性和耐用性。

天然药物指纹图谱技术是世界范围内被广泛认可的质量控制手段。英国草药典(1996)印度草药典(1998)、加拿大药用及芳香植物学会、德国药用植物学会、WHO草药评价指南(1996)、美国草药典(1999~2001,Monographs)均接受色谱指纹图谱。美国食品和药品管理局(FDA)于2000年8月发布的“植物药产品行业指南(征求意见草案)”中,指出特定植物药品种用色谱指纹图谱来进行质量控制是可以接受的。我国食品药品监督管理局(SFDA)于2000年发布了“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)”,首次以中药指纹图谱作为中药质量标准的一个新概念列入了药品管理法规。知识链接中药指纹图谱概述（1）样品的收集为了确保指纹图谱的系统性，必须广泛收集具有代表性的样品。●一般要求不少于10批样品的收集数量（药材的批次是指不同产地、不同渠道或不同时间获取的独立样品，与成品的批次不同，要注意区分），每批供试品中取样量应不少于三次检验量，同时要有详实记录。3.

中药色谱指纹图谱建议的方法与技术要求中药指纹图谱概述●原药材尽可能固定产地(来自GAP基地药材或地道药材)、采收期、炮制方法。对光线稳定，疗效稳定，无临床不良反应的药材批次应重点选择。还应收集不同产地、不同采收期的药材，以便进行指纹图谱的比较研究。●中间体、注射剂样品的收集应重点选择工艺稳定，疗效恒定，无不良反应的批次。●留样应不少于实验用量的3倍。3.

中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求中药指纹图谱概述（2）供试品溶液的制备供试品制备的每一步骤均必须标准化操作，以保证样品分析具有良好的精密度、重现性、准确性及样品间的可比性，主要操作过程及数据应详细记录。（3）参照物的制备●一般选取样品中容易获得且含量较高的一个主要活性成分或指标成分作为参照物。●参照物主要用于指纹图谱技术参数的确定，如特征峰（共有峰）的相对保留时间，峰面积比值等；并有助于图谱的稳定性、重现性的考查。

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中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求中药指纹图谱概述（4）实验方法和条件的选择●中药指纹图谱的建立与应用关键在于分析方法，包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等，应根据分析试样中所含化学成分的理化性质选择适宜的测定方法。●以色谱法最常用，一般首选HPLC法，对于易挥发性成分选用GC法，对于生物大分子可采用凝胶色谱法、CE或HPLC-MS；对于成分复杂的试样，必要时可以考虑采用多种测定方法，建立多个指纹图谱。

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中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求中药指纹图谱概述（5）中药指纹图谱的方法验证①精密度试验：主要考察仪器的精密度。②重现性试验：主要考察实验方法的重现性。③稳定性试验：主要考察供试品的稳定性。

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中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求中药指纹图谱概述（6）色谱指纹图谱的建立和辨认●试验条件确立后，将获得的所有样品的指纹图谱逐一研究比较，首先找出药材色谱具有指纹意义的各个峰，给以编号，将药材、半成品和成品之间的图谱比较，如有缺峰，则缺号，要保持峰的编号不变，便于清楚地考察相互之间的相关性。●指纹图谱的辨认应注意指纹特征的整体性。

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中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求中药指纹图谱概述（7）指纹图谱的校验与复核●应对所建立的指纹图谱按有关规定要求进行实验条件、方法及结果的校验与复核。（8）指纹图谱的分析与评价●根据指纹图谱所获取的信息，建立指纹图谱分析比较的重要参数（共有峰、重叠率、N强峰、特征指纹等），计算特征指纹的相似度，进行指纹图谱的评价。

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中药色谱指纹图谱建立的方法与技术要求请分析指纹图谱技术与传统的定性及定量分析方法有何显著差异?分析色谱及光谱技术在指纹图谱研究中地位差异？作为指纹图谱原始数据的获取来源，紫外光谱法存在哪些优劣方面？课堂互动中药指纹图谱概述小结1．建立中药色谱特征图谱应满足专属性、重现性和可操作性的要求。2．收集有代表性的样品（中药制剂、中间体、原料药材）各10批次以上，每批样品需重复三次实验，样品应均匀并具代表性；以确保建立的图谱具有特征性。3．制备供试品溶液时应选择合适的溶剂进行提取分离，尽可能保证能够充分反映供试样品的基本特性。测定方法的选择应能确保图谱