酵母菌的形态观察和计数（微生物学与操作技术）

微生物学及操作技术酵母菌的形态观察和计数实验目的1实验原理2实验步骤3目录页CONTENTSPAGE注意事项41实验目的过渡页TRANSITIONPAGE1、实验目的实验目的实验目的1.观察酵母菌的形态特征。2.了解血球计数板计数原理，掌握显微计数的原理及方法。1.实验目的2实验原理酵母菌酵母死活细胞鉴别的理论依据直接计数法血球计数板构造计数原则2.实验原理酵母菌1.酵母菌酵母菌是单细胞真核生物，菌体比细菌大。繁殖方式以无性繁殖（芽殖或裂殖）有性生殖产生子囊和子囊孢子。2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则1、酵母死活细胞鉴别依据：用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则2.实验原理酵母死活细胞鉴别的理论依据1、直接计数法3.直接计数法直接计数法是利用血球计数板在显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌2.实验原理1、实验目的血球计数板构造2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则1、实验目的血球计数板构造计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是无论哪一种规格的计数室，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16＊25=25

＊16=400个小方格组成。2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则1、实验目的血球计数板构造2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则16个小格1、实验目的计数原则2.酵母死活细胞鉴别的依据3.直接计数法4.血球计数板构造1.酵母菌5.计数原则1.在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5~10个菌体为宜。2.每个计数室选5个中格（可选4个角和中央的一个中格）中的菌体进行计数。3.位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。4.如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数。5.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算样品的含菌量。3实验步骤血球计数板使用计数方法1、实验步骤1.血球计数板使用1.血球计数板使用1.稀释菌液（以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释100倍即可）2.准备计数板3.加样，用滴管吸取一滴置于盖玻片的边缘，让菌悬液缓缓渗入计数室4.计数静置片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内，先在低倍镜下找到计数室，再换成高倍镜观察并计数美蓝浸片观察2.计数方法1、实验步骤血球计数操作1.血球计数板使用2.计数方法2.计数方法血球计数操作1.血球计数板使用2.计数方法计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4注意事项1.计数前需对样品进行稀释，将经过适当稀释的菌悬液2.血球计数板使用后，取下盖玻片，用自来水冲洗，切