生物化学第六章

第六章酶（Enzyme）酶学起始1833年：麦芽抽提液Payen和Persoz

用酒精沉淀

物质（对热不稳定）

淀粉单糖淀粉酶(淀粉糖化酶)公元前两千多年，我国已有酿酒记载。酶的研究简史1878年，Wilhelm

Kühne首次提出Enzyme一词。1894年，EmilFischer证明了酶的专一性，酶与底物之间作用的锁钥关系。1897年，Buchner兄弟用不含细胞的酵母提取液，实现了发酵。1913年，LeonorMichaelis和MaudMenten推导出酶反应的动力学方程式。1926~1930年，JamesSumner和JohnH.Northrop分别将脲酶和胃蛋白酶、胰蛋白酶制成结晶，确定了酶的蛋白质本质。1941年，GeorgeBeadle和EdwardTatum的“一个基因一个酶”假说首次将蛋白质与基因联系在一起，推动了生物化学与遗传学的结合。1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶(ribozyme)的概念。1995年，JackW.Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。人体和哺乳动物体内含有5000种酶。它们支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程。酶在生物界中无处不在，生物体由细胞构成，每个细胞由于酶的存在才表现出种种生命活动。酶是一种具有高效性与特异性的生物催化剂。酶的概念：生物体内活细胞产生的，具有催化作用的蛋白质（某些RNA也具有催化作用）。

酶是具有高效性与专一性的生物催化剂。生物大分子，多为蛋白质，也有一些RNA有催化功能，称为核酶。具有催化剂共性催化特异性6.1

酶的概念与特点1、具有一般催化剂的共性

即能够显著提高化学反应速率，其自身数量和化学性质在反应前后保持不变，可反复利用。2、酶具有高度催化效率研究表明，酶催化反应的速率比非催化反应高105-1017倍。酶的特点：酶的催化效率可用转换数（TN）表示，即在一定的条件下，每个酶分子单位时间内（通常为1s）转换底物的分子数。酶的转换数：4000万（H2O2），1(溶菌酶)。生物体内的绝大多数反应，没有酶的情况下几乎都不能进行3、酶具有高度专一性每种酶只能作用于一类或一种底物，酶对其催化反应的类型和反应物有严格的选择性。

酶催化的化学反应称为酶促反应，酶促反应中的反应物称为酶的底物。淀粉酶只能催化淀粉的水解反应纤维素酶只能催化纤维素的水解反应4、酶容易失活5、酶活性的可调控性生物体可对酶活性调节控制，使其适应生理功能的需要。酶的化学本质6.2

酶的化学本质与组成除核酶外，酶都是蛋白质。实验证据：

从生物材料中分离出某些纯的蛋白质，溶解后有酶的活性。

对酶进行酸碱水解处理，最终产物经分析为氨基酸。

用蛋白酶降解待研究的酶，发现酶失去活性。

用蛋白质变性剂处理酶，可使酶失活。酶的催化活性要依赖于蛋白质结构的完整性，当酶的一级结构或二、三、四级结构改变时，酶会失活。根据化学组成分为：单纯蛋白酶（单纯酶）缀合蛋白酶（结合酶）单纯酶：仅有氨基酸组成

如：脲酶、淀粉酶、核糖核酸酶等结合酶：除氨基酸残基，还有金属离子、有机小分子等化学成分，这类酶又被称为全酶（holoenzyme）。酶的化学组成作为电子、原子或基团的载体参与反应，并促进反应单独存在无催化活性，二者结合而成的全酶分子才具有催化活性单体酶：只有一条多肽链组成；寡聚酶：由两个或两个以上的亚基(相同或不同)组成；多酶复合体：几种酶形成的复合体。根据酶蛋白分子结构不同，酶分为：酶的类型不能解离为更小的单位。如：核糖核酸酶、蔗糖酶、羧肽酶A亚基间以非共价键结合，易在酸碱或变性剂作用下彼此分离，使酶失去活性，因此寡聚酶完整的四级结构是酶活性所必需的。有利于细胞中系列反应的连续进行，以提高酶的催化效率，便于机体对酶的调控。单体酶寡聚酶1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶多酶复合体丙酮酸脱氢酶复合体

习惯命名：系统命名：6.3

酶的命名和分类根据酶的底物和酶促反应的类型命名如：蔗糖酶、麦芽糖酶、淀粉酶如：水解酶、转移酶、脱氢酶当酶促反应具有相同名称的底物时，还需标出酶的来源。如：胃蛋白酶、胰蛋白酶酶的名称需标示酶的底物与酶促反应的类型。如一种酶催化两个底物，命名时用“：”将两个名称隔开；若底物之一是水，则水可省略。如

乙醇脱氢酶乙醇：NAD+氧化还原酶脂肪酶脂肪（：水）水解酶，此处水略去不写酶学委员会国际酶学委员会(I.E.C)规定，按酶促反应的性质，可把酶分成六大类：1.氧化还原酶类(oxidoreductases)：指催化底物进行氧化还原反应的酶类。如：乳酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶。

氧化酶催化反应通式：

A·2H+O2A+H2O2或2（A·2H）+O22A+2H2O脱氢酶催化反应通式：

A·2H+NAD（P）+

A+NAD（P）H+H+2.转移酶类(transferases)：指催化底物之间进行某些基团的转移或交换的酶类。转移不同的基团的反应由不同的转移酶催化。如：转甲基酶、转氨酸、己糖激酶、磷酸化酶等。转移酶催化反应通式：

A·X+B

A+B·X

3.水解域酶类(hy落dr傻ol慰as蔬es)：指具催化铁底物闹发生技水解盲反应伯的酶暗类。例如皂：淀掠粉酶戚、蛋貌白酶翅、脂旁肪酶竞、磷煎酸酶抗等。水解慌酶催梢化反取应通绸式：A·BA+幕B4.裂合娃酶类(ly做as凭es)：指雀催化有一个对底物体裂解证为几荣种化外合物用，或烦由几怀种化景合物蔽缩合挺为一秩种化铃合物驻的酶遍类。警这益些反售应均碧涉及询从一藏个化乐合物混移去民一个暑基团纹形成途双键纤的反每应或鞠逆反列应。例如:柠檬滩酸合夹成酶防、醛剥缩酶佣等。裂合笛酶催昆化反茫应通微式：A-栋B+颠HO糠HAO茫H+吵BH5.异构警酶类(is窜om摔er更as河es)：指催籍化各镇种同糠分异灶构体意（分唤子式复相同冒，结馒构式谣不同秆的化凶合物)之间丽相互拼转化培的酶曲类。异构突反应潜是分惹子内咐部基畅团进哨行重好新排雪列的群反应侮。例如环：磷更酸丙躬糖异妨构酶气、消菠旋酶虹等。异构胳酶催也化反卸应通蝴式：A彼B6.合成廊酶类(连接府酶类奇，li枣ga共se如s)：指萌催化治两分叮子底备物合霸成为旷一分透子化码合物飘的酶抢类。由合裳成酶页催化域的反朵应一巷般是佛吸能册反映狡，需摇要有AT钢P等高侄能物阻质参收与，遵这是奔区分品合成披酶和捎裂解嚼酶的无重要译依据担。例如励，谷丑氨酰充胺合祝成酶浆、氨牧基酸书：tR肯NA连接闹酶等予。合成旬酶催透化反症应通泼式：A+B扇+A粥TPAB仍+A搞DP宰+P屯i或A+岩B+装AT典PAB安+A要MP事+P罚Pi6.会4酶的材专一负性蔗糖酶底物：蔗糖如：糖*“锁轰与钥雾匙”橡假说(l乞oc氧k敏an班d戚ke第y狡hy扛po混th舱es冠is否)认为卵底物杏分子佩或底递物分槐子的似一部艰分象惹钥匙么那样竞，专待一地喂楔入留到酶腰的活眯性中蚀心部报位，万底物件分子讽与酶蛮分子祝在结闷构上须具有辈紧密会互补劳的关都系。酶的口专一毯性假股说该假券说的局限脑性：不柔能解沉释如础何能箩同时灿催化顿可逆玩反应爬的正趴、逆矮反应估。*诱导万契合删假说(i甘nd沸uc芹ed拐-f饼it派h胡yp灭ot主he浮si狂s)酶底加物复战合物E+SE+PES认为游酶分许子的联结构削并非哗与底安物分壳子正聪好互盖补，袋当酶垃分子脆与底亩物分瓦子接塔近时樱，酶冷蛋白健受底宝物分余子的金诱导延，其闪构象辞发生淹有利耀于底碑物结岛合的忘变化赚，酶浆与底运物在宿此基采础上易互补帖楔合棉，进椒行反些应。该假说更接近酶与底物相互作用的真实情况羧肽枝酶的广诱导继契合删模式底物6.弱5酶的陵作用越机制反应践物若糟要转刻化为杆产物培，必箱须首颈先进栽入一写种能种量更堤高的箱状态味，称久为过渡眠态。活化米能:底物和分子扇从初谋态转排变到辈过渡森态所芒需的峡能量幅。过渡态∆G酶催零化作妨用的太本质滩：降数低反川应的构活化叹能。酶与壁底物护复合糕物的侧形成6.裂5.影1酶的鸣活性桂部位整个狂酶分圆子中丙，只珠有一然小部腐分区腔域的虚氨基税酸残闻基参兴与对处底物偶的结孝合与泼催化谣作用羊，这摩些特轨异的辨氨基按酸残缴基比冬较集慈中的暗区域粮称为仓酶的活性膊部位，或活性撑中心。酶的挖活性埋中心（ac椒ti忘ve糟ce拆nt革er）胰凝乳蛋白酶的一级结构和空间结构活性游部位豆的组往成：位于活性中心以外，还存在维持酶活性中心应有的空间构象和（或）作为调节剂的结合部位所必需的基团。活性中心外的必需基团结合部位与底物相结合催化部位催化底物转变成产物

每种酶可以有1个或几个结合部位，每个结合部位至少结合一种底物。决定酶的催化能力和酶促反应的性质。决定诱酶的专一是性底叮物活性盏中心速以外匙的必动需基浊团结合熄基团催化叶基团活性中心

活性快部位小的特晕点肽链折叠酶活性部位的形成酶的活性部位在酶分子整体结构中只占很小的部分其体积通常只占酶总体积的1-2%酶活污性部课位氨通基酸肺残基夸一级荒结构贸相距畏很远在高级结构中相互靠近II隶.酶的密活性桂部位惰具有庄三维粥立体剃结构II劣I.酶的服活性叉部位引含有特特定晨的催无化基愈团

催化基团

氨基酸侧链的化学功能团

辅因子的化学功能团如：痛羟基喊、巯甚基、四氨基秤、羧捐基等史。如：与丙酮毁酸脱业羧酶忘的硫携胺素祸焦磷您酸等IV.酶的活性部位具有柔性己糖激酶与其底物之一葡萄糖结合后构象的改变活性部位两个结构域靠近V.酶的池活性针部位祸通常程是酶独分子党上的拾一个妇裂隙结合爹基团催化多基团他将项底物呆分子异包围鄙起来勺，为鄙即将饼发生锈的反败应提索供了鄙一个骄微环锦境（政通常偷是疏瞎水环搭境）佛。酶尚的活薯性部隙位对潜酶的榴整体饭结构需有较类高的廉依赖零性，似一旦甲酶的洲整体怀空间年结构晴被破偶坏，咽酶的月活性新部位刃也就亏被破父坏，欢酶就肠会失洗活。溶菌汉酶的候活性催中心欢是一枕裂隙喜，可寨以容撑纳肽避聚糖紫的6个单翠糖基丙（A，B，C，D，E，F）。催化喜基团幅是35位谷秤氨酸究，52位天匪冬氨业酸；结合倒基团观是10疮1位天色冬氨叮酸和10抗8、62、63位色锣氨酸击。溶菌菌酶的狂活性番中心6.好5.酬3酶具谜有高烘催化默效率祸的分这子机滨制邻近跌效应贝与定绢向效恒应促进凝底物筒过渡饱态形挤成的扯非共辅价作碧用酸碱卡催化串作用共价坚催化遵作用金属篮离子院催化：（一树）邻佳近效这应与剃定向露效应反应谨速度嗽上升邻近效应与定向效应示意图两者共同作用可使反应速率升高约108倍当酶渣与底肿物结令合后故，酶勾与底浸物之吩间的指非共形价作迟用（白如氢洲键、信疏水乎相互极作用圾等）窝可使定底物傻分子骂绕其询敏感丛键发谁生形变，同敏时酶法活性订部位辞的构锋象也堵在底郑物的废影响轮下发托生改演变，恳从而腐促使示底物院过渡练态的鼠形成线，反朵应活性化能店被降今低，亿反应稿速率娃加快但。（二厨）促各进底爪物过育渡态垄形成现的非亮共价乘作用（三绸）酸诊碱催厉化作敬用广义怀的酸针碱催钉化指通俗过质子锋、氢膏氧根绣离子以及蛇其他围能提鞠供质匹子和楚接受畏质子反的物堡质进蛾行的番催化浆。生破物体迁内的呈反应绸以广云义酸馅碱催案化为载主。在酶爱分子淋中有货许多酸性炮或碱庭性氨兆基酸拍残基，它打们可粘作为灭质子市受体步或质溉子供史体，毛在特斩定的院条件区下起盐催化呢作用悬。如：谷氨闭酸/天冬赴氨酸熟残基努侧链拼的羧困基，寄赖氨繁酸残融基侧越链的纵氨基小等影响纱酸碱爽催化怨反应尿速度添的因额素有搏两个凯：1、欠酸碱湾的强踩度2、辛酸碱春基团咏供出敞质子义或接畏受质凶子的独速度惹。狭义穴概念这一反应也可通过广义碱催化而发生，催化剂从酮得到质子导致另一种新的过渡态产生而提高反应速率。酮–烯醇酷互变稀异构研反应读中，么在无绒催化薄剂参贫与时坝，由被于生芹成类爪似碳亮负离慢子过听渡态景所需僻的自绞由能宅高，喉故反伸应速样率极御慢。在酸催化时，催化剂（酶）的质子被提供给酮，导致一种新的过渡态产生，形成该过渡态所需活化能较低，因此提高了反应速率。（四茅）共翼价催就化作熔用共价井催化：指贫催化最剂通脆过与猫底物枝形成宅相对躺不稳昂定的快共价碧中间缘瑞复合柳物，著改变归了反垃应历良程，纤由于方新历姻程所期需活孩化能历更低棚，因努此反亩应速立率得校以提刊高。亲核巴催化共价土催化亲电模催化参与困共价屡催化茧的基盆团有顷：组晴氨酸域残基厘侧链搭的咪痒唑基炮，半倍胱氨果酸残类基侧需链的疫巯基船，丝傻氨酸染残基机侧链弯的羟推基等1、亲核国催化井作用：指仔催化忧剂作垂为提内供电您子的亲亲核僵试剂绞，攻巡寿击反甲应物壮的缺样电子惰中心咬，与唤反应早物形茂成共时价中粒间复虫合物算。非催化反应：酶分殿子亲政电子马的基超团有方亲核笑碱基注被质区子化布的共各轭酸梯。如：NH3+、在酶拥的亲辫电子在催化亩过程中中，降有时睛其必缠需的慢亲电凯子物百质不酸是上角述的东共轭羡酸，伏而是货由酶屯分子木中非诊蛋白胜组成工的辅析助因抬子提监供，匪其金苹属阳郊离子夏是很慌重要土的一碌类。2、亲电吸催化膊作用：指伞催化举剂作备为吸自取电雁子的塔亲电精试剂慢，攻灿击反皮应物波的负观电中病心，缝与反镇应物厉形成粱共价户中间旦复合屋物。（四商）金制属离渴子催扣化作墙用1、提柳高水漏的亲坚核性件能如：碳酸捎酐酶活性秩部位窄的锌劈燕离子旷可与境水分避子结辣合，犬产生花羟基脾，成丈为强统的亲叉核试老剂。2、通过静电再作用璃屏蔽陵负电荷烟，利于潮下一敌步反询应如：焦激酶订底物Mg2+-A竟TP复合魄物，Mg2+屏蔽AT膀P磷酸绑基的耳负电付荷，牌使其幅不排蔽斥亲给核试代剂的涌攻击3、通过结合老底物牺为反存应定沾向4、在谢氧化亏还原序反应证中起猜传递贫电子毙的作孕用在需输要金盆属离她子的乱酶促行反应疲中，国金属剧离子简可通替过多有种途芒径参阅加催叉化过阀程。酶的滩活性融部位庸一般冒都含笋有多珠个起舟催化姜作用廊的基统团，决这些庙基团麦在空辽间上给有特逆殊的舌排列祸和取疲向，姑可以疾通过糖协同睛的方钱式共大同作孕用于蔽底物烧，提枪高底价物的羞反应爹速率册。6.准5.尺4酶作柄用机差制实输例——胰凝守乳蛋仙白酶胰凝醉乳蛋尊白酶割：属植于丝逢氨酸蛋白译酶家倡族天然随有活蹲性的重胰凝辩乳蛋夫白酶汤：由三阳段肽己链组航成其间规通过5个二焦硫键工连接活性再部位煮处于两酶表盒面的墙一个档裂隙寇中Se蓬r19老5,也Hi槐s57,厕As确p10洗2关键壳残基椭球状的三级结构丝氨酸蛋白酶专一性：Se通r19葛5附近迎的疏烦水口凭袋，膛决定旦其只买容纳封芳香贷族与凝大的馒疏水庆性氨仿基酸苏的侧资链第一尤阶段椅：酰撒化反呼应，次乙酰史化底特物形程成酶饱－底龙物共拢价中届间复墙合物菠，并许释放碑出第碌一种贝产物烈；第二携阶段由：脱券酰反偷应，嘴水分昏子攻罗击中烦间共蚕价复炸合物被，去购乙酰差化，消并释蕉放出滩第二储种产摄物，悟酶回沫复到故初始艺状态折。胰凝尊乳蛋酬白酶析催化夕底物树的反享应包荐括两陡个阶攻段：底物ES共价但复合舅物结合焰底物释放肠出胺止类产既物释放抽出羰羊基产允物被水勇亲核篮攻击四面幸体中挪间物跳瓦解游离待酶此过程中，三种氨基酸残基之间协同配合，His57的主要作用是碱催化作用,Ser195是亲核催化作用。6.轨6酶促碗反应乓动力伍学酶促堡反应段动力劝学：刺研究酶促矮反应财的速鞠率以及影响此速袋率的虏各种因素的科浩学。通常血酶促格反应毅的速活率在师反应跑早期鼠阶段涨保持旗不变行，此滥后随舞反应姻时间医增加企而逐银渐降湖低。因此盼一般潜测定晨酶促棒反应你的速惨率是填测定粮酶促对反应纹的初尘速率倘。率酶促聪反应川的影雄响因横素包凭括：酶浓却度、劣底物免浓度抗、抑柿制剂宪、温窗度、pH拥、激活贪剂等。※廉研究匹一种代因素模的影失响时中，其矛余各耳因素勾均恒价定。6.疲6.恭2底物想浓度非对酶它促反索应速屋率的淹影响在酶制浓度眼保持违不变毙的情怖况下恶，以钟反应随速率腿对底诊物浓醉度作聪图得虫到动阅力学锋曲线亮。在其趣他因品素不影变的拥情况逗下，底物胸浓度挽对反唉应速脏度的扔影响浸呈矩形加双曲宁线关鹅系。当底盆物浓乐度较裕低时廉：反应吸速率独与底返物浓羽度成络正比；反尾应为一级士反应。[S]VVmax19骡03年，吊蔗糖哨酶催钱化蔗票糖水允解实挺验：随着刘底物垦浓度茅的增粉高：反应努速率不再瓣成正仰比例加速引；反潜应为混合删级反臭应。[S]VVmax当底刚物浓漂度高蜘达一芒定程族度：反应闻速率不再私增加，达减最大独速率窝；反棵应为零级自反应。[S]VVmax底物浓度反应速率根据唇该实慌验结离果提菠出了酶底佛物中计间复消合物手学说，根滤据该歉学说惜，中解间复退合物立分解肠成产逆物的剂反应堆速率娃可代际表酶振促反河应速垦率，歼其与啄中间伙复合柄物浓堂度成录正比栽。C复合片物与C底物呈线锡性关峰系酶数寒量有明限，C复合民物与C底物呈非最线性酶饱吹和，C复合胞物不随C底物变化※19骆13年Mi达ch恳ae语li悼s和Me忙nt论en提出反应初速度符与底抛物浓疯度关俘系的山数学袜方程纸式，即米氏壁方程，简班称米域氏方僻程式丈。V:疯不艺同[S]时的稼反应冤速度[S]:脾底胆物浓预度Vma逃x:驳最哪大反纱应速闲度Ｋs:讽米疮氏常控数（塌酶底数物复布合物喉的解碎离常梨数）Ｖ──Vmax[S]Ks+[S]＝6.碌6.寄3酶促窑反应驻的动兴力学私方程凤式定量反映了酶促反应速率与底物浓度的复杂关系。k1k2k3k4E+责SESE+军P※1925年Br昆ig救gs和Ha蒙ld猜an筒e提出豪稳态景理论求，对影米氏屈方程塌进行寺了修茂正，祸将酶受促反察应分耕为两步步：ES推导酷基于全两个挽假设奖：1.纠E与S形成ES复合退物的桶反应番是快工速平矮衡反选应而ES分解栽为E及P的反派应为植慢反痛应，狭反应历速度日取决浩于慢逼反应贼即V＝固K3[E左S]2.的S的总继浓度借远远运大于E的总秤浓度登，因索此在简反应美的初倍始阶判段，S的浓阵度可支认为炕不变刘即[S]陷＝[罚St]稳态慈：是指ES的生必成速搭率与写分解芝速率笛相等遥，即[E屑S]恒定冲。k1k2k3k4E+或SESE+恢P在稳态下，ES的生成速率为：V1=K1[Ef]

[Sf]+K4[Ef]

[Pf][Pf]:互很麻小，柔忽略洽不计[Ef]=[贫E]伍-[肠ES青][E很]：酶的差总浓泼度，[E茄S]：中间狮复合脸物的要浓度[Sf]=牌[染S]奥-[象ES义]-[Pf]≈[S录]拒(百[S景]：底物软的总物浓度)V1=K1([舰E]怖-[号ES削])跟[你S]ES的分解速率为：V2=K2[ES]+K3[ES]K1([疮E]－[E床S]料)骂[S桨]＝K2[E果S]持+犬K3[E粮S]K2+K3＝Km

（米氏常数）K1令：则:[ES]=

K1[E][S][S]+(K2+K3)/K1整理得:[ES]=

[E][S][S]+Km酶促寻反应例速率因用产浊物的脸生成兆速率羡表示首：V＝孙K3[E穿S]摆=K3[E][S]Km+[S](1励)k1k2k3k4E+锅SESE+谈P当底耀物浓势度很架高，口将酶征的活拳性中给心全谎部饱韵和时拿，即[E夫]＝[E决S]，反应赵达最梅大速懂度Vma饼x＝K3[E粪S]＝K3[E串](2殊)将(2馒)代入(1持)得经婚稳态单理论录修正走过的吴米氏炸方程点式：Vmax[S]Km+[S]V＝[S识]很小巨时，[S齐]<帅<Km，则V资=Vma氧x[S]/话Km，一勒级反头应[S勉]很大叔时，[S地]>毅>缓Km，则V雹=Vma家x，零阳级反攀应[S质]册=乒Km，则V亩=Vma弟x/2，反打应速滔率为扛最大些反应锻速率启的一主半，渠混合帖级反迷应，Km值是反应烧速率纸为最摸大值译一半输时的接底物锄浓度(m知ol喝/L厉)Km与Vma字x的意晌义Km值：①Km等于题酶促夜反应泛速度鬼为最遭大反拢应速雀率一和半时爬的底曾物浓晋度。②意义崭：a)饰Km是酶的衫特征宽性常赶数之角一；b)在固酬定的汽反应瘦条件朗下，Km的大形小只讲与酶覆的性啦质有墨关，承与其墙浓度泉无关咳；c)当K2>>宏K3时，Km≈Ks（=K2/K1）,可近似排表示豆酶对迅底物够的亲亡和程僵度；d)不同亮的酶赤对于不同斜底物怎有不爽同的Km值，页因此善可以挺通过纤测定Km来鉴妻别酶膏和酶则的最阶适底须物（Km最小缩慧的底构物）惧。Vma捕x值：酶完倾全被博底物另饱和价时的灭反应自速度奇，与酶扩浓度置成正猾比。Km大表示亲和程度小，Km小表示亲和程度大。双倒法数作快图法(d仓ou直bl员e咽re嫂ci衰pr点oc辈al耽p品lo笔t)，又腐称为林-贝氏(Li封ne怒we率av貌er-各Bu唤rk杆)作图万法

Vmax[S]Km+[S]V=两边同取倒数米氏雄常数Km和Vma有x的求稀法-1床/Km1/桌Vma蝇x1/[S]1/V（林－贝氏方程）+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]通过郊试验穗方法陡测得V与[S逝]后，旬以1/兰V对1/筑[S袭]作图谎，得敏到一茶条直唉线。二、pH的影建响与旬最适兴的pH最适pH：酶催爱化活性链最大时的对环境pH胃蛋白酶淀粉酶胆碱酯酶三、豪温度餐的影牺响与售最适着温度*散低温悦的应够用双重蜻影响：温度崭低时，升晶高温啊度酶至促反鼓应速度挖升高；温度局高时，心升高膊温度判可引染起酶前的变锡性，刚反应速度金降低。最适显温度（op尽ti弓mu舌m作te挡mp姻er劳at漏ur娘e）功：酶促仗反应愿速度最快时的沾环境温度最适pH和最毯适温威度都内不是拍酶的特征听常数偶。四、牌酶浓量度对播反应菠速度浸的影贤响当[S]肃＞＞周[E传]，酶可抗被底喂物饱现和的串情况但下，脆反应之速度逝与酶纷浓度弊成正察比。关系来式为扛：V所=预K3子[穗E]五、乳激活更剂的里影响凡能齿提高蛋酶活荣性，今加快缺酶促耗反应秩的物四质都晒称为激活握剂（ac伪ti脸va掩to此r）。激活聪剂的绣作用径机制享：①与酶柔分子葡中的承氨基的酸侧匪链基炊团结喝合，歉稳定像酶催射化作欣用所津必需轮的构帐象。②作埋为底遥物（位或辅酒酶）朴与酶雷蛋白尼之间锡联系岛的桥顿梁。③作锻为辅秀酶或有辅基扶的一肚个组稀成部故分协泊助酶舞的催蛋化作翅用。六、膝抑制肿剂对欧反应斩速度卧的影驴响酶的胀抑制凉剂(in悄hi妖bi链to蛇r)：凡能则使酶悲的催皆化活性舟下降而不引咐起酶变蛋白县变性的物毯质称晨为酶店的抑窝制剂执。※区别协于酶申的变叼性：抑制做剂对狗酶有逆一定绵选择促性引起蝇变性剪的因写素对苗酶没这有选胳择性抑制裕作用偏的类刺型：不可秤逆性予抑制吵（ir熔re除ve耗rs具ib有le换in馆hi那bi叮ti王on）可逆世性抑还制（re栗ve向rs愤ib乒le瞧in感hi知bi邮ti约on）：竞争性抑制；非竞争性抑制；反竞争性抑制；(一)白不咐可逆帆性抑庙制作艇用概念乏：抑制朝剂通设常以共闸价键盘与酶勿活性添中心袄的必掘需基僻团相尿结合，使怨酶失险活。举例谜：有机样磷化副合物羟基浆酶解毒挎-孕-炒--铸-或-益解磷州定(PA碗M)重金蹈属离住子及松砷化忍合物巯基悉酶解毒优-让-液--游-摇-适二巯渐基丙侨醇(BA椒L)1、难非专趁一性镰不可弦逆抑巴制抑制联剂与明酶分绣子中雾一类堂或几团类基扭团共价蛮结合，使割酶失母去活田性。巧如金套属离源子是冤多种便酶的折抑制功剂。2、铃专一造性不地可逆欠抑制惠剂抑制轿剂专钻一作蝴用于史酶的活性私中心或必需再基团，以共价志键结估合，从排而抑马制酶持的活绝性。（二遮）可巷逆性原抑制撇作用概念按：抑制丘剂通防常以非决共价藏键与灾酶或馒酶-注底物碎复合杆物可匠逆性丛结合围,使滩酶的犯活性王降低引或丧犹失；抑制我剂可这用透昂析、涝超滤画等方屿法除甘去。竞争巡寿性抑龟制(co嘱mp娃et刺it失iv去e况in滥hi耗bi纤ti翼on)非竞红争性测抑制(no箱n-伟co但mp茧et县it医iv万e摊in嗓hi像bi左ti兽on)反竞侨争性凡抑制(un躲co肠mp料et睁it屯iv绘e喊