2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库（历年真题）答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库（历年真题）答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共90题)1.对基因功能的研究，首先需要获取基因或基因片段，即______________。2.用蓝白斑筛选重组子时，白斑表示外源基因插入到载体中了。3.基因重组的步骤包括A、用PCR技术扩赠出大量的重组DNA分子B、用连接酶将外源DNA和载体连接C、通过转化将重组DNA导入宿主细胞D、用载体上的相应抗性筛选含有重组DNA的克隆E、将重组DNA导入人体，用于疾病治疗4.Klenow酶在有_________情况下，呈现DNA聚合酶活性，5.下列哪一种方法属于核酸分子杂交A、southernblotB、PCR扩增C、限制图谱分析法D、抗药性标志筛选6.人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。科学家应对多少染色体进行分析A、46条B、24条C、23条D、22条7.生命科学发展的历史场合中，经历了从描述生物学、_________到创造生物学三个发展阶段。8.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是____。9.下列哪一项不具有吸附DNA的功能A、经特殊处理的滤纸B、尼龙膜C、玻璃膜D、硝酸纤维素膜10.__________通常是指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业。11.作为基因工程所用的克隆载体必须具备以下条件A、复制原点B、有一个或多个用于筛选的选择标记C、具备合适的限制性核酸内切酶的单一识别位点D、有较高的拷贝数E、目的基因表达的调控序列12.下列对建立cDNA文库的描述不正确的是A、从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD、新合成的双链DNA甲基化13.DNA经限制性内切酶切割后可产生两种末端：___________和平头末端。14.下列是构建基因组文库的常用载体，哪一种载体需要用的受体细胞和其余三种不一样A、柯斯质粒B、YACC、BACD、噬菌体15.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗16.对柯斯质粒(cosmid)描述正确的是A、它具有COS位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶源化反应E、能与有同源序列的质粒进行重组17.构建cDNA文库的首要步骤是A、分离既定组织或者细胞的DNAB、分离既定组织或者细胞的mRNAC、逆转录合成cDNAD、cDNA的克隆18.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。19.何谓修饰作用？20.用限制性内切核酸酶HaeIII分别切割载体DNA和供体DNA后，可用E.coliDNA连接酶进行连接。21.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃22.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达23.关于黏粒载体的描述错误的是A、是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体B、既有质粒的特性，又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库

24.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链DNA是由自身引物引导合成，但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的合成。25.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒26.对松弛型质粒描述正确的是A、在寄主细胞中拷贝数较多B、可用氯霉素扩增C、一般没有选择标记D、上述A、B

两项正确27.重组乙肝疫苗是由下列哪种表达系统高效表达A、酿酒酵母表达系统B、丝状真菌表达系统C、昆虫表达系统D、巴斯德毕赤酵母表达系统28.高血压属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、艾滋病C、恶性肿瘤D、血友病29.分离既定组织或者细胞的_____________是构建cDNA文库的首要步骤。30.基因重组只能通过人工进行。31._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。32.第一个成功地用于基因工程的大肠杆菌质粒是pBR322质粒。33.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦34.巴斯德毕赤氏酵母表达系统较酿酒酵母表达系统具有哪些优势？35.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。36.1982年在美国诞生了世界上第一种基因工程药物A、重组人胰岛素B、人生长激素C、凝血因子D、干扰素37.Cosmid的特点元件是38.第一个作为重组DNA载体的质粒A、ColElB、pSCl01C、pUCl8D、pBR32239.核酸Tm的高低与DNA分子中_________的含量有关，其含量越高，则Tm越高。40.何谓溶原性方式？41.末端脱氧核苷酸转移酶起作用时需要A、二价阳离子B、一价阴离子C、二价阴离子D、一价阳离子42._________是指以精子为载体，通过动物受精过程将外源基因导入胚胎，产生转基因动物。43.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应44.反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。45.基因工程的两个基本特点是：分子水平上的操作和_________。46.目前应用最广泛的原核表达系统是A、酵母菌表达系统B、枯草杆菌表达系统C、大肠杆菌表达系统D、葡萄球菌表达系统47.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？48.何谓基因工程？49.cDNA合成中所涉及的三种工具酶：IT4-DNA连接酶IIKlenow聚合酶IIIS1核酸酶IVBal31核酸酶V逆转录酶A、I+II+IIIB、II+III+IVC、II+III+VD、III+IV+V50.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是A、限制酶和连接酶B、限制酶和水解酶C、限制酶和运载体D、连接酶和运载体51.可识别并切割特异DNA序列的称A、限制性核酸外切酶B、限制性核酸内切酶C、非限制性核酸外切酶D、非限制性核酸内切酶52.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra53.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。54.何谓星活性？55.一般来说，识别序列的碱基对越多，则这种酶在DNA上出现的频率越高。56.用蓝白斑筛选重组子时，IPTG的作用是：A、作为显色反应的指示剂B、作为酶的作用底物C、诱导载体上的抗性基因表达D、诱导载体上的LacZ基因表达57.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。58.在基因工程中，为了在细菌细胞中表达真核生物的基因产物，为什么通常要用cDNA而不用基因组DNA？为什么要在cDNA前加上细菌的启动子？59.常用的_________使抗生素失活，解除抗生素对转化细胞在转录和翻译过程中的抑制作用，使转化细胞得以继续生长。60.目前已知持续合成能力最强的酶是A、大肠杆菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶61._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。62.显性质粒63.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的理论上的三大发现对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发现是下列哪些A、发现了生物的遗传物质是DNA而不是蛋白质B、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制C、遗传密码子的破译D、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆E、逆转录酶的使用64.什么是穿梭载体？65.基因操作的核心部分是_________。66.对Ti质粒描述正确的是：A、可从农杆菌转到植物细胞中B、作为双链DNA被转移C、在植物中导致肿瘤D、介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素E、需要细菌的vir 基因帮助转移67.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、昆虫表达体系D、哺乳类细胞表达体系68.生物学上，利用两个不同系进行杂交，培养出比亲本更出色的后代，就是_________。69.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。70.进行体外重组时，外源片段和载体分子之间的物质的量比值一般为A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）71.Nick和Gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。72.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定73.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？74.包涵体型蛋白具有生物活性。75.酵母表达系统是最常用的真核表达系统。76.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？77.能通过分泌或运输方式定位于细胞周质甚至穿过外膜进入培养基中的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白78.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？79.商品化的限制性核酸内切酶均加多少浓度甘油作为保护剂A、10%B、20%C、50%D、30%80.cDNA文库的特点是什么？81.下面关于多克隆位点MultipleCloneSite（MCS)的描述错误的一项是A、仅位于质粒载体中B、具有多种酶的识别序列C、不同酶的识别序列可以有重叠D、一般是人工合成后添加到载体中82.基因工程的基本流程是A、目的基因的分离、获取与制备B、目的基因与载体连接构建成为重组载体分子C、重组DNA分子导入到受体细胞D、外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选E、外源目的基因的表达83.M13噬菌体颗粒是_________状的，其基因组为单链DNA。84.隐性质粒85.核酸修饰酶包括有哪些酶？86.在______技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。87.S1核酸酶的功能是A、切割双链的DNAB、切割单链的RNAC、切割发夹环D、以上有两项是正确的E、以上有三项是正确的88.试述理想质粒载体的构建原理？89.常用的DNA探针标记方法是切口平移法和随机引物法。90.既能在E．coli又能在S．cerevisiae中自我复制的载体DNA称为_________。卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:目的基因2.正确答案:正确3.正确答案:A,B,C,D4.正确答案:Dntp5.正确答案:A6.正确答案:B7.正确答案:实验生物学8.正确答案:EcoRl9.正确答案:C10.正确答案:生物制药11.正确答案:A,B,C,D12.正确答案:A13.正确答案:黏性末端14.正确答案:B15.正确答案:A16.正确答案:A,B,D,E17.正确答案:B18.正确答案:错误19.正确答案:指细菌的修饰酶对于DNA碱基结构改变的作用，经修饰酶作用后的DNA可免遭其自身所具有的限制酶的分解。20.正确答案:错误21.正确答案:B22.正确答案:A23.正确答案:D24.正确答案:正确25.正确答案:C26.正确答案:D27.正确答案:D28.正确答案:A29.正确答案:mRNA30.正确答案:错误31.正确答案:引物32.正确答案:错误33.正确答案:C34.正确答案:生长迅速，外源蛋白表达水平高，产物可翻译后修饰，产物可正确折叠和高效分泌，可利用简单无机盐培养基，高密度发酵，生物量大，实验室和工业操作简单。35.正确答案:细胞水平上的表达36.正确答案:A37.正确答案:cos位点38.正确答案:B39.正确答案:G+C40.正确答案:进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，随细菌染色体DNA复制，传给细菌后代。41.正确答案:A42.正确答案:精子载体法43.正确答案:D44.正确答案:正确45.正确答案:细胞水平上的表达46.正确答案:C47.正确答案:GATATC；AAATTT；因为它们是回文序列。48.正确答案:一般指利用分子生物学的手段，将不同生物的遗传物质按人们的意志或需要，进行基因的定向改造、突变与重组，从而使生物体的遗传性状发生变异。49.正确答案:C50.正确答案:A51.正确答案:B52.正确答案:A,B,C,D,E53.正确答案:错误54.正确答案:在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做星活性。55.正确答案:错误56.正确答案:D57.正确答案:原核生物58.正确答案:这是因为细菌没有内含子剪接系统，并且不能识别真核生物的启动子之故。59.正确答案:抗生素抗性基因60.正确答案:D61.正确答案:小鼠62.正确答案:指宿主细胞由于含有某种质粒而呈现出新的性状。63.正确答案:A,B,C64.正确答案:是指那些既能在真核细胞中繁殖又能在原核细胞中繁殖的载体。65.正确答案:基因克隆66.正确答案:A,C,D,E67.正确答案:D68.正确答案:杂种优势69.正确答案:错误70.正确答案:B71.正确答案:错误72.正确答案:A,B,C,E73.正确答案:启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子，表达系统常选用诱导型启动子，机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度的提高基因的转录水平。74.正确答案:错误75.正确答案:正确76.正确答案:盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。77.正确答案:B78.正确答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。79.正确答案:C80.正确答案:基因特异性、器官特异性、代谢或发育特异性、不均匀性、各cDNA均可获得表达。81.正确答案:A82.正确答案:A,B,C,D,E83.正确答案:丝84.正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。85.正确答案:末端脱氧核苷酸转移酶；T4多核苷酸激酶；碱性磷酸酶；核酸外切酶；单链DNA内切酶；甲基化酶。86.正确答案:Southern杂交87.正确答案:B,C,D88.正确答案:选择合适的原始质粒；减少限制性内切酶切点；适当增加筛选标记；选择或用强复制起始子代替，提高拷贝数；灭活或去除nic/born基因及毒性蛋白编码区域，提高质粒的安全；进行性状表达的改造。89.正确答案:正确90.正确答案:穿梭载体卷II一.综合考核题库(共90题)1.接合质粒2.DNA片段之间的连接方式有哪些？3.黏粒(cosmid)质粒中，COS位点的功能是A、限制酶切位点B、参与包装进入病毒外壳C、选择标记D、复制起点4.下列哪一种结构形态的外源蛋白表达量高A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白5.Ptrp表示（）A、噬菌体启动子B、色氨酸启动子C、乳糖和色氨酸复合启动子D、乳糖启动子6.用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。7.质粒载体能够克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb8.要对一双链的DNA分子进行3’端标记，可用A、DNA聚合酶IB、T4DNA聚合酶C、T7DNA聚合酶D、Klenow酶9.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori10.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种11.人类基因组计划___________年启动的。12.YAC载体具有什么样的功能性DNA序列？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？13.原生质体就是去处了细胞壁的细胞。14.试述分子杂交技术的原理？15._________质粒是目前使用较为广泛的载体。16.现在科研人员又开发了红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、_________等新型的荧光蛋白。17.常规PCR反应程序中，子链延伸的温度一般设置为A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃18.逆转录酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端转移酶活性E、RnaseH活性19.在cDNA技术中，所形成的DNA发夹环可用A、限制性内切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除20.用载体制作转基因植物时，最常用的载体是下列哪种质粒。A、pBR322质粒B、pSCl01质粒C、农杆菌Ti质粒D、pUC质粒21.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的。22.基因打靶包括基因敲除和_________。23.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中不大恰当的是A、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶B、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰C、不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统D、由作用于同一DNA序列的两种酶构成24.在整个基因治疗领域内（）开展的研究最为深入和广泛A、日本B、英国C、美国D、中国25.最早被研制成功的两个基因工程激素药物是______________和生长激素。26.在众多的植物转基因方法中，下列哪种方法应用最多、最广泛A、农杆菌介导法B、植物病毒DNA介导法C、基因枪法D、原生质体法27.按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类：严紧控制型质粒和_____________。28.黏粒（Cosmid)是一种人工构建的载体，A、它具有cos位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶原化反应E、能承载大于自身大小的DNA片段29.Cre-loxP系统两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导loxP间的序列互换。30.大肠杆菌DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，A、将双链DNA分子中的5’磷酸基团同3’羟基基团末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等二价辅助离子D、也可以连接RNA分子31.利用DNA自动测序时通常进行标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP32.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记33.表达载体的结构元件包括哪些A、具备与克隆载体相同的复制原点、多克隆位点、筛选标记B、启动子C、转录终止子D、核糖体识别位点E、翻译起始密码子和终止密码子34.同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相连接的是A、载体DNA与载体DNA之间B、目的基因与载体DNA之间C、目的基因与mRNA之间D、目的基因与目的基因之间35.两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称之为质粒的_________。36.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。37.大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统。38.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发明是下列哪些A、利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA片段B、遗传密码子的破译C、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆D、逆转录酶的使用E、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制39.使外源基因在人体表达从而克服某一缺陷或疾病的技术称为A、基因治疗B、基因工程C、基因药物D、免疫治疗40.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。41.多数II类限制酶反应最适PH是A、PH:2-4B、PH:4-6C、PH:6-8D、PH:7-1042.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1核酸酶切割或_________。43.两个基因融合所编码的新蛋白称为_________。44.你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。错在哪里？45.下列哪一种测序方法不需要跑胶A、化学降解法B、自动测序法C、胶磷酸测序法D、双脱氧末端终止法46._________是植物细胞出去细胞壁后的部分，是一个质膜包围的裸露细胞。47.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。48.基因工程又叫A、分子克隆B、基因克隆C、遗传育种D、遗传工程E、重组DNA技术49.基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A、质粒、线粒体、噬菌体B、染色体、叶绿体、线粒体C、质粒、噬菌体、动植物病毒D、细菌、噬菌体、动植物病毒50.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。51.载体52.______________是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。53.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-354.下列属于基因工程步骤的是（）A、提取目的基因B、目的基因与运载体结合C、目的基因导入受体细胞D、目的基因的表达55._________利用激光微束脉冲引起细胞膜可逆性穿孔，从而将外源DNA导入受体细胞。56.影响限制性核酸内切酶酶切的反应条件有哪些A、温度B、盐离子浓度C、缓冲体系D、反应体积和甘油浓度E、限制性核酸内切酶反应的时间57.Northern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体58.Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的DNA是以一种_______________形式存在。59.II型限制性核酸内切酶的基本特征是A、既有内切酶活性又有甲基化酶活性B、识别非对称序列C、有特异的识别序列D、识别序列具有回文对称结构E、在识别序列内或两侧特异位点切割60.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交61.pGEM质粒与pUC质粒的区别主要在于A、抗药性基因的不同B、复制起点不同C、MCS不同D、前者有启动子62.限制性内切核酸酶的星号活性是指A、在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同63.Sanger双脱氧末端终止法和化学降解法的应用原理是一样的。64.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端65.质粒载体的装载容量为10Kb-20Kb。66.在DNA分离过程中，通常要进行透析，其目的是_________。67.在实验室研究中，重组大肠杆菌的培养基常使用牛肉膏蛋白胨培养基。68.根据Northern印迹的结果可以说明_________。69.考斯质粒（cosmid）是一种A、天然质粒载体B、由l-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C、能裂解受体细胞的烈性载体D、能在受体细胞内复制并包装的载体70.LacZ基因通常用于构建质粒载体的目的是A、编码蓝色色素产物，可用于示踪转化的细胞B、编码一种酶，将RNA转化为DNAC、编码一种抗生素抗性的酶D、编码一种可检测的酶,当基因内部的位点插入任何外源片段，ORF遭到破坏时，产物即不能表达71.切口平移法标记DNA探针时，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA连接酶D、限制酶72.根据结构和功能特性，可将DNA限制性内切酶分为几类A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶73.关于回文序列，下列各项中哪些是不正确的？A、是限制性内切核酸酶的识别序列B、是某些蛋白质的识别序列C、是基因的旁侧序列D、是高度重复序列E、有对称轴74.连接反应中，为了维持还原环境，稳定酶活性，需在连接缓冲液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP75.常用载体质粒的本质是_________。76.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。77.不同的限制性核酸内切酶都盐离子强度有不同的要求，一般按离子强度不同分为低盐、_________、高盐三类。78.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1核酸酶切割或_________ 。79.III型限制性内切核酸酶A、不同亚基的识别位点甲基化和限制活性相互排斥：MS

亚基促使甲基化，R

亚基促使限制B、由两个亚基组成，在识别位点附近识别并进行甲基化或限制C、在错配修复中起关键作用，因为酶结合到DNA

上是以结构扭曲为基础而不是序列错误识别D、由两个亚基组成，仅识别半甲基化位点。甲基化位点相对于限制位点的位置（上游或下游）决定

了DNA

是被甲基化还是被限制80.核酸分子杂交探针必须满足的条件不包括A、单链结构B、足够长度C、不含互补区D、只能是DNA81.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT82.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃83.DNA聚合酶I_________的是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子质量为76kDa的大片段。84.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？85.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Lac又叫A、色氨酸启动子B、乳糖启动子C、乳糖和色氨酸的杂合启动子D、噬菌体的左向启动子86.影响连接反应的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子浓度的影响C、连接反应温度与时间的影响D、连接缓冲液的影响E、酶浓度的影响87.利用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转移。88.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeIII的来源不同，但识别的序列都是GGCC，因此他们属于_________。89.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。90.DNA重组连接的方法大致分为四种：①________；②平末端连接；③同聚物加尾连接;④接头/连接子连接。卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:指含有nic/born基因，能自我转移的质粒。2.正确答案:具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端DNA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。3.正确答案:B4.正确答案:C5.正确答案:B6.正确答案:原因是：HindⅢ的切点在A基因内。7.正确答案:D8.正确答案:B9.正确答案:D10.正确答案:A11.正确答案:199012.正确答案:YAC带有天然染色体所有的功能元件，包括一个着丝粒，一个DNA复制起点，两个端粒。YAC能够容纳长达几百kb的外源DNA，这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色体步移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。13.正确答案:正确14.正确答案:将标记的核酸探针以碱基互补配对原则与组织细胞中的待测核酸进行特异性的杂交组合，形成探针标记与待测核酸的杂交体，然后利用各种标记物的显色技术，在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下探察待测目标核酸的存在及位置。15.正确答案:pUC系列16.正确答案:蓝色荧光蛋白17.正确答案:D18.正确答案:A,B,C,D,E19.正确答案:C20.正确答案:C21.正确答案:错误22.正确答案:基因敲入23.正确答案:A24.正确答案:C25.正确答案:胰岛素26.正确答案:A27.正确答案:松弛控制型质粒28.正确答案:A,B,D29.正确答案:错误30.正确答案:A31.正确答案:A32.正确答案:B33.正确答案:A,B,C,D,E34.正确答案:C35.正确答案:不相容性36.正确答案:简并引物PCR37.正确答案:正确38.正确答案:A,C,D39.正确答案:A40.正确答案:正确41.正确答案:C42.正确答案:DNA聚合酶补平43.正确答案:融合蛋白44.正确答案:如果你的杂交探针是双链的，可能因为在加入杂交混合物之前忘记将探针变性而得到空白的放射自显影结果。45.正确答案:C46.正确答案:原生质体47.正确答案:20世纪70年代48.正确答案:A,B,D,E49.正确答案:C50.正确答案:正确51.正确答案:基因工程中，携带外源目的基因或DNA片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具。52.正确答案:基因53.正确答案:A54.正确答案:A,B,C,D55.正确答案:微激光束法56.正确答案:A,B,C,D,E57.正确答案:B58.正确答案:DNA双螺旋结构59.正确答案:C,D,E60.正确答案:B61.正确答案:D62.正确答案:A63.正确答案:错误64.正确答案:A65.正确答案:错误66.正确答案:除去小分子的无机离子67.正确答案:错误68.正确答案:外源基因是否进行了转录69.正确答案:D70.正确答案:D71.正确答案:A72.正确答案:A,B,C73.正确答案:A,B,C74.正确答案:A75.正确答案:DNA分子76.正确答案:错误77.正确答案:中盐78.正确答案:DNA聚合酶补平79.正确答案:B80.正确答案:D81.正确答案:B82.正确答案:B83.正确答案:Klenow片段84.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。85.正确答案:B86.正确答案:A,B,C,D,E87.正确答案:正确88.正确答案:同裂酶89.正确答案:错误90.正确答案:黏性末端连接卷III一.综合考核题库(共90题)1.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。2.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。3.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？4.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以两个方向插入到EcoRI末端的载体中。5.下列哪一项不是逆转录病毒的特点A、基因组很小B、表达时间短C、可感染分裂细胞D、可整合到宿主染色体上6.限制性核酸内切酶一般在多少度下保存A、10℃B、-20℃C、20℃D、0℃7.免疫共沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用8.大肠杆菌作为外源基因表达系统的优点是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆机表达系统成熟完善D、全基因组测序完成E、被美FDA批准为安全的基因工程受体生物9.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有哪种被视为用作基因工程载体的天然质粒载体。A、pBR322B、pSC101C、pUB110D、pUC1810.PCR技术是_________的缩写。11.关于重组体的叙述，下列哪项不正确：A、重组体可直接表达外源基因B、重组体只能在宿主细胞或体外表达系统中表达外源基因C、重组体是由目的基因和载体通过连接酶连接而成的D、重组体中含有外源基因12.下列用于Southern印迹转移的是：A、首先用限制性内切酶处理DNAB、酶切片段经琼脂糖电泳C、将DNA进行碱变性D、将DNA转移至硝酸纤维素膜E、硝酸纤维素膜经80℃真空干燥2-3小时13.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、碱性磷酸酶E、末端核苷酸转移酶14.基因工程的操作程序可简单地概括为A、载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B、分、切、接、转、筛C、将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株D、将载体和目的基因接合成重组体15.经典的DNA测序方法有两种，即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。16.现在最常用的pUC载体是pUC18，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA。17.基因操作的两大关键技术是A、工具酶与载体B、转化细胞和供体细胞C、基因克隆和基因重组D、克隆载体和表达载体18.______________也叫做依赖于RNA的DNA聚合酶或RNA指导的DNA聚合酶。19.HIV为逆转录病毒。20.已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有三个切点，因此，用此酶切割该环状DNA，可得到三个片段。21.pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自A、ColElB、Ri质粒C、pSCl01D、pUCl822.试述cos质粒载体的特点？23.BergP的创造性的工作是在体外构建了重组DNA分子，所用的载体是一种具有复制能力的细胞质质粒。24.PCR特异性与模板特异性成反比。25.用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。26.常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA连接酶C、T4RNA连接酶D、RNA聚合酶27.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA或DNA分子。28.同位素标记探针是指在探针上连接下列哪一种物质A、32PB、生物素C、荧光素D、酶29.在分离DNA时，要戴手套操作，原因是手上常有________。30.用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。31.下列哪一种酶不能标记DNA分子探针A、Klenow片段B、T4DNA聚合酶C、DNA连接酶D、大肠杆菌聚合酶I32.克隆基因目的蛋白的表达形式主要有哪些类型？33.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。34.试述影响连接反应的因素？35.逆转录合成第一条链时一般采用下列哪一种酶A、鼠源反转录酶B、鸡源反转录酶C、兔源反转录酶D、禽源反转录酶36.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力37.基因工程又叫遗传工程、____________、分子克隆。38._________是由磷脂组成的膜状结构，用它包装外源DNA分子，然后与植物原生质体共保温。39.YAC是至今最大容量的克隆载体。40.1986年第一例植物基因工程产品----_________问世。41.Sanger双脱氧末端终止法胶板上的链就是模板链。42.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、5个B、2个C、3个D、4个43.pSCl01是一种________复制的质粒。44.质粒ColE1同pSC10共整合后，得到的重组质粒pSC134，具有两个复制起始点，这两个起始点在任何细胞中都是可以使用的。45.在基因工程中，可用碱性磷酸酶A、防止DNA的自身环化B、同多核苷酸激酶一起进行DNA的5’端标记C、制备突出的3’端D、催化DNA连接E、上述说法都正确46.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、构建重组DNA分子B、无性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立单克隆抗体47.pBR322质粒克隆载体含有的抗性标记为A、四环素和氨苄青霉素B、氨苄青霉素和庆大霉素C、四环素和庆大霉素D、潮霉素和四环素48.常用的固相杂交类型有A、Southern杂交B、Northern杂交C、组织原位杂交D、菌落原位杂交E、斑点杂交49.“基因表达”是指该基因在大肠杆菌内A、能进行自我复制B、能进行转录C、能控制合成生长抑制素释放因子D、能合成人的生长激素50.粘粒载体不会使宿主菌裂解。51._________是指转录因子用于识别靶DNA的蛋白结构域。52._________是一种糖蛋白或结合糖的蛋白质，存在于多种植物中，特别是富含于植物种子和储藏器官。53.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段？54.基因组文库和cDNA文库的区别？55.根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从DNA文库中筛选到相应的基因。56.酿酒酵母表达系统常用启动子有哪些？57.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库58.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病59.波莉绵羊的诞生是通过体细胞核移植法制备的。60.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显_________色，为阳性克隆。61.分子杂交的化学原理是形成()A、疏水键B、配位键C、氢键D、共价键62.PCR反应中常用的酶是______。63.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指A、人工合成的苯丙氨酸羟化酶的DNA分子B、用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子C、用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子D、人工合成的免疫球蛋白的DNA分子64.将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体内，改变病人免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因增补B、基因激活C、基因失活D、免疫调节65.通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。66.逆转录PCR主要有两个应用，一是从mRNA出发获取目的基因，二是_____________。67.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二链合成时形成的发夹环。68.原核启动子在转录起始点上游有一段富含A和T的区域称为A、-15区B、-35区C、-45区D、-10区69.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+170.荧光定量PCR一般分为______________与探针法。71.蛋白质的融合表达式指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起，并作为一个新的____________进行表达。72.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶，分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

73.质粒生物学特性不包括A、自我复制B、转移性C、相容性D、高拷贝数74.Southern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体75.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。76.Southern杂交的流程中，（）能否去掉非特异性杂交带来的很高的背景A、转膜B、预杂交C、洗膜D、电泳77.PCR反应中引物长度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp78.下列测序方法哪个是属于经典的DNA测序方法A、ABISOLID测序B、Illumina测序C、Roche454D、双脱氧终止法79.扩增与已知DNA区段相连接的未知染色体DNA序列的PCR技术是A、常规PCRB、逆转录PCRC、反向PCRD、多重PCR80.没有启动子，基因就不能转录。81.连接反应中，那种组分是为连接体系提供合适的pHA、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP82.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体,pUC系列的载体是通