金枪鱼蒸煮液酶解工艺优化及风味海鲜调味汁的制备

金枪鱼蒸煮液酶解工艺优化及风味海鲜调味汁的制备陈启航;朱秀花;俞瑁;余娟;方旭波;陈小娥;江旭华【摘要】TheSkipjackTunacookingliquorwaschosenasamaterialtoproduceflavorseafoodsauce.Withdegreeofhydrolysisasindex,thesolubilizedproteinscontainedinflavorseafoodsaucewascollectedandhydrolyzedbyfivecommercialenzymes,includingneutralprotease,alkalineprotease,papain,pepsinandpancreatin.Alsoresponsesurfacemethodologywasemployedtooptimizeenzymatichydrolysistechnologyonthebaseofone-factor-at-a-timeexperiment.Orthogonalexperiment(L9(34))wasusedtoresearchtheinfluenceofyeastdosage,fermentationtemperature,fermentationtimeonodorvalue.Andsterilizationconditionwasdetermined.TheexperimentresultsindicatedthatthesuitableenzymatictechnologicalconditionsforSkipjackTunacookingliquorwerepapainwithadosageof300U/g,temperature56°C,andhydrolysisfor4h,theenzymaticliquidaddedtheamountofyeast0.75%,fermentationtemperatureandthereactiontimewere35Cand60min,themethodhadmuchdeodorizationefficient.Theoptimalsterilizationwas90Cfor30min.Thetunasaucewasdevelopedwithyellow-brownandastrongfishflavor,moreover,thecontentofaminoacidnitrogenwas0.68g/100mL,canbefullydevelopedandutilized.Thus,itisakindofnaturalcondimentwithgreatdevelopmentprospect.%以金枪鱼蒸煮液作为原料，制备风味海鲜调味汁.本实验以水解度为指标从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶中筛选得到最佳酶，在单因素实验基础上，通过响应面优化酶解工艺条件，利用正交实验L9(34)研究不同酵母添加量、发酵温度、发酵时间对腥味值的影响，并确定最适杀菌条件.结果表明，以木瓜蛋白酶酶解金枪鱼蒸煮液，最佳酶解条件为:酶解时间4h,酶解温度56°C,酶添加量300U/g;酶解液经过添加酵母0.75%在35°C下发酵60min,去腥效果较佳;最佳杀菌条件为:90C下灭菌30min.研制出的金枪鱼调味汁呈黄棕色、鱼香味浓郁，氨基酸态氮含量0.68g/100mL,可以充分开发利用,是一种很有发展前景的天然调味品.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷)，期】2018(039)009【总页数】7页(P124-130)【关键词】金枪鱼蒸煮液;酶解技术;响应面分析法;脱腥;调味汁【作者】陈启航;朱秀花;俞瑁;余娟;方旭波;陈小娥;江旭华【作者单位】浙江海洋大学东海科学技术学院，浙江舟山316000;浙江海洋大学食品与医药学院，浙江舟山316022;浙江海洋大学食品与医药学院，浙江舟山316022;浙江海洋大学食品与医药学院，浙江舟山316022;浙江海洋大学食品与医药学院，浙江舟山316022;浙江海洋大学东海科学技术学院,浙江舟山316000;浙江海洋大学食品与医药学院,浙江舟山316022;浙江富丹旅游食品有限公司，浙江舟山316104【正文语种】中文【中图分类】TS254.9金枪鱼,又叫鲔鱼、吞拿鱼，具有低脂肪、营养丰富等优点［1-2］。金枪鱼在加工成鱼柳及金枪鱼罐头时,会产生大量蒸煮液,其蒸煮液仍含有大量蛋白质、核苷酸、氨基酸等多种营养成分和风味物质，是生产调味品、蛋白营养强化剂等食品的优质原料。而目前我国的金枪鱼蒸煮液没有得到良好的开发利用，大都未经处理直接排放，不仅极大地浪费蛋白质资源,而且污染环境。采用酶解技术酶解蒸煮液中的蛋白质，反应条件温和，不破坏或很少破坏原有营养物质，并且工艺简单，设备要求不高［3］。目前，国内对蒸煮液的研究多集中在其他海产品上，赵华杰等［4］利用贻贝蒸煮液加工得到呈味良好、风味独特的发酵调味品;张露等［5似鳍鱼罐头蒸煮液为原料,采用酶解工艺制备具有抗氧化功能的生物活性肽;郑晓杰等［6］利用毛虾蒸煮液加工成毛虾粉水产调味料，并对其喷雾干燥工艺进行了优化;而关于金枪鱼蒸煮液加工利用的研究报道基本处于空白阶段。因此，如果以金枪鱼蒸煮液为原料开发成消费者喜爱的、具有海鲜风味的调味汁，既能够增加原料附加值,同时又可解决废水排放带来的环境污染等问题。本实验以金枪鱼蒸煮液为主要原料，以水解度［7-8］为指标，筛选出最合适的蛋白酶，在此基础上，考察酶解时间、pH、温度和加酶量对水解度的影响，结合响应面分析［9-10］研究酶解最佳工艺条件，并对其脱腥和杀菌工艺进行优化［11-12］,同时以白糖、食用盐、蜡质玉米变性淀粉为配料，制成风味独特的金枪鱼蒸煮液调味汁，以便更合理地开发利用蒸煮液，同时满足市场对天然海鲜调味品的需求［13-17］。1材料与方法1.1材料与仪器鲤鱼蒸煮液经测定其蛋白质含量为3.71%,-20°C冰箱保存,取自浙江富丹旅游食品有限公司;食用盐、白糖、酱油市售;蜡质玉米变性淀粉东莞东美食品公司;安琪高活性干酵母安琪酵母股份有限公司;木瓜蛋白酶(1x105U/g)、中性蛋白酶(1x105U/g)、碱性蛋白酶(1x105U/g)、胰蛋白酶(4x103U/g)南宁庞博生物工程有限公司;胃蛋白酶(2.1x104U/g)美国Sigma公司;其他试剂均为分析纯。HHS型电热恒温水浴锅上海棱光技术有限公司;TGL-16C低速大容量离心机军事医学科学院实验仪器厂的eltec400自动定氮仪丹麦FOSS公司;RE-52CS-1旋转蒸发上海亚荣生化仪器厂;BS110S电子天平北京赛多利斯仪器系统有限公司;PHS-3B精密pH计上海精密科学仪器有限公司;YXQ-LS-50G压力蒸汽灭菌器上海科晓科学仪器有限公司。1.2实验方法1.2.1风味调味汁工艺流程金枪鱼蒸煮液一酶解一灭酶一离心一脱腥一浓缩一调配T灭菌T调味汁成品1.2.2操作要点1.2.2.1酶解处理将蒸煮液调节到最适pH,置于一定温度水浴锅中，待其温度读数稳定后添加一定量的酶，酶解一定时间后，并置于沸水中灭酶处理10min,使蛋白酶钝化，之后取出冷却至室温。1.2.2.2离心灭酶后经4000r/min离心10min,除去不溶物和悬浮物，去除上层油脂,取上清液即可得到金枪鱼酶解液。1.2.2.3脱腥采用酵母发酵法[18-19],在300mL酶解液中分别添加0.25%~0.75%的酵母进行发酵脱腥处理，在30~40°C条件下发酵50~70min,以除去鱼腥味。1.2.2.4浓缩采用真空浓缩方法对金枪鱼酶解液进行浓缩处理，将金枪鱼酶解液装入到旋转蒸发器中,浓缩温度调为55C,浓缩至原先体积的三分之一左右。1.2.2.5调配经过浓缩后可得到黄色液体，为进一步提高鲜味，以酶解液为基料,按照以下配方进行调配:白糖2%、食用盐6%、蜡质玉米变性淀粉1.5%,搅拌使其混匀。1.2.2.6灭菌置于200mL玻璃瓶中，密封,90C下灭菌30min或121C下灭菌20min,冷却,即金枪鱼风味海鲜调味汁。1.2.3最适蛋白酶的选择取100mL蒸煮液,分别添加200U/g的中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶，酶解2h,其中胃蛋白酶酶解液pH2.5、温度45C,其余在自然pH、55C温度条件下进行酶解，以水解度为指标,比较各蛋白酶对蒸煮液的酶解效果的差异。1.2.4金枪鱼蒸煮液酶解单因素实验蛋白酶添加量(100、200、300、400、500U/g)、酶解温度(45、50、55、60、65°C)、酶解时间(2、3、4、5、6h)、pH(6、6.5、7、7.5、8)作为单因素进行实验，研究单因素对水解度的影响，其余各因素的固定水平为加酶量300U/g、温度为55°C、酶解时间为3h、pH为7。每组重复实验3次，来确定酶解最佳工艺。1.2.5响应面优化酶解金枪鱼蒸煮液实验在单因素实验基础上,以水解度为响应值，采用响应面对酶添加量、酶解温度、酶解时间这三个因素进行优化,响应面实验因素与水平设计编码见表1。表1响应面实验因素与水平Table1Factorsandlevelsofresponsesurfaceexperiment因素水平-101A酶添加量(U/g)250300350B酶解温度(°C)505560C酶解时间(h)3.544.51.2.6酶解液脱腥工艺正交实验设计为了优化酵母发酵脱腥的工艺条件，本实验选用安琪高活性干酵母，在考察单因素(发酵时间、发酵温度、酵母添加量)对腥味值影响的基础上，对其进行L9(34)正交实验。正交实验设计及水平编码见表2。表2正交实验因素水平表Table2Factorsandlevelsoforthogonalexperiment因素水平123发酵时间(min)506070发酵温度(°C)303540酵母添加量(%)0.250.50.75表3风味海鲜调味汁感官评价表Table3Thesensoryevaluationtableofflavorseafoodsauce评分标准(分)类别一级二级三级滋味(10分)口感细腻，有鱼鲜味(8~10)口感较细腻，有鱼鲜味(4~7)口感粗糙，鱼鲜味淡(1~3)色泽(10分)黄棕色鲜亮有光泽(8~10)淡黄棕色，略带光泽(4~7)深黄褐色,无光泽(1~3)气味(10分)鱼香味浓郁，无不良气味(8~10)鱼香味较淡(4~7)无鱼香味(1~3)形态(10分)流体状，无分层沉淀(8~10)流体状，分层现象不明显，略微有沉淀(4~7)半流体状，有较多沉淀产生，分层较明显(1~3)1.2.7酶解液杀菌条件确定将产品分别采用121oC/20min高温高压杀菌、90C/30min巴氏杀菌两种杀菌方式杀菌后，置于室温阴凉处依次保存15、30、60d后，以感官评价、大肠菌群和菌落总数为指标，考察这两种杀菌方式对产品杀菌效果的影响，以此确定酶解液较佳的杀菌条件［3］。1.3实验指标测定1.3.1蛋白质含量参照GB5009.5-2016《食品中蛋白质的测定》［20］测定。1.3.2水解度的测定甲醛滴定法测定，甲醛滴定法可以用来测定氨基氮，对于氨基氮含量以消耗的NaOH量为指标。计算公式为：水解度1.3.3腥味值测定由10名对鱼腥味比较敏感并经过专门训练的食品科学与工程专业学生组成评判小组，将品尝后感受到的腥味以分数表示。0无腥味;1略有腥味;2腥味较弱;3有腥味;4腥味一般;5腥味偏重;6腥味较重;7腥味很重。分为7个级别进行评分，满分共7分，其中分值越低,则表示鱼腥味越轻。1.3.4感官评定指标以金枪鱼蒸煮液浓缩汁作为基料，选择经过培训且身体健康，味觉、视觉正常的具有感官评价知识的食品科学与工程专业学生10人以滋味、色泽、气味、形态为评价指标，确定最佳调配方式，先看再闻后尝，对制备的调味汁进行感官评定，满分40分，滋味、色泽、气味、形态各10分，分值越大，说明调味汁风味越好，最终结果剔除异常数，求取平均值，打分标准如表3。1.3.5氨基酸态氮含量参照GB5009.39-2016《酱油卫生标准的分析方法》［21］测定。1.3.6可溶性固形物、盐分测定参照王晓宾等［22］测定。1.3.7微生物指标参照GB4789.2-2016《食品微生物学检验:菌落总数测定》［23］和GB4789.3-2016《食品微生物学检验:大肠菌群计数》［24］测定、GB4789.4-2016《食品微生物学检验:沙门氏菌检验》［25］、GB4789.5-2016《食品微生物学检验:志贺氏菌检验》［26］、GB4789.10-2016《食品微生物学检验:金黄色葡萄球菌检验》［27］。1.4数据处理采用OriginPro8.5软件绘图，响应面实验通过DesignExpert8.0.6进行响应面分析。2结果与分析2.1蛋白酶酶解工艺优化2.1.1不同蛋白酶对金枪鱼蒸煮液酶解效果的筛选酶具有高效、专一性，在很大程度上会影响产品的质量和风味，所以需要选择最合适的酶来进行酶解。由图1可见,木瓜蛋白酶的水解度最高，水解度达到17.16%,胰蛋白酶和中性蛋白酶较好，碱性蛋白酶次之肩蛋白酶效果最差。就木瓜蛋白酶而言，该酶对动物蛋白的水解效果较好,且水解物苦味较弱［28］,所以本实验选用木瓜蛋白酶进行水解。图1不同蛋白酶对金枪鱼蒸煮液水解效果比较Fig.1ComparisonofhydrolysiseffectofdifferentproteasesonSkipjackTunacookingliquor2.1.2金枪鱼蒸煮液酶解的单因素实验2.1.2.1蛋白酶添加量对蒸煮液酶解效果的影响图2表明，当酶用量在100~300U/g时，水解度随着酶用量的增加而呈现增大的趋势，当酶用量达到300U/g后，酶用量继续增加，水解度增加逐渐减缓,是由于底物逐渐消耗，酶趋于饱和状态。综合经济效益，加酶量为300U/g比较适宜。图2蛋白酶添加量对金枪鱼蒸煮液酶解效果的影响Fig.2EffectofproteasedosageonenzymatichydrolysisofSkipjackTunacookingliquor2.1.2.2酶解温度对蒸煮液酶解效果的影响由图3可见,随着酶解温度的升高，水解度增加，酶解温度为55°C时,水解度达到最大值,其后逐渐下降。这是因为随着温度升高，蛋白酶活力也逐渐增加，酶促反应也加快，但当超过最适温度，酶活力逐渐下降，反应速率也随之降低。故本实验酶解温度为55^左右较为适宜，与姚芳等［15］研究结果相似。图3酶解温度对金枪鱼蒸煮液酶解效果的影响Fig.3EffectofenzymolysistemperatureonenzymatichydrolysisofSkipjackTunacookingliquor2.1.2.3酶解时间对蒸煮液酶解效果的影响图4表明，水解度随着酶解时间的延长而增加，酶解时间在4h以内冰解度逐渐增加。超过4h,随着时间的增加冰解度则增长缓慢，是由于随着酶解时间的延长，可能会导致酶失活，酶活力下降，而且过度水解导致氨基酸的破坏，使蛋白质含量降低［29］。综合经济效益，酶解时间为4h比较适宜，该结果与李阳等［30］研究结果相似。图4酶解时间对金枪鱼蒸煮液酶解效果的影响Fig.4EffectofenzymolysistimeonenzymatichydrolysisofSkipjackTunacookingliquor2.1.2.4pH对蒸煮液酶解效果的影响由图5可见,pH对酶水解也会造成一定影响，在pH为7.0,水解度达到最大，为27.24%,是由于木瓜蛋白酶的最适合pH6.5~7.5,pH在此范围内有利于酶解反应的进行。综合考虑,本实验pH最佳为7.0。图5pH对金枪鱼蒸煮液酶解效果的影响Fig.5EffectofpHonenzymatichydrolysisofSkipjackTunacookingliquor2.2酶解金枪鱼蒸煮液条件的响应面实验2.2.1回归模型的确定及响应面分析响应面实验结果见表4,通过软件处理，除去不显著项得到水解度模型的二次多项回归方程为：Y=27.05+1.17A+1.70B-0.53C+0.19AB+1.31AC-0.44BC-2.26A2-3.40B2-3.04C2方差分析结果见表5,由表5可知，模型p<0.0001,而失拟项不显著p=0.6772>0.05,表明模型显著,二次模型选择合适。因素A、B、AC以及A2、B2、C2对结果影响极显著(p<0.01),因素C对结果影响显著(p<0.05),AB对结果影响不显著(p>0.05),该数学模型F值反映出该方程在实验点与实验结果相吻合。失拟性检验F值表明回归方程拟合的较好，方程没有失拟因素存在。同时，软件分析中R2为0.9909,变异系数为2.03%,说明模型能够反映真实情况。从因素分析可知，反应条件对水解度影响大小排序为酶解温度>酶添加量>酶解时间，这与苏伟等［31］研究结果相似。表4响应面设计方案及结果Table4Designandresultsofresponsesurfaceanalysis实验号A酶添加量(U/g)B酶解温度《)C酶解时间(h)Y水解度(%)1-10118.43210123.59310-122.444-10-122.535-1-1018.83611024.327-11021.79800027.43901121.591000027.431100026.541201-123.091300027.43141-1020.611500026.43160-1119.01170-1-118.76表5方差分析结果Table5Varianceanalysisresult方差来源平方和自由度均方F值p值显著性模型165.59918.4084.82<0.0001**A11.00111.0050.700.0002**B23.05123.05106.28<0.0001**C2.2112.2110.570.0153*AB0.1410.140.650.4472AC6.8916.8931.770.0008**BC0.7710.773.530.1024A221.60121.6099.57<0.0001**B248.67148.67224.37<0.0001**C238.91138.91179.37<0.0001**残差1.5270.22失拟差0.4430.150.550.6772纯误差1.0840.27总误差167.1116注:*如<0.01表示差异极显著(p<0.01),*:p<0.05表示差异显著(p<0.01)。F0.1=(3,3)=5.39,F0.01(3,3)=29.46。2.2.2响应曲面图分析图6中酶解时间固定为4h,可见酶解温度轴上响应面值更陡峭，可见酶解温度因素比酶添加量因素对水解度影响大;图7中酶解温度固定为55°C,酶添加量较酶解时间的响应面较陡峭，因此酶添加量较酶解时间对水解度的影响更大;图8酶添加量固定为300U/g,可见酶解温度轴上响应面值较陡峭，所以酶解温度因素比酶解时间因素对水解度影响大。从坡度上分析，图7响应面坡度大于图6和图&说明酶添加量和酶解时间对水解度影响较大。由此可见，得出的结论与方差分析结果一样。图6酶添加量与酶解温度对水解影响的等高线与响应面Fig.6Three-dimensionalcurvedandcontourplotforeffectofenzymedosageandenzymolysistemperatureondegreeofhydrolysis图7酶添加量与酶解时间对水解度的影响的等高线和响应面Fig.7Threedimensionalcurvedandcontourplotforeffectofenzymedosageandenzymolysistimeondegreeofhydrolysis图8酶解温度与酶解时间对水解度影响的等高线与响应面Fig.8Threedimensionalcurvedandcontourplotforeffectofenzymolysistemperatureandenzymolysistimeondegreeofhydrolysis2.2.3验证实验结果通过Design-Expert8.0.6得到二次多项回归方程，针对水解度取得最大值进行条件优选，得出在实验因素水平范围内预测金枪鱼酶解液最佳工艺条件为，酶添加量312.04U/g,酶解温度56.26°C,酶解时间3.96h,水解度预测值为27.4335%。结合实验的可行性，选取酶添加量300U/g,酶解温度56C,酶解时间4h在最优条件下进行3次验证实验,实际测得的水解度为27.44%±0.04%,指标获得了相应的提高且与理论值相差较小,因此模型设计合理。表7达到杀菌目标的风味海鲜调味汁感官评价Table7Resultsofsensoryevaluationofflavorseafoodsaucewithdesiredsterilizationeffect实验号杀菌参数感官评价描述性评价得分1未杀菌口感粗糙，鱼鲜味淡深黄褐色，无光泽鱼香味较淡半流体状，有较多沉淀产生，分层较明显9.78290C/30min口感细腻,有鱼鲜味黄棕色，鲜亮有光泽鱼香味浓郁，无不良气味流体状，无分层沉淀36.483121C/20min口感较细腻，有鱼鲜味淡黄棕色，略带光泽无鱼香味流体状，分层现象不明显略微有沉淀20.69表8不同杀菌条件杀菌效果的比较Table8Comparisonofsterilizationconditioneffects杀菌方式菌落总数(CFU/mL)大肠菌群(MNP/mL)15d30d60d15d30d60d未杀菌190510严重超标NDNDND90°C/30minNDNDNDNDNDND121C/20minNDNDNDNDNDND注:ND未检出。2.3酶解液脱腥发酵工艺酵母发酵除腥是指通过酵母的新陈代谢作用，去除水产品的腥味和异味。酵母粉去腥速度快并且彻底;酵母发酵过程中产生的中间代谢产物对腥味有掩蔽作用;适用于液态鱼制品条件下使用［32］。本实验采用酵母发酵脱腥法，以腥味值为评价指标，对酵母发酵时间、发酵温度、添加量这三个因素进行优化筛选。正交结果见表6。可以看出，脱腥效果为A>B>C,最佳脱腥的条件是发酵时间60min,发酵温度35C,酵母添加量0.75%。由K值可以得出实验的最佳组合为A2B2C3。在酶解液最佳脱腥工艺下进行正交验证实验,腥味值3次测定，分别为0.85、0.95、0.80,平均值为0.867,低于正交表中的任一数据,说明正交实验得到的酵母脱腥工艺优化参数具有可靠性和适用性。表6酵母发酵脱腥正交实验结果Table6Resultsoforthogonalexperimentofdeodorizationbyyeastfermentation实验号ABC腥味值11112.921222.631332.442121.552230.962311.373131.883211.693321.9k12.6332.0671.933k21.2331.72.0k31.7671.8671.7R1.40.3670.32.4风味海鲜调味汁最佳杀菌条件确定由表7可知，经过121C/20min高温高压杀菌条件的样品，虽然杀菌时间较短，但温度过高会影响其原有营养物质和风味［33］,造成鱼香味消失,也会使酶解液中的氨基酸、蛋白质等营养物质受到破坏，组织结构造成一定影响，口感下降。而90C/30min的巴氏杀菌条件使调味汁中产生了浓郁的鱼香味，呈黄棕色、鲜亮有光泽厩达到商业无菌的目标，又极大的保留原有的风味和营养成分，在此条件下，调味汁口感细腻有鱼鲜味。杀菌后,置于常温条件下保存，由表8可知，两种杀菌条件均可达到延长保质期的目的，杀菌效果良好,未检出菌落总数和大肠菌群。结合感官评价和杀菌效果指标，两种条件相比较，最终选择90oC/30min的杀菌条件，与张井等［33］研究结果相似。2.5金枪鱼风味海鲜调味汁质量指标经检验该调味汁呈流体状、黄棕色、味道鲜美，鱼香味浓郁，致病菌未检出，产品质量指标见表9。表9风味海鲜调味汁质量指标分析Table9Analysisofqualityindexonflavorseafoodsauce指标项目参数感官指标色泽黄棕色香气鱼香味滋味鱼鲜味，无苦涩味和异味形态流体状，无分层沉淀氨基酸态氮0.68g/100mL理化指标可溶性固形物21.24%蛋白质11.68%盐分12.17%微生物指标菌落总数＜2000CFU/g大肠菌群＜30MPN/100g致病菌不得检出3结论本实验以水解度为指标，通过响应面法得到金枪鱼蒸煮液的最佳酶解方式为:在56°C、添加量为300U/g条件下酶解4h,此时水解度为27.44%±0.04%。利用正交实验得到最佳脱腥参数组合为酵母0.75%、发酵温度35。^发酵60min,在90C条件下巴氏杀菌30min,最终得到金枪鱼风味海鲜调味汁口感较佳，有鱼鲜味,风味宜人。本文为金枪鱼蒸煮液的高值化利用提供了理论依据。参考文献【相关文献】孙丽.金枪鱼肉在蒸煮过程中品质特性变化的研究[D].无锡:江南大学,2009.苏阳.南海产3种金枪鱼营养成分分析及肌肉蛋白酶解物抗疲劳活性的研究[D].湛江:广东海洋大学2015.徐静涨井,郑晓杰，等.毛虾风味液态调味基料的制备[J].食品科学,2009,30(24):494-496.赵华杰，杨荣华,戴志远.贻贝蒸煮液发酵调味品的感官评价及呈味成分的分析[J].中国食品学报,2009,9(4):185-191.张露，叶秀云,谢金盛，等.酶解鲭鱼罐头蒸煮液制备生物活性肽[J].福州大学学报:自然科学版2014,42(6):950-956.郑晓杰，李燕，方道赠，等.中国毛虾蒸煮液减压浓缩工艺优选研究[J].食品研究与开发,2010,31(8):52-68.DuanZH,WangJL,YiMH,etal.Recoveryofproteinsfromsilvercarpby-productswithenzymatichydrolysisandreductionofbitternessinhydrolysate[J].JournalofFoodProcessEngineering,2010,33(5):962-978.张井，李燕，徐静，等.应用二次回归正交旋转组合设计优化中国毛虾蒸煮液酶解工艺的研究[J].食品工业科技,2010,31(7):167-170.李云姣，陈杨扬,侯宝岩，等.响应面法优化海湾扇贝壳赖氨酸螯合钙的制备工艺[J].食品工业科技,2017,38(12):248-253.杨龙方，桑卫国,段清源.响应面法优化鲤鱼褐色肉酶解工艺的研究[J].食品工业科技,2015,36(12):175-184.刘洪亮，陈丽娇,肖欣欣，等.即食贻贝脱腥及调味工艺研究[J].食品工业科技,2012,33(12):277-281.[12]任增超，陈忻.波纹巴非蛤酶解蛋白脱腥技术研究[J].食品工业科技,2013,34(21):199-201