小麦田抗药性杂草监测鉴定防治技术规程

小麦田抗药性杂草监测鉴定防治技术规程1范围本文件确立了小麦田抗药性杂草监测、鉴定、防治技术要点以及注意事项。本文件适用于XX省小麦田杂草化学防除技术的需要。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T1155.4农药室内生物测定试验标准除草剂第4部分：活性测定试验茎叶喷雾法NY/T1859.1-2010农药抗性风险评估第1部分：总则NY/T1859.4-2012农药抗性风险评估第4部分：乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂抗性风险评估NY/T1859.7-2014农药抗性风险评估第7部分：抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估3术语和定义NY/T1667-2008界定的以及下列术语和定义适用于本文件。敏感种：能被登记除草剂的推荐剂量杀死的杂草种类。敏感生物型：能被除草剂登记的推荐剂量杀死的杂草生物型。抗性生物型：施药技术正确的前提下，敏感种内不能被除草剂登记的推荐剂量杀死的杂草生物型。靶标抗药性:主要是由靶标位点突变导致的靶标酶敏感度降低或是由靶标酶的过量表达引起的。非靶标抗药性:靶标抗性之外的抗性统称为非靶标抗性，主要包括杂草对除草剂的渗透、吸收和传导减少，除草剂的解毒代谢作用增强以及对除草剂的屏蔽作用或隔离作用等。4小麦田抗药性杂草监测4.1确定重点监测区域 根据除草剂田间用药历史以及种植户药效调查情况，对存在潜在除草剂抗药性杂草进化的田块进行定期，定位观察定点、定位连续观察（至少2-3年1次）。4.2取样方法与样本数量种子：（药后）收集杂草成熟的种子，将每块麦田随机收集的5个取样点杂草种子放入一个样品袋（透气不易发霉、容易晾干），不同杂草种子放入不同的样品袋中。小粒种子（如播娘蒿、荠菜）约200－300g；大粒种子（如菵草、日本看麦娘）500－800g。草籽采集后，填写记录表格（见附表）；植株：（植株）药后至少2周后采集存活植株，单株保存；填写记录表格（见附表）。4.3采集信息记录记录经纬度、疑似抗性杂草密度、其它杂草发生密度、用药历史（尤其是相同作用机制除草剂的使用情况，，包括除草剂种类，时间和用量）、作物种植密度（株行距）、耕作模式、前茬作物、施肥、排灌方式等农事操作。4.4样本保存与运输种子：37℃烘干至少2天，密封，干燥保存在4℃冰箱直至种子寄出到检测点；植株：植株根部带土，带冰袋低温寄出（从采集到寄出不超过两天）。4.5抗性分区标准及普查间隔根据监测结果，分成无抗性区、低度抗性区、中度抗性区和高度抗性区。普查间隔:无抗性区4-5年一次；低、中抗性区提高监测频度，至少2-3年普查一次；高抗性区每年普查，评估抗性损失，加强治理。4.6其他相关参数评价除草剂:作用靶标单一、持效期长、多年使用历史、同类作用机制的药剂抗性杂草发生频度较高；靶标杂草:杂草世代周期短、繁殖系数高、种子寿命长、抗药性突变起始频率高和适合度高；农事操作:同一类除草剂每年施用次数多于2次、种植作物种类单一、面积大、连作或使用相同作用方式除草剂的作物轮作方式等，抗药性产生以后对农业生产的危害等。5小麦田抗药性杂草鉴定技术5.1抗性类别的确定首先对推荐剂量进行筛选，通过整株杂草生物量（或/和死亡率）对除草剂系列浓度的反应，建立剂量与生物量的关系，以地上部生物量受药剂的抑制程度来评价其对除草剂抗性。5.2抗性程度的划分抗性指数（RI）：同一除草剂对杂草抗性生物型GR50（ED50或IC50）与其敏感生物型GR50（ED50或IC50）的比值。通过室内生物测定试验，以抗性指数评价抗性程度：无抗性（RI≤1），低抗性（3≥RI﹥1），中抗性（10﹥RI﹥3），高抗性（RI≥10）。5.3抗性机理的鉴定靶标基因位点突变：分别提取敏感和抗性植株DNA，根据靶标基因保守区序列设计引物，进行基因扩增和测序，对比分析靶标基因序列差异。靶标酶过量表达：根据不同除草剂的作用靶标酶，选择测定不同靶标酶活性，主要包括过氧化物歧化酶（SOD）、乙酰乳酸合成酶（ALS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACCase）和5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶（EPSPS）等，分别在敏感和抗性植株内测定靶标酶活性差异。6小麦田抗药性杂草防治技术6.1农艺措施管理方法利用轮作、机械除草、生物防治以及人工除草等措施防除杂草，注意田间管理，尽量减少化学防治措施的使用次数。采用深翻、杂草种子截留技术等，抑制杂草萌发或减少土壤杂草种子库含量。6.2合理使用除草剂遵守除草剂的轮换使用规则：避免同一类型或结构相近的除草剂长期使用；轮换使用对杂草作用位点复杂的除草剂；轮换使用作用机制不同的除草剂或同一除草剂品种的不同类型