DB4117T 321-2021动物病原微生物实验室环境控制指南

ICS65.020.99CCSB40[JB4117市地方标准DB4117/T321—2021动物病原微生物实验室环境控制指南2021-10-29实施20212021-10-29实施驻马店市市场监督管理局 发布DB4117/T321DB4117/T321—2021本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由驻马店市畜牧局提岀。本文件归口于驻马店市畜牧兽医标准化技术委员会。本文件起草单位：驻马店市兽药饲料（动物产品）质量检验监测中心、新蔡县农业综合行政执法大队、济源市动物疫病预防控制中心、许昌市动物疫病预防控制中心、安阳市殷都区动物卫生监督所、许昌市建安区动物疫病预防控制中心、鄢陵县动物疫病预防控制中心、西平县农业农村局、泌阳县动物卫生监督所、上蔡县卧龙街道办事处社区服务中心、上蔡县动物疫病预防控制中心、泌阳县兽药饲料监督监察所、泌阳县兽药械服务中心、驻马店市农业农村局、焦作市中站区府城街道办事处、遂平县农业农村局、济源市动物卫生监督所、济源市畜产品质量监测检验中心、上蔡县家畜改良站、驻马店市动物疫病预防控制中心、正阳县兽药饲料质量检验监测中心、驿城区动物卫生监督所、武陟县动物卫生监督所。本文件主要起草人：马宁、黄志伟、袁奎超、蒋欢、葛会杰、戚学洲、曹世杰、郑丽敏、翟素颖、王永刚、侯明阳、胡红伟、李荣玲、刘辉、陈玉霞、胡芬芬、王旺、郝佳、王亦欣、刘苗苗、张冬艳、张留宾、郑丰、常清华、孙政豪、张艳红、王双林。本文件为首次发布。DB4117/T321DB4117/T321—2021#f）实验室应在操作动物病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜。5.2.2通风空调实验室通风空调系统要求如下：a） 实验室可利用自然通风。如果采用机械通风，应避免交叉污染。b） 若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应配备适当的负压排风柜。c） 应按产品的设计要求安装和使用生物安全柜，如果生物安全柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使用管道排风的生物安全柜，应通过独立于建筑物其他公共通风系统的管道排岀。5.2.3供水供电实验室供水供电要求如下：a） 供水和排水管道应不渗漏，下水应有防回流设计。b） 应有可靠的电力供应。必要时，重要设备（如：培养箱、生物安全柜、冰箱等）应配置备用电源。5.3实验室区域控制5.3.1微生物实验室需具备污染区和洁净区，污染区及洁净区需分开，并应达到BSL-2实验室基本要求。建立环境清洁制度，包括地面、墙裙、顶面、门窗、纱窗及通风排气网罩等应定期进行清洁；预防积尘等造成污染。3.2污染区空气洁净度应满足ISO8级（洁净度D级），其中，浮游菌应不超过200cfu/m3,沉降菌应不超过100cfu/4小时（690mm），表面微生物应不超过50cfu/碟（655mm）;温度为20°C〜26°C；相对湿度30%〜65%；噪音W75分贝；照度N300勒克斯。5.3.3洁净区空气洁净度应满足ISO5级（洁净度B级），其中，浮游菌应不超过10cfu/m3,沉降菌应不超过5cfu/4小时（090mm），表面微生物应不超过5cfu/碟（655mm）;温度为20°C〜26°C:相对湿度30%〜70%；噪音W75分贝；照度N300勒克斯。5.3.4生物安全柜错净度应满足ISO4.8级（洁净度A级），其中，浮游菌应不超过1cfu//,沉降菌应不超过1cfu/4小时（690nmT,字面微生物应不超过1cfu/碟（655mm）;温度为20°C〜25°C；相对湿度30%〜60%；噪音W75分贝；照度N500勒克斯。5.4实验室空气控制4.1实验室应安装紫外线灯或臭氧发生器等消毒设施设备,定期对微生物实验室进行灭菌消毒处理,并建立消毒验证方法，对紫外线辐射强度、臭氧浓度进行定期监控，以确保灭菌、消毒效果。4.2实验室的通风设施能力应与实验室功能要求相适应。当发生微生物、化学品污染物聚集达到不安全浓度或实验室有缺氧风险时，应有充足的通风抽排设施以确保看效地排除或处理。5.5实验用水控制5.5.1实验室用水需达到无菌条件。5.5.2制定实验室制水系统（超纯水、蒸馅水）的微生物控制程序，规定清洁维护、消毒的频次及方法要求，确保充分考虑到不同季节波动等情况；水质处理设备应定期维护并记录；应定期监测并在停用重新启用时必须进行相应处理并监测合格。5.5.3尽量缩短制备好的水的存储时间，根据实际情况，自主选用定期加热处理后的水、使用臭氧氧化或加装紫外灯照射等措施消毒控制微生物的滋生。5.6微生物保存控制5.6.1应当制定严格的安全保管制度，做好微生物菌种和样本进岀和储存的记录、建立档案制度、并制定专人负责。5.6.2微生物菌种保存期间，要定期检查菌种存放设施的温度和湿度、菌株有无污染，如发现异常应重新移植培养后更换。5.7实验室安防控制实验室应设置安防措施，避免无授权人员进入，如门禁系统。安防系统设计应优先考虑消防、应急要求。5.8实验室标志控制实验室应根据活动类型设置相应安全标志，包括：化学品作业场所安全警示标志、生物安全警示标志、气瓶标志等。紧急通道和岀入口应设置醒目标志。6环境监测6.1环境空气微生物1.1 细菌总数监测：沉降菌监测采用自然沉降法，浮游菌监测撞击法采样，营养琼脂培养基技术的方法测定微生物实验室中空气中的细菌总数,具体操作按照GB/T18204.3执行。6.1.2真菌总数监测：沉降菌监测采用自然沉降法，浮游菌监测撞击法采样，沙氏琼脂培养基培养技术的方法测定实验室空气中的真菌总数，具体操作按照GB/T18204.3执行。6.1.3 溶血性链球菌监测：采用撞击法采样、血琼脂培养基计数的方法测定实验室空气中的溶血性链球菌，具体操1'靈照砸夕18204.3执行。6.1.4嗜肺军团菌监测：采用液体冲击法采样、培养法定性测定公共场所空气中的嗜肺军团菌，具体操作按照GB/T18204.3执行。6.2实验用水微生物2.1菌落总数监测：以无菌操作方法用灭菌吸管吸取待测25mL充分混匀的水样，进行梯度稀释后，注入无菌培养皿中，通过平板计数法对待测水样培养后测量菌落数，具体操作按照GB4789.2执行。6.2.2霉菌总数监测：通过平板计数法对待测水样培养后価最菌落数，或通过直接镜检计数法测量，具体操作按照GB4789.15执行。6.2.3大肠菌群监测：通过大肠菌群MPN计数法通过培养观察产期情况统状肠菌群，或通过大肠菌群平板计数法测量，具体操作按照GB4789.3执行。2.4金黄色葡萄球菌监测：进行金黄色葡萄球菌定性检验，通过Baird-Parker平板计数法或金黄色葡萄球菌MPN法进行计数测量，具体操作按照GB4789.10执行。6.2.5乳酸菌监测：本标准中的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属，使用不同的培养基进行平板计数，进行乳酸菌总数计数、双击杆菌计数、嗜热链球菌计数及乳杆菌计数，具体操作按照GB4789.35执行。DB4117/T321DB4117/T321—20216.2.6沙门氏菌监测：具体操作按照GB4789.4执行。6.3表面微生物可使用接触采样或拭子采样对表面微生物进行监测，具体操作按照GB/T25916.1中附录C执行。不同菌种检测方法参照本文件6.1和6.2进行。7偏移控制如果监测结果表明，设施或环境条件已发生偏移，应停止检验工作，对此期间岀具的检验检测数据的有效性应作岀分析和判断处理。及时采取有效措施，在记录或报告中说明，待调整满足要求后方可继续。8记录8.1实验室建立并保留的实验档案应当如实记录与环境相关的实验活动和设施工作状态情况，以及实验活动产生的废水、废气和危险废物无害化处理、集中处置以及检验的情况。8.2实验室应建立用于识别、