秋季15肿瘤干细胞课件

AMPK/FIS1-MediatedMitophagyIsRequiredAMPK/FIS1-MediatedMitophagyIsRequiredforSelf-RenewalofHumanAMLStemCellsmmadBiniamAdane,...,DanielA.ClaytonA.Smith,CraigT.InHumanacutemyeloidleukemiastemcells(LSCs)dependonFIS1mediatedmitophagyforselfrenewalandsurvival.AMPKisconstitutivelyactiveinhumanLSCs,isupstreamofFIS1,andactstostimulatemitophagy.DisruptionofAMPKsignalingorFIS1activityresultsineradicationof

白血病干细胞AMPK/FIS1-MediatedMitophagyIsRequiredforSelf-RenewalofHumanAMLStemCells

11 GranulocytesRed急性髓性白血病形成干细胞分层。正常造血干细胞（ GranulocytesRed+CD38-。在正常细胞造血（右）期间，HSC产生严重的联合免疫缺陷（SCID）再生细胞（SRC），其能够通过一系列成熟谱系。 在白血病发生过程中（左），LSC（或SCID白血病起始细SLIC）HSC表达一些共有的表面表型标志物。它还具有产生克隆性白血病祖细胞和非克隆性胚细胞的能力构成白血病的大部分。(BrianJ.P.HuntlyandD.GaryGilliland,

1造血干细胞（HSCs 和造血祖细胞（HPCs）的线粒体和代谢。 于低氧生态位中，具有少量生长因子。这种环境促进了转录因子如HiF1A，FOXO和PPARD的激活以及AKT激酶的抑制。这种环境可促进脂肪酸氧化，降低线粒体含量，较低量的ROS和增加厌氧糖酵解。线粒体自噬与HSC的维持有关，可清除受损的线粒体或代谢物的再循环不清楚自噬的哪些功能是关键的。（AashishJoshiandMondiraKundu,2013）

Fig.2FIS1的缺失诱导性AML的干性和祖性潜能，Fig.4FIS1的缺失诱导性Fig.6抑制FIS1上游的AMPKFig.7AMLLSCs对AMPK/2Fig.1AMLLSCs具有更高的

3Fig.1Fig.1AMLLSCs具有更高的图A，图表显示通过线粒体融合，和线粒体自噬，对健康线粒体网络的调节

33Fig.1AMLLSCs具有更高的

图B，qPCR结果显示，FIS1 在分选的ROS低的LSCs（L）ROS高的非LSC（N）中的相对表达 blot（WB）结果显示FIS1蛋白在分选的ROS低（L）与ROS高非LSCs（N）中的表达。虚样本分开编译在一起，以便在同一图中表示

Fig.1AMLLSCs具有更高的Fig.1AMLLSCs具有更高的线粒体形态与ROS高的非LSCs的形黄色箭头

33Fig.1AMLLSCs具有更高的

图E，用于量化图F，在3

Fig.1AMLLSCs具有更高的个点代表单个线粒体

FIS1的缺失诱导

33 FIS1的缺失诱导

图E，WB图像显 低后第6天的原代AML细胞的线粒体形态。箭头突出了明显的线粒体形态。 率。每个点代表一个单独的细胞。

FIS1的缺失诱导

FIS1的缺失诱导

33 性AML的干性和祖性潜能，

CCDE 表 3 性AML的干性和祖性潜能，

33 性AML的干性和祖性潜能，

图F，甲基纤维素中的正常CD34CBMC或PBMC产生的BFU-E和CFU-G图G，BFU-E和CFU-GM集落的形

I图II图I，FIS1敲低或不敲低的正常CD34PBMC相对3 性AML的干性和祖性潜能，

3 3图A，GSEA富集图显示MOLM-13（3个技术重复）和原代AML细胞（3个生物学重复）中FIS1的丧失导致WANG_GSK3I_SB216732_DN组的下调。sh-FIS1表示sh-FIS1-＃B和sh-FIS1-#D。Fig4FIS1的缺失诱

图B，WB图像显示FIS1敲低后第6天MOLM-13和原代AML细胞中GSK3

Fig.4FIS1的缺失诱

FFG 图G，在表达GSK3B-WT或GSK3B-S9A等位基因并敲低FIS1后第6天，3Fig.4FIS1的缺失诱

33AFig.5FIS1的缺失导致

图A，GSEA富集图显示原代AML细胞中FIS1的丢失导致来自GSEAReactome集合的3个细胞周期相 组的下调

3 3

图B热图显示具有或不具有FIS1敲低的原代AML细胞中，细胞周期相关的表达。数据由RNA-seq分析产生。注：的不一定满足0.05的调整p值

图C，FIS1敲低后第6天的原代AML细胞中细胞周期状态。 培养基中培养的原代AML细胞的扩增倍数，

AABC图A，AMPK假设的基本原理。图B，WB显示，ROS低的LSC（L）AMPKa1和总AMPKa1的表达。LSC（N）中的p-图CWB显示，在AMPKa1（PRKAA1）敲低后第6天MOLM-13和原代AML细胞中FIS1的表达。3Fig.6抑制FIS1上游的AMPK信号降低性AML的LSC

DDEF图D，共聚焦图像显示在shRNA介导的AMPKa1敲低后第6天的原代AML细胞的线图E，对照和shAMPKAML图FGSEA富集图显示MOLM-13和原代AML细胞中FIS1的丧失导致 组的下调 Fig.6抑制FIS1上游的AMPK信号降低性AML的LSC

GGH图G，具有或不具