离体小肠平滑肌的生理特性

[方法(fāngfǎ)与步骤]一、实验(shíyàn)准备

1.恒温(héngwēn)平滑肌浴槽装置向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定在38℃。第二页，共十五页。2.标本(biāoběn)制备向兔耳缘静脉注射空气(kōngqì)(或用木棒猛击兔的后脑部)使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点,快速沿肠缘剪去肠系膜，然后再剪取20～30cm长的十二指肠，置于4℃左右的台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于4～6℃台氏液中备用。第三页，共十五页。3.仪器(yíqì)连接实验时将肠管剪成2～3cm的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦(mócā)。用塑料管将充满气体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑料管上的螺旋夹，让通气管的气泡一个一个的溢出，为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相连，进入生物机能实验系统，选择对应通道项目为张力。第四页，共十五页。二、实验(shíyàn)项目1.观察、记录(jìlù)38℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。2.观察、记录25℃台氏液中的肠段节律性收缩(shōusuō)曲线。3.待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38℃后，加1:10000肾上腺素1～2滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38℃台氏液冲洗三次。4.待肠段活动恢复正常后，再加1:10000乙酰胆碱1～2滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变，作用出现后同上法冲洗肠段。第五页，共十五页。5.向中央标本槽内加入1mol·L-1NaOH溶液1～2滴，观察肠段收缩(shōusuō)曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。6.向中央标本槽内加入1mol·L-1HCl溶液(róngyè)1～2滴，观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。7.向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液2～3滴，观察(guānchá)肠段收缩曲线的改变。第六页，共十五页。[注意事项]1.实验动物先禁食24h，于实验前1h喂食，然后处死,取出标本，肠运动(yùndòng)效果更好。2.标本安装(ānzhuāng)好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开始实验。3.注意控制温度。加药前，要先准备(zhǔnbèi)好更换用的新鲜38℃台氏液，每个实验项目结束后，应立即用38℃台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。4.实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。第七页，共十五页。结果(jiēguǒ)与分析第八页，共十五页。一、低温(dīwēn)对离体肠肌活动的影响离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌细胞兴奋型降低，代谢相关(xiāngguān)酶活性降低，肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。第九页，共十五页。二、滴加肾上腺素离体肠肌收缩减弱(jiǎnruò)。肾上腺素可与肠肌细胞膜上肾上腺素能受体（α、β型）结合，一方面可使Ca2+、K+外流增加，细胞膜电位发生超极化，兴奋性降低；另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆内Ca2+浓度降低，肌张力减弱。第十页，共十五页。三、滴加乙酰胆碱离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞膜上M型受体结合(jiéhé)，使肌膜上Ca2+通道开放，Ca2+内流，肌浆内Ca2+浓度升高，肠肌收缩加强。第十一页，共十五页。四、滴加NaOH离体肠肌收缩(shōusuō)加强。H+浓度降低，促进Ca2+通道开放，Ca2+内流增加；促进肌浆网释放Ca2+；促进Ca2+与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩加强。第十二页，共十五页。五、滴加HCl离体肠肌收缩减弱。H+浓度升高，抑制Ca2+通道开放，Ca2+内流减少；抑制肌浆网释放Ca2+；抑制Ca2+与肌钙蛋白结合(jiéhé)，最终导致肠肌收缩减弱。第十三页，共十五页。六、滴加CaCl2离体肠肌收缩加强(jiāqiáng)。滴加CaCl2后，肠肌细胞膜内外Ca2+浓度差加大，Ca2+顺浓度差内流，使肠肌细胞胞浆内Ca2+浓度升高，肠肌活动加强。第十四页，共十五页。内容(nèiróng)总结[目的]。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。6.向中央标本槽内加入1mol·L-1HCl溶液1～2滴，观察肠段收缩曲线的改变。2.标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即