病原学标本送检及采集规范

病原学标本送检及采集规范科室：

主讲人：目录12345总则血培养标本呼吸道标本尿液标本其他标本01总则微生物标本采集的基本原则1234在抗菌药物使用前采集标本应尽量送检无菌部位的标本，如血培养有菌部位应避免“正常菌群导致的标本污染”标本的标签和申请单的信息要填写完整严格无菌操作送检标本的种类与临床意义血脑脊液、胸腹水、无菌体液尿脓、伤口分泌物痰、咽拭子（HI、SP除外）粪便、肛拭子微生物标本运送的基本原则12尽快送检，多数标本两小时内到达保证必要的运送条件不合格的生物标本标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时间，或保存温度不当。标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下送检。容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容器非无菌等。未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培养送检尿标本患者信息与标本不符，如女性患者送检前列腺标本。标本明显被污染，如痰标本中混有食物残渣等。拭子上的标本已经干涸标本不符合检验要求，如痰标本以唾液为主。标本量太少。纳入病原学送检率的检验项目无菌体液细菌涂片合格标本细菌培养肺炎链球菌尿抗原军团菌抗原/抗体检验真菌涂片及培养血清真菌G实验或GM试验血清降钙素原检验（PCT）02血培养标本血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征体温＞38℃或＜36℃呼吸频率＞20次/分PCO2＜32mmhg寒战心率＞90次/分血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征皮肤黏膜出血多器官功能衰竭昏迷血压降低血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L）血小板减少炎症指标如：CRP、PCT增高血培养采血指征以下情况需多次采集血培养凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者感染性心内膜炎凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者导管相关血流感染导管相关血流性感染血培养留取方法短期外周导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养中心静脉导管血培养保留导管不保留导管1套导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养1-2套外周血培养血培养采血要求采血时间采血套数采血量寒战或发热初起时采集抗菌药物使用前采集每人每次采集2-3套每次从不同穿刺点采集儿童一般仅采集需氧瓶成人每瓶采集量8-10ml注射器采集先注入厌氧瓶蝶形针采集先注入需氧瓶血培养采血要求对于成人血培养，1个需氧瓶和1个厌氧瓶为1套，在体位一侧采集至少10-20ml血液分别注入1套血培养瓶中，每瓶5-10ml血液；同时在另一侧采集至少10-20ml血液注入第2套血培养瓶，如果抽取的血液量很少时，应首先满足需氧瓶。采用双侧双瓶培养检测提高阳性率，快速鉴别是污染菌还是感染菌，只做需氧菌不做厌氧菌培养,将有19%的菌株不能被发现,另有5%的血培养延迟1天报告阳性结果。血培养采集方法采集静脉血手卫生去除培养瓶塑料瓶帽75%酒精消毒瓶口，自然干燥60s戴无菌手套固定静脉血培养采集方法首先确定静脉穿刺点（不建议动脉），用75％酒精消毒静脉穿刺点30秒；用1-2%碘酊从穿刺点由内向外擦拭消毒30秒，待干；消毒后不要再次触摸穿刺部位血培养瓶的消毒方法：打开培养瓶顶塑料帽，用75％乙醇消毒瓶顶橡皮塞，待干60秒；将血液注入培养瓶（不需要更换针头），先需氧瓶后厌氧瓶，然后盖上塑料帽手卫生血培养采集方法及时送检：血培养瓶在常温保存，无须冷藏；接种标本后请在2小时内送到检验科上机检测，如果不能及时送检，可以放室温保存（不要冷藏或放孵箱内）03呼吸道标本咽拭子标本临床意义：咽部拭子细菌培养能分离出致病菌，有助于白喉、化脓性扁桃体炎、急性咽喉炎等的诊断。如在痰及咽拭子分泌物中检测出致病菌，则视为呼吸道感染。采样指征：突发的咽痛、淋巴结肿大、颈部或颌下淋巴结肿痛，常伴有发热，通常没有咳嗽或明显鼻涕。咽拭子标本采集方法1．查对医嘱，标签贴于标本容器上，携用物至病人床旁。2．核对病人，解释取咽拭子培养的目的和方法。3.嘱病人张口发“啊”音，暴露咽喉，取出无菌长棉签以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。4．然后将棉签插入试管，塞紧。5．及时送检。痰标本临床意义：痰液是肺泡、支气管和气管的分泌物。痰液检查对呼吸系统疾病如肺结核、肺吸虫、肺肿瘤、支气管哮喘、慢性支气管炎、支气管扩张等疾病的诊断、疗效观察和预后判断有一定价值。采样指征：咳嗽、脓性痰，伴有发热，影像学检查出现新的或扩大的浸润影；气道开放患者，出现脓痰或血性痰。考虑下呼吸道感染患者采集痰液标本，同时送血培养标本。痰标本采集要求争取首剂抗菌药物治疗使用前及更换抗菌药物前采集标本采集后保证2小时内送达实验室并得到接种只要有可能得到合格的痰标本，应马上采集、送检宜在医护人员直视下留取合格痰标本送检痰标本后三天内不主张再次送检痰标本采集流程（1）目的：用于检查痰液的一般性状，做涂片经特殊染色查细菌、虫卵和癌细胞，以协助诊断。（2）用物：痰盒。（3）操作方法1）护士核对医嘱，备齐用物，贴好标签，注明科别、病室、床号、姓名、住院号、检验目的、送检日期等。2）备齐用物，携至床旁，核对病人，说明留取痰标本的目的及方法，以取得病人合作，消除紧张心理。3）嘱病人早晨起来在未进食前，先用清水漱口，去除口腔杂质，以清洁口腔。4）在深呼吸后，用力咳出气管深处的第一口痰，留于痰盒中。5）漱口，必要时作口腔护理。6）再次查对，安置病人，整理床单位，清理用物。7）洗手，记录痰液的性状、外观，将标本连同检验单及时送检。痰标本采集方法第一步：用清水反复漱口三次。痰标本采集方法第二步：深吸气2-3次用力呼出。痰标本采集方法第三步：从肺部深处将痰咳出。痰标本采集方法第四步：将打开的无菌痰杯靠近嘴边，吐出痰液，拧紧杯盖。注意：不能将鼻涕和唾液吐入痰杯。痰标本运输标本采集后需尽快送到实验室，不能超过2小时不及时运送可导致肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌由于不适应外界环境和自溶现象而死亡不能及时送达或待处理标本应置于4℃冰箱保存，以免杂菌生长。（疑为肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等苛养菌不在此列）冰箱保存不能超过24小时实验室拒收标准1.质量不合格标本：显微镜下细胞学检查发现标本受口咽部菌群污染。合格痰标本应鳞状上皮细胞<10个/低倍视野，白细胞>25个低倍视野，或白细胞：鳞状上皮细胞>2.52.没有标签或标签贴错；3.标识信息不明，未提供采集时间及送检目的等；4.超过2小时送达实验室，且没有正确保存的标本；5.运送容器有渗漏。6.同一天同一项目重复送检的痰标本。04尿液标本尿标本临床意义：尿液来自血液,身体任何系统病变影响血液成分改变时,均可引起尿液成分的改变.通过尿液检验,不仅可测知肾及尿路感染疾病,还可测知心,肝,内分泌及其他脏器功能,对各种疾病的诊断有重要作用。尿标本采样指征：

1.尿频、尿急、尿疼等膀胱刺激症状，伴有不同程度发热、乏力、腰痛等全身不适症状。

2.对于儿童患者，除上述典型症状外，还包括发热、呕吐、生长发育障碍、易怒等。

3.生后3个月内的小婴儿患有泌尿系感染时，常表现出脱水及电解质紊乱。

4.先天性泌尿系统发育畸形，如肾脏发育不良、肾盂积水、膀胱输尿管反流，是泌尿系感染的潜在危险因素。

5.婴幼儿出现无法解释的体温≥38℃的发热时，最迟也要在24小时内送检尿培养。尿标本清洁中段尿清洁的中段尿标本，是泌尿系感染诊断的主要标本；如何避免采集过程中周围皮肤黏膜及尿道定植菌的污染，是标本采集的关键。中段尿标本的采集往往由患者独立完成，应向患者充分说明留取无污染中段尿的意义和具体采集方法。尽可能在未使用抗菌药物前送检，晨尿最佳。尿标本注意事项尿标本留取时应注意一些特殊情况：①女性患者应避免在月经期内留取尿液标本；②肉眼血尿标本不应进行尿液检查（尿沉渣除外）；③如果服用的药物影响尿液检查，应在停药后留取标本；④如果是乳糜尿，应嘱咐患者待尿液澄清后留取。尿标本采集采集方法清洁中段尿采集法1.女性：分开阴唇。男性：缩回包皮。2.清洗：使用肥皂水尽可能认真地清洗外生殖器区域。3.用手指拿着采样杯外侧，不要接触杯口边缘。首先将少量尿液排掉，再用采样杯采集半杯（5-10+ml）尿液。4.小心将盖子盖上，拧紧，做好标识，立即送检。尿标本采集留置导尿管采集法1.如果需要，可夹闭导尿管采集尿标本，但时间不能超过30分钟。2.使用酒精拭子清洁导尿管采样口或导管部位（如果没有采样口）。3.将一次性注射器针头插入采样管，吸取尿液。4.将尿液转入无菌尿杯中，盖好，拧紧，标识完毕后立即送检。+注意：不要将导管从尿袋上拆下采集标本，严禁使用尿袋尿进行培养。带有留置导管的患者通常在48-72小时之后就会出现定植菌，且常为多种细菌。尿标本采集耻骨上膀胱穿刺如需进行厌氧菌培养或儿童及其他无法配合获得清洁尿液标本时，应采用耻骨上膀胱穿刺。（1）消毒脐部至尿道之间区域的皮肤。（2）对穿刺部位进行局部麻醉。（3）在耻骨联合和脐部中线部位将针头插入充盈的膀胱。（4）用无菌注射器从膀胱吸取尿液。（5）无菌操作将尿液转入无菌螺口杯，尽快送至实验室培养。（6）厌氧菌培养，可进行床旁接种，将培养平板放入厌氧袋／罐内送检；或无菌操作直接将注射器中的尿液注入厌氧血培养瓶中，迅速送检。尿标本运送申请单除应包括患者基本信息外，一定注明患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、标本留取方式和采集时间。尿杯上的标签要求有唯一标识号或条码，注明标本种类和采集时间，此信息尤其重要。尿标本运送1尿标本采集后应立即送检。2若不能在采集30min内进行培养，应放入4℃冰箱保存，但也不能超过24h。实验室拒收标准（1）标识不明，未提供采集时间及采集方法。（2）标本类型与标签信息不符。（3）尿标本采集后超过30min送达实验室，且未冷藏保存的。（4）患者集尿袋中的尿液标本。（5）申请做厌氧菌培养但未从耻骨弓上穿刺采集尿液。（6）容器破损、尿液渗漏。（7）明显污染的标本。（8）标本量太少。（9）申请厌氧菌培养，标本未在厌氧条件下送检。05其他标本脑脊液标本临床意义：诊断中枢神经系统感染最主要的标本。采样指征：

症状：

①成人：发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和反射增强

等症状，怀疑为脑膜炎的患者。

②儿童：因儿童和新生儿的临床表现不明确和无特异性，

因此对于婴儿不明原因发热，应怀疑为脑膜炎，采取

脑脊液。

疾病：①化脓性脑膜炎②非化脓性脑膜炎脑脊液标本定位腰椎穿刺第3-4腰椎间隙第4-5腰椎间隙收集脑脊液5-10ml标本送检胸腔积液标本临床意义为明确胸腔积液的性质，需做胸腔穿刺抽液检查以助诊断。采样指征：①症状：伴有胸痛、发热、胸腔积液;②疾病：结核性胸膜炎，细菌性肺炎引起的胸膜炎，真菌感染引起的胸腔积液。胸腔积液标本1．嘱患者取坐位面向椅背，两前臂置于椅背上，前额伏于前臂上。不能起床者可取半坐位，患侧前臂上举抱于枕部。2．穿刺点选在胸部叩诊实音最明显部位进行，胸液较多时一般常取肩胛线或腋后线第7~8肋间；有时也选腋中线第6~7肋间或腋前线第5肋间为穿刺点。包裹性积液可结合X线或超声检查确定，穿刺点用蘸甲紫（龙胆紫）的棉签在皮肤上标记。3．常规消毒皮肤，戴无菌手套，覆盖消毒洞巾。用2%利多卡因在下一肋骨上缘的穿刺点自皮至胸膜壁层进行局部浸润麻醉4．术者以左手示指与中指固定穿刺部位的皮肤，右手将穿刺针的三通活栓转到与胸腔关闭处，再将穿刺针在麻醉处缓缓刺入，当针锋抵抗感突然消失时，转动三通活栓使其与胸腔相通，进行抽液。助手用止血钳协助固定穿刺针，以防刺入过深损伤肺组织。注射器抽满后，转动三通活栓使其与外界相通，排出液体。5．抽液结束拔出穿刺针，覆盖无菌纱布，稍用力压迫片刻，用胶布固定后嘱患者静卧。脑脊液标本定位选在胸部叩诊实音最明显部位进行，胸液较多时一般常取肩胛线或腋后线第7-8肋间；有时也选腋中线第6-7肋间或腋前线第5肋间为穿刺点。抽取胸水标本送检粪便常规标本1.集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,一般检验留取新鲜的、自然排出的粪便3-5g,必要时可肛拭子采取,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内,贴好标识送检。标本容