生物化学考前辅导班

《生物化学考前辅导》生命科学系杨卫民content一、各类学校题型与分值卷面分析填空：20～

30空，10～

15分；选择：10～

15题，10～15分；名词：5～10个，10～20分简答题：5～8个，20～40分；

计算：1～

2题，10～

15分；问答题：40～

50分；机会题比例很低！content二、反复考察的知识点样卷分析酶活计算DNA复制、RNA转录、蛋白质的生物合成生物氧化代谢调节：酶活、酶量（操纵子）；激素糖、脂、蛋白、核酸代谢名词解释：化学渗透学说是目前最有说服力的解释氧化磷酸化作用机理的学说，电子传递释放出的自由能驱动H＋从线粒体基质跨过内膜进入到膜间隙（膜外×），从而形成跨线粒体内膜外高内低的H＋电化学梯度。当H＋通过FOF1-ATP合酶回流进入线粒体基质时生成ATP2.化学渗透学说

关于光合磷酸化的机理有多种学说，如中间产物学说、变构学说、化学渗透学说等，其中被广泛接受的是化学渗透学说。化学渗透学说(chemiosmotictheory)由英国的米切尔(Mitchell

1961)提出，该学说假设能量转换和偶联机构具有以下特点：①由磷脂和蛋白多肽构成的膜对离子和质子的透过具有选择性②具有氧化还原电位的电子传递体不匀称地嵌合在膜③膜上有偶联电子传递的质子转移系统④膜上有转移质子的ATP酶在解释光合磷酸化机理时，该学说强调：光合电子传递链的电子传递会伴随膜内外两侧产生质子动力(protonmotiveforce,pmf)，并由质子动力推动ＡＴＰ的合成。许多实验都证实了这一学说的正确性。问答：以原核生物为例，阐述蛋白质的生物合成过程。（10’）答：蛋白质的合成亦称翻译，可分为四个阶段：1.氨基酸的活化→氨酰tRNA（2’）

2.大肠杆菌中肽链合成的起始（3’）mRNA上的SD序列可与小亚基上16SrRNA的3’进行碱基配对，在起始因子的参与下先形成30S起始复合物，再形成70S起始复合物（70S-mRNA-fMet·tRNAfMet）。3.多肽链的延长（3’）在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位，转肽和移位三个步骤。重复进位、转肽、移位，肽链沿N→C方向延伸。 4.翻译的终止及肽链的释放（2’）锦上添花：新生肽链的折叠与后加工蛋白质合成的机理一、氨基酸的活化二、原核生物多肽链的合成过程四、真核生物多肽链的合成三、多核糖体与核糖体循环氨基酸的活化EEAAEAAtRNAAAEtRNAAAEtRNAAA氨基酸ATP+氨酰腺苷酸E-AMPPPi第一步AMP第二步E氨基酸的活化3-氨酰-tRNAN-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成CHO-HN-CH-COO-tRNACH2CH2SCOO-

+H2N-CH-COO-tRNACH2CH2SCOO-Met-tRNAiMetfMet-tRNAtMetN10-CHO-FH4FH4转甲酰酶氨酰-tRNA合成酶特点

a、专一性：

对氨基酸有极高的专一性，每种氨基酸都有专一的酶，只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸。

对tRNA具有极高专一性。

b、校对作用：氨酰-tRNA合成酶的水解部位可以水解错误活化的氨基酸。原核生物多肽链的合成过程

原核生物多肽链的合成分为三个阶段：肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放。1、肽链合成的起始2、肽链的延长3、肽链合成的终止及释放肽链合成的起始30S亚基•mRNAIF3-IF1复合物30S•mRNA•GTP-fMet–tRNA-IF2-IF1复合物70S起始复合物codonanticodonA位P位

mRNA

+30S亚基-IF3A位IF-353IF2GTPP位IF3IF2IF1IF2-GTP-fMet-tRNAIF350S亚基IF2+IF1+GDP+PiIF-1IF170S起始复合物某些原核生物mRNA中蛋白质合成起始区的序列肽链假的延纠长12122323进位肽键育形成移位进位(Tu\T浑s)GTPGTPN-端235´3´C-端肽键接形成15´3´（EF邀-G）肽链谁合成额的终膊止及精释放（1）释倡放因烦子RF1或RF2进入且核糖杨体A位。（2）多竭肽链羡的释社放（3）70处S核糖甲体解不离53UAG30S亚基50S亚基53UAGtRNARF肽键的将形成Tu\T鞋s循环TsTs寨-G蝇DP多多核昂糖体铅与核生糖体屑循环合成尤完毕并的肽剃链多核糖体3ˊmRNA延伸中的肽链5ˊ核糖热体循件环多细州胞水呼平分子池水平细胞间水平神经投系统墓调节激素符调节酶调熄节蛋白浩质脂水糖核酸无机管盐等主要敢知识昏点回甲顾前扬言酶和时辅酶生物光氧化糖化攻学及磁糖代淡谢脂化继学及斤脂代筋谢、赤生物院膜核酸写及核物酸代稿谢蛋白街质及娇蛋白雁质代鄙谢物质景代谢浇调节碗及激敌素的第作用城机制主要柴知识娃点回情顾目崖录主要俊知识纱点回控顾一、票酶与柱辅酶酶的本质、催化特点、分类

核酶、抗体酶、固定化酶、别构酶酶的组成、活性中心概念酶作用专一性假说——诱导契合学说酶反应动力学

米氏方程、转换数（Kcat）、酶活抗体宝酶8丙0年能代后堪期出约现的屑，本扑质是免疫园球蛋魄白。在骑易变谎区被吴赋予蒜了酶－笛催化紫性。核酶敌是非脆蛋白带酶。它是劳一类坚特殊今的RN各A。能恼够催商化RN站A分子棕中的饥磷酸泛酯键撒的水既解及宁其逆赵反应春。当酶只被底训物饱甚和时雁，每一睛催化奏中心在单位哲时间内所能方转换睁底物孙分子两的数溪量，详即每摩楼尔酶宪活性傍中心缎在单餐位时裤间内泰转换犯底物端的摩续尔数（/S）。分子按活性寡聚苗蛋白（多骡个亚妙基）1I部U：在兰最适尿条件铁下，剂每分雁钟内炕催化1μmo演l产物撞生成瓶所需梳的酶药量。比活董性（U/朵mg蛋白拳质）酶活威力计呀算题10ml唾液队，稀翁释2虫0倍舰，取推1ml测定臂淀粉不酶活盗力，觉测知豪每5mi最n水解糕淀粉毁产生坚2.他5g还原绞糖,仁测定触其稀悔释液息中蛋厕白质阀含量崭为1mg价/m种l,计算唾液屿中淀缴粉酶拥的总皂活力数，比捕活力重，转毙换数样(S-1)。酶活殿定义晕：在亏最适土条件叛下每连分钟伴水解制淀粉蒙生成退1g葡萄滤糖的壶酶量炼称为游1个离活力葡单位酱。葡萄味糖分园子量物18剑0,余淀粉亭酶分坐子量别50夹00汁0。总活党力=摩20霉0х2.化5/5尊=1尸00娘U比活既力=慎2.足5/5挑х1熊=0新.5买U呼/m确g转换表数=虏(2舌.5幕/5х6测0х拆18旅0)/体(1冤/5х104+筒3)=1理2.字5х107/5野40收00丈=2愧31行4.毯8(S-1)主要户知识贩点回缎顾一、欠酶与强辅酶酶的回作用建机制理解垃酸碱陈催化衔、共倡价催专化等谢（P3难91）酶的抑制作用

三种可逆抑制剂影响酶反应的因素

温度、pH、激活剂0102030405060℃2.01.51.00.5产物麦芽糖的毫克数高级榜结构活性女中心呆解离ED示TA半胱铅氨酸金属苍离子酶促雨反应贩动力压学酶促能反应穴动力适学(k呜in均et催ic奸s捡of衣e壳nz屿ym序e-届ca觉ta纳ly宿ze高d址re蜻ac欧ti朴on漆s)是研弊究酶达促反量应速族度及质其影稍响因猴素的雹科学良。这些干因素舍主要守包括酶的肢浓度授、底辞物的秃浓度涛、pH、温老度、俯抑制恢剂和猾激活怎剂等穴。注意中：速愉度指反应踏的初程速度V0；研险究某遗一因守素对笋酶促爽反应袍速度禾的影朝响时似，应栗该维持止反应找中其冰它因窜素不作变。1）.米氏垦方程Km即为健米氏罩常数室，Vma凯x为最级大反辞应速黄度当反希应速帖度等蛛于最否大速滑度一半半时拿,即V=1撇/2Vma纹x,Km蓬=[梨S]上式桂表示尾,米卷氏常廊数是勒反应顾速度纯为最艰大值幼的一母半时用的底推物浓碧度。因此弃,米痛氏常框数的芝单位耻为mo多l/舌L。Km迷值小佩，1扁/Km测大，亲和钓力大黎。底物贪浓度裳对酶它促反扮应速扭度的缎影响1/V-1/Km01/[S]斜率=Km/Vmax1/Vmax双倒童数作寒图法酶的抑拌制耽(机制)Co草mp惨et样it堆iv钟eNo今n-蜘co握mp睁et腥it板iv似eUn党co滩mp汉et乞it煌iv故eEE另一结合悔区抑制短剂底物图解抑制机理及說明[I]只与自由圾的唉[E]結合颈，会与[S]竞争；[S]遥↑可克兵服撑[I]的抑袭制。[I]可与自由延的古[E]或岂[ES务]結合坑，[S]奔↑不能新克服美[I]的抑长制。[I]只能与[ES勾]結合信，[S]驱↑反而检有利炭[I]的抑走制。E+S

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（GTP，ATP)（酶饿、辅妄助因弯子、要全过荡程）逆转叨录酶逆转捧录酶语是一孤种多落功能状酶以RN球A为模炊板合凯成互展补的DN塘A链，形挠成RN甘A－DN杀A的杂尝合分子目。具有Rn册as奖eH样的赌活力峰，水混解RN姥A－DN面A的杂志合分谣子中惊的RN遍A。以新合成再的单演链DN漆A为模板昌，合雾成互活补链壶，形竟成双振链DN诸A分子夸。主要可知识紫点回箱顾6、RN务A生物系合成转录絮产物第的加夕工原核生物真核生物mRNAtRNArRNAmRNAtRNArRNA去除饶内含砍子加帽耍又加派尾甲基泡化3‘-奶CC启A-邪OH甲基电化修宰饰剪接稳、甲码基化砌修饰多数似不用弯加工7、原仗核细素胞基贡因表时达的洲模型—操纵彻子学家说主要嗽知识雕点回耗顾诱导操纵子（乳糖操纵子）

分解代谢

阻遏操纵子（色氨酸操纵子）

合成代谢

组成朴：启动勾子、操纵宵基因、结构族基因葡萄糖效应（降解物阻遏）衰减作用组成雀酶诱导尿酶cAMP受体蛋白（CRP）降解物基因活化蛋白（CAP）OR+cAMP作用于启动子，促进转录葡萄栗糖分喜解代烘谢产篮物抑犁制腺禁苷酸液环化奋酶活详性，cA丘MP减少障，分智解代挣谢酶严转录刊水平怀低。启动耀子操纵发基因结构宿基因启动驻基因墙，转只录调验控的各控制靠部位阅，RN氏A聚合洒酶的荐结合贝部位鬼，是梅基因览转录莫的起阴点。主要估知识屋点回游顾原核刊细胞纵基因脑表达译的模悲型—操纵酿子学清说诱导操纵子（乳糖操纵子）

分解代谢

阻遏操纵子（色氨酸操纵子）

合成代谢

衰减作用衰减望子：犯一种赏位于抹结构院基因适上游炮前导召区的启终止昂子。转录勤是否进行转录估是否继续主要肉知识鲁点回帮顾六、锹蛋白捷质及解蛋白星质降用解、召氨基济酸分肤解1、蛋励白质饼的基扶本单达位——闯AAα-氨基促酸结桨构式酸碱户化学伙（AAo、PI）光学症性质AA的分币离广分配妄层析导离欧子交烈换层孩析化学抹反应AA分类介（R基极松性特袋点）芳香族氨基酸（280nm）茚三报酮显没色、Sa奇ng抗er反应身、Ed怠ma平n反应主要音知识屿点回般顾六、猫蛋白公质及旨蛋白机质降缠解、勤氨基竹酸分脖解2、蛋段白质怕的四骗级结啊构一级吗结构奖：AA的排勇列顺失序肽键序一苗级结茧构测卵定二级墙结构蕉：借疮助氢贴键形纤成的棵规则荐结构四种三级达结构趴：疏秧水作蚕用系空间谦折叠分子帐伴侣缎功能樱单位四级结结构段：疏从水作枝用偷亚基指间相士互作或用别构卵酶X射线滚衍射毛法结构呢与功校能的幕关系狼（肌偿红蛋汽白、损血红诉蛋白贯）蛋白谱质的活变性本质敲：蛋白南质分李子中谷的次常级键亿被破珍坏，摘引起挎天然贿构象储解体离。现象误：生物连活性转丧失盐，一戏些侧挤链基滔团暴盘露，质溶解泊度降讽低形际成沉辫淀，枣分子粮结构弄松散湿，易集被蛋砌白水违解酶掉分解删。变性蓝剂：尿素头、盐场酸胍待、SD叨S超二依级结鉴构（寇基元房诚或膜锐体）拨：αα、βαβ、ββP2水20结构金域：漫功能放域，三级横结构朵的局溜部折领叠区市，相填对独畏立的侵紧密毙球实径体。P2峰22亚基：四级结构的蛋白质中每个球状蛋白质称为亚基。P242球状妄蛋白剖折叠猫层次主要棚知识认点回尝顾六、晚蛋白贤质及碧蛋白革质降典解、帆氨基逗酸分膊解3、蛋泡白质乓的分穗离、饰纯化混、表宿征蛋白糟质的绪酸碱舍性质纯化饭方法分子易大小溶解录度电荷选择薯性吸款附亲和袍层析凝胶过滤SDS等电点沉淀盐溶、盐析离子交换IEFPAGE疏水离层析蛋白浮质表锐面疏月水性孝差别生物屈学亲犬和力理解P3划15表7-穴7电泳赏纯含量智测定帐方法螺：凯公氏定盆氮（16少%）、稼双缩避脲法标（肽奇键）警、考芳马斯辉亮蓝脚法主要按知识呈点回段顾六、犬蛋白储质降闭解、峰氨基体酸分冬解4、蛋缘瑞白质啦的降投解①内源寇性蛋根白降宣解机队制：溶酶特体、邮泛肽柔标记②外源积性蛋痰白消役化：胰蛋衰白酶敬：碱聚性氨确基酸糜蛋备白酶贵：芳潮香族伶氨基鲁酸（胰凝凝乳胃蛋白扫酶）羧肽李酶：角羧基铲末端司肽（短小肽帮）氨肽邻酶：菠氨基直末端脖肽（游小肽酬）③外源币性AA吸收：依赖务于Na+的主痛动运桨输γ-谷氨渣酸酰穴基循利环（GS铁H）主要舞知识施点回艳顾转氨步基作拣用氧化遗脱氨（L-谷氨学酸脱袄氢酶捎）联合睁脱氨（转垄氨酶室与L－谷望氨酸真脱氢上酶联六合脱响氨、腺嘌摸呤核虾苷酸漆循环影联合启脱氨妇）氨的陡运输私：肌肉燃内葡幸萄糖-丙氨院酸循环（谷斩氨酸怒脱氢佣酶、切谷氨择酰胺唤合成吐酶）谷氨终酰胺关键对酶：氨甲馆酰磷定酸合增成酶与TC子A的联队系：精订氨琥犯珀酸AA种类裂：瓜度、精冶、鸟扑、天匀冬氨村酸等维生庄素作务为辅扎酶的烂作用一碳分单位FH岸4，S-腺苷娱甲硫鼻氨酸5、AA的分合解蛋白将质的师生物纠合成略（原造核生严物）主要枣知识奔点回毯顾AA的活悄化与葵搬运—氨基叉酰tR浪NA的合证成肽链葵合成下的起西始—起始土复合齿物的此形成四个忍阶段（70孝S-灵mR蛋NA递-f席Me砍t-火tR嚷NA）肽链赴的延技伸—包括进位,转肽,移位……侄.肽键虏的终磨止—终止co捞do博n信号时肽结构妥及功察能RN袖A种类李及作雾用蛋白铜质分子环伴侣蛋白废质的趣后加晚工（谨一级过、高困级）主要唉知识双点回沟顾七、滨物质贤代谢存调节怀和激徐素的开作用糟机制1、P5链40图39浇-1四大肃物质嚼代谢辽相互哪关系警示意铲图乙酰笨辅酶A的来乳源与污去路2、P5伟43图39扮-5主要芹产能果营养龟物分躺解代富谢的进三个录步骤细胞匪浆：EM铅P蔑H古MS脂肪隐酸合交成线粒婚体：TC吗A档β－氧运化腿氧狐化磷云酸化细胞览核：核酸存生物啄合成内质怪网：蛋白超生物批合成溶酶仅体：水解士酶主要滨知识梨点回酷顾七、咽激素廊的作差用机笼制激素赠由细惭胞分闭泌出纽奉来，境由体面液运慰往各巧靶器断官和啊靶细厕胞起待作用宾。高等洒动物办的激控素分顽三类免；含院氮类浙激素老、类巷固醇锄激素夏、脂界肪酸职衍生坛物激回素。作用赢机制遇：含氮垒类激荡素的睡作用晶机制——第二呜信使户学说类固探醇激倒素的标作用才机制——调节详基因隐表达一、锄膜受茧体—cA或MP作用僻途径二、贱钙及勾肌醇悔三磷贼酸作端用途挖径主要袍知识代点回裕顾七、阿激素减的作情用机拾制三、泛受体谨酪氨堡酸酶箱途径主要晚知识仪点回册顾八、辜基因途工程浸和蛋疾白质协工程P6斑14舞-6耗15提要基因脚工程抗与蛋束白质李工程基