生物安全柜操作使用和维护讲义

生物安全柜操作使用和维护

1、生物安全柜概述

生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的负压过滤排风柜。

根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为三种类型：Ⅰ级、Ⅱ级（A1、A2、B1、B2型）和Ⅲ级。三种类型生物安全柜的区别见表1。Ⅰ级生物安全柜保护工作人员和环境，Ⅱ级生物安全柜保护工作人员、环境和试样（产品）。Ⅲ级生物安全柜采用手套箱更严格地保护工作人员、环境和试样（产品）。

各型生物安全柜的生物防护性能（人员防护、样品防护和交叉污染）是相同的。操作挥发性或有毒化学试剂时，不应选用Ⅱ级A1型及A2型生物安全柜，Ⅱ级B1型可用于操作少量挥发化学试剂和放射性核素。在需要操作大量放射性核素。在需要操作大量挥发化学品和放射性核素时，必须使用Ⅱ级B2型安全柜。

2、生物安全柜安装注意事项2.1生物安全柜在安装搬运过程中，严禁将其侧倒放置和拆卸，到搬入安装现场后拆开包装。2.2生物安全柜安装位置在设计未指明时应避开人流频繁处，并应避免房间气流对操作口空气幕的干扰。2.3如果实验室有窗户，应始终保持关闭。安全柜不能安装在房间通风系统的进口，以免气流直接吹到安全柜正面的操作口和排风滤器上。2.4安全柜的周围应留出12英寸（304.8mm）的空间，以便于清除赃物。如果由于空间限制，至少应在两边留出3英寸（76.2mm）,背面留出1.5英寸（38.0mm）。

应在安全柜的电源留出足够空间，以便于在不移动安全柜的情况下，就可以进行维修。2.5安装的生物安全柜的背面、侧面离墙壁距离应保持在80-300mm之间。2.6生物安全柜的排风管道的链接方式，必须以更换排风过滤器方便来确定。3、生物安全柜标准操作程序3.1开启生物安全柜的滑动窗，并移动到适当的位置，把所有的必要的实验器材放入生物安全柜。3.2开启生物安全柜的风机，让其体流动10-15分钟。3.3用薄纸检查操作口的气流方向是否向内。3.4操作者的双臂以直线方向缓慢伸入生物安全柜，至少静止1分钟，使柜内气流稳定后再进行操作。在生物安全柜内进行实验操作时，动作应轻柔、舒缓、规则。3.5实验过程中试验用的洁净的器材和物品通常放置在试验者面对柜体的左侧，被污染和怀疑被污染的器材和物品放置在柜体的右侧，实验完成后对移出生物安全柜的器材和物品进行必要消毒处理。

安全柜防护效果的评估应该包括对安全柜的完整性、HEPA过滤器的泄漏、向下气流的速度、正面气流的速度、负压/换气次数、气流的烟雾模式以及警报和互锁系统进行测试。在进行这些测试时，检测人晕啊要经过专门的培训，采用专门的技术和仪器设备。强烈建议有资质的专业人员进行测试。

多数生物安全柜的设计允许其持续24小时开机运行，同时安全柜连续工作有助于控制实验室中灰尘和颗粒的水平。因此一天中若有数个操作过程，期间不应中断运行。向房间中排风或通过套管接口与专门的排风管相连接的Ⅱ级A1型及Ⅱ级A2型生物安全柜，在不使用时是可以关闭的。其他如Ⅱ级B1型和Ⅱ级B2型生物安全柜是通过硬管道安装的，就必须始终保持空气流动以维持房间空气的平衡。

在使用生物安全柜时应穿着个体防护服。在进行一级和二级生物安全水平操作时，可穿着普通实验服。手套应套在隔离衣外面，可以戴加有松紧带的袖套来保护研究人员的手腕。有些操作可能还需要戴口罩和安全眼镜。

在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应避免使用明火。使用明火会对气流产生影响，并且在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险。在对接种环进行灭菌时

可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。

生物安全柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开，操作过程中物品取用方便，且三区之间无交叉。物品应尽量靠后放置，但不得挡住气道口，以免干扰气流正常流动。

当少量溢洒时，用吸收纸巾立即处理，并用消毒液擦洗台面及内部所有物品，若发生大量溢洒，安全柜内所有物品都应进行表面消毒并拿出安全柜，在确保排水阀关闭后，将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格栅流到排水盘上。

生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须清楚污染。最常用的方法是采用甲醛蒸

气熏蒸。应该由有资质专业人员来清除生物安全柜的污染。清除Ⅰ级和Ⅱ级生物安全柜的污染时，应当将适量的多聚甲醛（空气中的终浓度达到0.8%）放在电热板或电热盘上（在生物安全柜外进行控制）。然后在生物安全柜内放置第二个放有多聚甲醛多10%的碳酸氢铵的加热板或盘。第二个盘上覆盖一个能够从远处将其移走的盖子（如连接一个能够从生物安全

柜外拉动的绳子），从而尽量减少对甲醛气体的提前中和。如果相对湿度低于70%，在使用强力胶带密封前部封闭板前，还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热水的容器。如果前部没有封闭板，则可以用重型塑料布粘贴覆盖在前部以保证气体不会泄漏