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文档简介
动物组织学与胚胎学
河南农业大学牧医工程学院
动物基础科学系
闫峰宾畜牧楼414第一页,共三十六页。课程教学现状:组织结构大多肉眼看不见摸不着,学习起来很抽象内容微细零散,难以记忆理解,比较枯燥乏味课时压缩,知识的掌握上难度加大
第二页,共三十六页。注意事项:反复讲解强调的内容为难点、重点、考点“启发式”和“问题式”教学不能死记硬背,内容要融会贯通,形态结构联系机能记好笔记随机点名,与平时成绩挂钩第三页,共三十六页。理论教材:
1.动物组织学与胚胎学杨倩等主编,中国农业大学出版社,2008年,第一版
2.动物解剖学与组织胚胎学肖传斌等主编,郑州大学出版社,2009年,第一版
3.家畜组织学与胚胎学沈霞芬等主编,中国农业出版社,2010年,第四版
实验教材:家畜组织学与胚胎学实验指导第四页,共三十六页。主要参考材料:(1)马仲华主编,《家畜解剖学及组织胚胎学》第三版,中国农业出版社出版,2002;(2)董常生主编.《家畜解剖学》第三版(兽医专业用),中国农业出版社出版,2001;(3)成令忠主编.《组织学与胚胎学》.第四版,北京:人民卫生出版社,2000(4)秦鹏春等著.《哺乳动物胚胎学》.北京:科学出版社,2001(5)沈霞芬主编.《家畜组织学与胚胎学》.第三版,北京:中国农业出版社,2001(6)王树迎王政富主编.《动物组织学与胚胎学》.北京:中国农业科技出版社,2000(7)李德雪尹昕主编.《动物组织学彩色图谱》.长春:吉林科技出版社,1995(8)张端莲主编.组织学彩色图谱.科学技术文献出版社,2000(9)Laboratory
manual
anatomy
﹠Physiology
fifth
edition(10)李霞主编.水产动物组织胚胎学.中国农业出版社,2006
第五页,共三十六页。
第一章
绪论
教学目的:
1.掌握动物组织学与胚胎学的概念、研究内容。
2.了解动物组织学与胚胎学的研究方法。
3.掌握动物组织学常用术语及计量单位。
重点和难点:
1.动物组织学与胚胎学的概念、研究内容。
2.动物组织学与胚胎学的研究方法。
3.动物组织学常用术语及计量单位。
第六页,共三十六页。思考题:
1.简述组织学与胚胎学的定义及其研究内容.
2.常用的组织胚胎学的研究方法有哪些?
3.名词解释:嗜酸性、嗜碱性、异染性、H.E.染色。
第七页,共三十六页。第一节动物组织学与胚胎学的概念
动物组织学与胚胎学包括细胞学、组织学和胚胎学三部分内容。
一.
动物组织学(Histology)的定义及其研究的内容
1.定义:动物组织学是研究动物机体正常微细结构及其机能的科学。细胞
2.研究内容:微细结构基本组织
器官组织
第八页,共三十六页。3.研究方法(1)微观结构
A光学显微镜及其研究技术(显微结构)
B电子显微镜及其研究技术(超微结构)(2)特殊染色方法
A组织化学技术
B免疫组织化学技术
C同位素示踪技术第九页,共三十六页。3.研究方法:
(1)
微观结构:
A.光学显微镜(Lightmicroscope,LM)
光学显微镜基本结构:1.
照明灯(Lamp)2.
聚光器(Condenser)3.
载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.
推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.
物镜(Objectives)6.
粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.
目镜(Oculars)8.
照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)第十页,共三十六页。第十一页,共三十六页。
光镜技术
分辨率(Resolution)也叫分辨力,是指能够分辨开的两物点之间的最小距离。LM的分辨率约为0.2μm。
例:在明视距离(25cm)之处,正常人眼所能看清相距0.073mm的两个物点,这个0.073mm的数值,即为正常人眼的分辨距离。
微细结构的大小及长度光镜以微米(μm)作单位,电镜以纳米(nm)作单位。
1m=101dm=102cm=103mm=106um=109nm=1010Â=1012pm
第十二页,共三十六页。切片(Section)
:将组织切薄使光线可以透过。有石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片。
石蜡切片的制作过程:取材——→固定——→水洗——→脱水——→透明——→浸蜡——→包埋——→切片——→铺片——→脱蜡——→复水——→染色——→水洗——→脱水——→透明——→封存
固定(Fixation):为保存新鲜组织的微观结构,尽快将组织浸入到酒精,甲醛,苦味酸,Bouin’s液或Zenker’s液等固定剂中。
第十三页,共三十六页。石蜡包埋(Paraffinembedding):*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。浸蜡(Infiltration):在60~62◦C时,用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态,内含待切组织。切片:用切片机将组织切成4~7μm厚的蜡片,然后将其放到温水上,待其完全展开后,裱到有粘附剂的载玻片上。第十四页,共三十六页。第十五页,共三十六页。除切片外,还有其他处理组织的方法:*铺片(Wholemount):用于很薄的组织,如肠系膜。*磨片(Groundsection):用于很坚硬的组织,如骨和牙。*涂片(Smear):用于液态组织,如血液,精液和唾液。第十六页,共三十六页。哈弗斯管(中央管)骨细胞胞体骨细胞突起哈弗斯系统/骨单位(银染)哈弗斯骨板第十七页,共三十六页。第十八页,共三十六页。染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前,需要脱蜡入水,因为染料是水溶性的。最常用的染料是苏木素(Hematoxylin,H)和伊红(Eosin,E)。*苏木素是碱性染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性,具有嗜碱性(Basophilic)。第十九页,共三十六页。*伊红是酸性染料,粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性,具有嗜酸性(Acidophilic)。*不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。第二十页,共三十六页。肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色b.
如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同,该结构具有异染性(Metachromasia)。c.
如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子而使自身显示棕黑色,该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。第二十一页,共三十六页。网状纤维具有嗜银性,因此可以用银盐染色来显示。第二十二页,共三十六页。H&E染色的中等动静脉不同的染色方法,其结果不同。第二十三页,共三十六页。醛复红染色的中等动静脉(弹性纤维)第二十四页,共三十六页。B.EM技术:.EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。.EM的原理和LM相似,但用电子束代替光线,磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2nm,放大几万,几十万,甚至上百万倍。
第二十五页,共三十六页。.EM的组织的制备与LM的相似,但有以下不同:a.
通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。b.
切片超薄
(厚度小于90nm),塑胶包埋。c.
用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此,所有原始的电镜图片都是黑白的。电子密度高(深)、电子密度低(浅)、正染色、负染色第二十六页,共三十六页。TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。第二十七页,共三十六页。SEM显示巨噬细胞表面第二十八页,共三十六页。(2).特殊的染色方法:A.组织化学(Histochemistry,
细胞化学)法:通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示微细结构的位置,然后用显微镜观察。
PAS反应:用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodicacid)将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后用无色亚硫酸品红(Schiff试剂)还原戊二醛形成紫红色沉淀。第二十九页,共三十六页。肝脏的PAS染色第三十页,共三十六页。B免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法:a.
待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen),通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合,然后显示标记物,在原位产生不溶有色的反应产物,最后用显微镜观察。第三十一页,共三十六页。b2种基本染色法:*直接法:第一抗体被标记。*间接法:第一抗体也被看作抗原,而第二抗体被标记。因为信号被放大,因此更加敏感。C.放射自显影(Autoradiography):给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如I125等,间隔照相,从而追踪该物质代谢途径。第三十二页,共三十六页。二.动物胚胎学定义及其研究内容
1.定义:研究动物个体发生和发育的过程及其变化规律的科学。
胚前发育
广义动物胚胎学(发育生物学)胚胎发育
2.研究内容胚后发育
狭义动物胚胎学(胚胎发育)
第三十三页,共三十六页。1.
组织学又叫微观解剖学(Microanatomy),是解剖学知识的进一步完善。2.
结构是功能的基础,学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.
只有了解正常结构,才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。第二节动物组胚学在畜牧兽医教育中的地位第三十四页,共三十六页。附实验课应注意的问题:1.
体内结构为立体的,三维的,而课本、讲义和显微镜
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