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文档简介
实验1无菌材料准备和环境微生物的检测•
进入实验室,必须穿白大褂•
两个同学一组,选择座位,收好第一个抽屉钥匙和柜子钥匙•
录像1消毒和灭菌•
录像2无菌操作倒平板配制培养基1、高氏1号培养基,液体培养基由教师配好,每组取一个250
ml三角瓶中加入2.6克琼脂,再加160
ml液体培养基,包扎,做好标记(XX组)。2、斜面培养基,教师准备高氏1号培养基,每组拿试管4支,每支分装培养基4
ml,加帽。121℃
20分灭菌斜面培养基待试管冷却至70℃后,垫适当厚度木板等来搁置斜面,使斜面前沿在试管正中间,自然冷却过程中不得移动,待彻底冷凝后收入柜子中。高氏一号培养基取出后趁热混匀沉底的琼脂,做好标记(X月X日,高氏一号)后收入柜子中1、课程介绍
人员
教材
内容
评分2、安全教育
煤气
着装
微生物安全
学习后签字3、培养基•
固体/液体/半固体培养基/(脱水培养基)•
天然/合成培养基•
通用/选择/鉴别培养基•
碳源/氮源/能源/水/无机盐/生长因子肉汤培养基
1L——天然培养基,成分不明确牛肉膏粉3g,蛋白胨
10g,NaCl
5g,pH7.4,琼脂
16g。高氏一号固体培养基
1L——合成培养基,成分明确可溶性淀粉20g,KNO
1g,K
HPO
0.5g,MgSO
·
7H
O
0.5g,32442NaCl
0.5g,
FeSO
·7H
O,0.01g,琼脂
16g,pH=7.4;42氧化硫硫杆菌培养基
1LNH4ClKH2PO40.52g28gNsourceMgSO4
·7H2O
0.25
gCaCl2
2H2O硫粉0.07
g1.56gpH
3.0Energysource高氏一号固体培养基
1L——合成培养基,成分明确可溶性淀粉20g,KNO
1g,K
HPO
0.5g,MgSO
·
7H
O
0.5g,32442NaCl
0.5g,
FeSO
·7H
O,0.01g,琼脂
16g,pH=7.4;42氧化硫硫杆菌培养基1
LNH4ClKH2PO40.52g28gNsourceMgSO4
·7H2O
0.25
gCaCl2
2H2O硫粉0.07
g1.56gpH
3.0Energysource在5%
CO2中培养基灭菌相关概念•
消毒:杀死有害微生物,酒精擦拭,食品消毒(牛奶的巴氏消毒等)。•
灭菌:杀死所有微生物,就是常规方法检测不到样品中有活的微生物。•
抑菌:抑制微生物生长,比如低PH,低温,高渗透压(盐,糖等),干燥等。•
化疗:用药物选择性抑制寄主体内的病原微生物(包括肿瘤),比如各种抗生素,磺胺等•
防腐:抑制微生物的生长,进行食品保鲜。常用方法•
干热灭菌:靠高温杀死微生物,160-180度,2小时。灼烧:火焰上烧红。•
湿热灭菌:高温水蒸气杀灭微生物。如灭菌锅121度20分,根据样品特点,调整温度和时间。•
化学药剂,消毒:新洁尔灭,0。2%,30min。•
辐照:紫外线消毒•
过滤除菌:无菌滤器,孔径0.22微米,样品经过滤除去细菌等微
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