引用无菌检验标准操作规程(SOP)

江苏常康医疗科技文件名称文件名称文件编号无菌检验标准操作规程〔SOP〕制定审核版批次准1/5第一版制定日期审核日期颁发数量批准日期生效日期责任者：质管部、化验室主任、QC内容：12023XIH。气菌及真菌检查。假设供试品符合该项检查方法的有关规定，仅说明白在该检验条件下未觉察微生物污染。〔C〕背景下的局部百级〔A〕的单向流区域内或隔离系统中进展。其全过程必需严格遵守无菌操作。防止微生物污染，但所实行的措施不得影响供试品中微生物的检出。操作前环境干净度应阅历证。日常检验需对试验环境进展监控。5、方法验证：进展该项检查前应依据《无菌检查方法验证规程》确认该方法的适用性。4、人员要求：无菌检查人员必需具备微生物专业学问，并经过无菌技术培训。6、检验数量及检验量：、接种每种培育基所需的最少检验数量:2%10〔取较少者试品无菌检查时每个培育基容器接种的样品量作阳性比照用。、每支供试品接入每种培育基的最少量:半量〔100ml≤V≤500ml时，检验量应不少于直接接种的供试品总接种量，只要供试品特性允许，应将全部容器内的全部内容物过滤。730～35℃，23～28℃。〔针头、剪刀、镊子、注射器盒、、真空泵、HTY9、消毒剂配制：、75％乙醇溶液〔配制酒精棉球用。、0.2％洁尔灭溶液〔配制消毒棉球用。、2％来苏尔溶液〔配制消毒棉球用。10、试剂及培育基的配制：、0.1％1.0g，1000mlPH7.1±0.2，分装，灭菌。4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml微温溶解，滤清，分装，灭菌。、依据供试品特性，可选用其他阅历证的适宜溶液作为稀释液、冲洗液。如需要，可在上述稀释液或冲洗液的灭菌前或灭菌后参与外表活性剂或中和剂。、硫乙醇酸盐流体培育基：按商品说明称取培育基，配制，摇匀，分装，按培育基说明高压灭菌，保存备用。分装的容器应适当，其装量与容器高度比例应符合培育完毕后培育基氧化层〔粉红色〕不超过培育基深度的1/2。供试品接种前，培育基氧化层的高度不得1/5，否则须经100℃水浴加热至粉红色消逝〔不超过20只限加热一次，并应防止被污染。15〔假设枯燥培育基结块应勿使用。、选择性培育基：按上述硫乙醇酸盐流体培育基或改进马丁培育基的处方及制法，在培育基灭菌或使用前1剂或灭活方法见微生物限度检查法中。说明高压灭菌，保存备用。1514.0gPHPH6.4±0.2，分装，121℃15避光的环境中。培育基假设保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。假设保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。11、试验前的预备工作、用具的洗刷、玻璃器皿：如试管、量筒、移液管、刻度吸管、离心管、三角瓶、双碟等用清洁液浸泡，用流水洗涤，再用蒸馏水洗涤4～5用过后，应先消毒倒出内容物后，再清洗晾干。、注射器用水冲洗后，用洗涤剂冲洗，然后用水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗3次。、剪刀、镊子用水及去污粉洗涤，用水冲洗干净，再用蒸馏水洗涤3次。、多用薄膜过滤器，玻璃管等用饮用水及蒸馏水洗净、晾干。、干净服、裤、帽子、口罩等用水洗涤干净后，晾干。、用具的包扎及灭菌纸严密卷好，再用两层牛皮纸一起包扎。一层层放好，盖上纱布，将铝盒盖好，用牛皮纸包扎。、试管、三角瓶等在管〔瓶〕口塞上纱布棉纱用牛皮纸包装严密。、将干净服、等用布口袋配套装入，扎紧口袋，用牛皮纸包扎好。121℃20〔适宜160℃干热灭菌〕。、干净室的清洁与灭菌、干净室及超净台，每周用高锰酸钾加甲醛薰蒸灭菌。0.2%2%75％乙醇擦洗超净台工作台面及可能污染的死角，然后开启紫外线灯杀菌半小时，超净台空气过以上。12、操作、开启传递窗外侧门，将物品外表消毒后置传递窗内，关闭窗门。进入干净室内，开启内侧门，取出物品，关闭内侧门，经缓冲间带入干净室内，物品放置于试验台上，关闭干净室门，人员离开干净室，连续用紫外灯照耀半小时，关灯，再将用具放入超净台内。、无菌效果检查：每批培育基随机取不少于5支〔瓶〕培育14天，应无菌生长。、灵敏度检查：、菌种及菌液制备：、检查用菌种包括：金黄色葡萄球菌〔Staphylococcusaureus〕[CMCC(B)26003]铜绿假单胞菌〔Pstudomonasaeruginosa〕[CMCC(B)10104]枯草芽孢杆菌〔Bacillussubtilis〕[CMCC(B)63501]生孢梭菌〔Clostridiumsporgenes〕[CMCC(B)64941]白色念珠菌〔Candidaalbicaus〕[CMCC(F)98001]黑曲菌〔Aspergillusniger〕[CMCC(F)98003]制备方法，其他参见《无菌检查方法验证规程》进展。12ml9100CFU239ml5100CFU25培育基灵敏度符合规定。230～35℃20～25℃4872、阳性比照试验：以金黄色葡萄球菌为比照菌；抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为比照菌；抗厌氧菌的供试品以生孢梭菌为比照品；抗真菌的供试品以白色念珠菌为比照品。、阳性比照试验的菌液制备同方法验证试验。及供试品〔用量同供试品无菌检查每份培育基接种的样品量48～72〔阳性比照试验操作应与微生物限度检查操作隔离进展，防止穿插污染。生长。、供试品检查：、供试品外部消毒：包装瓶外壁用75％乙醇擦拭，待干。注射器针头应快速通过火焰数次，用注射器以无菌操作直接吸取供试液。或抽至已灭菌玻璃容器中，用稀释剂稀释为供试液，如为可溶于水的固体供试品，应取规定量，参与适宜的灭菌稀释液溶解做为供试液。、直接接种法：取供试品，按上述操作进展外部消毒和制备后，用灭菌注射器以无菌操作自每管中吸取供试品，在近火焰旁以左手持培育基，右手半握拳，以小指和无名指拔开培育基管棉塞，管口通过火焰，移至火焰下侧，分别将各供试品1ml〔或规定量，除另有规定外，每个容器中培育基的用量应符合接种的供试品体积不得大于培育基体积的10%〕沿培育基管壁参与各培育51ml〔100CFU〕作15ml，改进马丁培育基不少于10ml。注入供试液时，切勿向液面直射，以免将空气中的氧带入培育基中，并在火焰旁将塞子塞严。接种后轻轻振动使均匀。、薄膜过滤法承受HTY全封闭无菌检测系统集菌。0.45μm，直器及滤膜使用前应经适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。按《HTY全封闭无菌检测系统操作规程》操作定位准确，软管走势顺畅。其滤膜和过滤器在使用前应充分枯燥，应留意保持供试品溶液及冲洗液掩盖整个滤膜外表以发挥滤膜的最大过滤效率。洗洁尔灭擦拭灭菌，然后将培育器导管上的针头插至供试品瓶胶塞内，开启集菌仪电源，使药液均匀通过集菌培育器，待药液排放尽，关闭电源，将针头取下。依据质量标准规定或验证状况，需要用冲洗液冲洗滤膜时，将针头插至装有适宜冲洗液的瓶塞内，冲洗集菌器滤膜，冲洗次数及冲洗量应阅历证，每张滤膜冲31000ml，以避开滤膜上0.1%～1%8080排液管口拧上，将冲洗液瓶取下换上相应的培育基瓶，启动电源，将培育基泵入指定培育器内，关闭电源。套在空气过滤器开口上。每次操作时，均应取相应的稀释剂及冲洗液同法操作，作为阴性比照。性比照菌选择原则参与相应比照菌液。30～35℃1423～28℃培育沉淀，经培育后不能从外观推断时，可取该培育液接种在另一支一样颖培育基中，细菌培育23色，镜检，推断是否有菌。微生物非供试品所含