细菌与病毒的病原学检查法演示文稿

细菌与病毒的病原学检查法演示文稿当前第1页\共有14页\编于星期四\7点优选细菌与病毒的病原学检查法Ppt当前第2页\共有14页\编于星期四\7点第一节细菌感染的微生物学检查法一、细菌学诊断形态学检查1.普通光学显微镜检查法：2.暗视野显微镜检查法：检查活菌、螺旋体及其动力3.荧光显微镜检查法：病原菌的分离培养生化试验血清学鉴定:玻片凝集试验动物实验：毒力、致病性毒力检测：LD50、ID50，毒素药物敏感试验：纸片扩散法当前第3页\共有14页\编于星期四\7点二、检测病原菌成分抗原检测：凝集试验、对流免疫电泳、酶免疫技术、免疫荧光技术核酸检测：1.核酸杂交技术:Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、原位杂交2.PCR技术3.基因芯片4.16rRNA基因序列分析：编码rRNA，保守区、可变区当前第4页\共有14页\编于星期四\7点三、抗体的检测（血清学诊断）凝集试验：直接、间接、协同、冷凝集沉淀试验：环状、絮状、双向、对流电泳补体结合试验：酶联免疫吸附试验（ELISA）：取双份血清，抗体效价比早期高4倍以上有意义。当前第5页\共有14页\编于星期四\7点第二节病毒感染的微生物学检查法当前第6页\共有14页\编于星期四\7点一、形态学检查1.电子显微镜检查直接镜检法：107颗粒/ml，电镜观察病毒颗粒的形态和结构免疫电镜法（IEM）：标本+特异性抗体病毒颗粒聚集电镜观察轮状病毒的粪便、HAV、HBV的血清、疱疹病毒的疱疹液，可早期诊断。2.光学显微镜检查痘病毒、观察包涵体、CPE当前第7页\共有14页\编于星期四\7点二、病毒分离培养的方法1、动物接种常用动物：小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猴等；接种途径：皮下、皮内、脑内、腹腔、静脉等接种；观察：动物出现感染症状，取病变组织进一步检查当前第8页\共有14页\编于星期四\7点2、鸡胚培养：孵化9～14天的鸡胚接种途径有：绒毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊。鉴定：血凝和血凝抑制试验尿囊腔接种羊膜腔接种当前第9页\共有14页\编于星期四\7点卵黄囊接种绒毛尿囊膜接种当前第10页\共有14页\编于星期四\7点3、组织培养器官培养、组织培养、细胞培养细胞培养：单层细胞培养、悬浮细胞培养；原代细胞培养：由新鲜组织制备二倍体细胞：二倍体性质，传40~50代，人胚肺成纤维细胞传代细胞系：由突变的二倍体细胞或肿瘤细胞建立的，HeLa细胞当前第11页\共有14页\编于星期四\7点三、病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标细胞的变化：CPE红细胞吸附（HAd）：红细胞凝集：病毒干扰作用：风疹病毒，埃可病毒,Vero细胞。中和试验（NT）：是病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验空斑形成试验：蚀斑形成单位（PFU），感染性病毒的滴度用PFU/ml表示。四、病毒成分的检测病毒抗原的检测：HIV和HBV抗原病毒核酸的检测当前第12页\共有14页\编于星期四\7点

ABCA：未感染的成纤维细胞。B：单纯疱疹病毒感染后使细胞变圆。C：呼吸道合胞病毒感染后出现细胞融合。当前第13页\共有14页\编于星期四\7点五、病毒抗体的检测：中和试验：阳性：可能以前有过隐