上海市临检中心 临床微生物学检验新技术及质量控制学习班课件 微生物培养新技术

微生物培养新技术王庆忠上海市临床检验中心微生物组学技术带来的挑战纯培养技术基本要点几种新型纯培养技术展望微生物组学技术带来的挑战Examplesof

infectious

disease

outbreaks

that

wereinvestigated

usingnext-generation

sequencingRough

estimates

of

size

and

biodiversity

acrossbodysites

in

anadult

body纯培养技术基本要点纯培养的价值根据科赫原则，验证细胞毒力抗生素药敏测试，以利抗菌治疗纯培养，以便全基因测序蛋白质组分析，筛选检测靶标基因敲除、转入等转化医学研究微生物培养四要素基质营养气体微环境温度培养时间几种新型纯培养技术无细胞体系古菌培养培养组学共培养Microbial

culturomics2份塞内加尔,1份欧洲男性粪便标本样本前处理212种培养条件MALDI-TOF

MS16sRNA测序全基因组测序EM32500菌落,7门117属340种微生物,31新种培养要素营养元素参数设置备注血培养瓶,血平板,心脑浸汁,BCYE,EMB,ESBL,GVPC,MH,PVX等vancomycin,

squalamine,or

colimycinhemin,

L-cysteine,

orvitamin

KT1-andT4-likephages气体环境温度好氧,厌氧,微好氧4°C,25°C,28°C,37°C,45°C,and

55°C24h-26d时间65°Cfor

20minor80°C

for

30

min5,0.8,0.45,and0.2µm样本前处理孢子个体大小100%80%60%40%20%0%>

1

culturecondition1

cultureconditionNew

species

(%)

Other

species

(%)不同检测方法的阈值无细胞体系Chlamydia

trachomatis始体elementarybody(EB)传染性,休眠网状体reticulate

body(RB)非传染性,活跃•

专性细胞内培养:includingmouse

fibroblast(McCoy

and

Lcells),humancervical

carcinoma(HeLa

229),

human

laryngeal

carcinoma(HEp-2),human

epithelial(HL),BGMK,

andVe

ro

(322)celllines。1,042,519bpCIP-1

mediumrecipeComponentFormulamg

/100mlFinal

concentration2XIPBaPotassiumphosphateSodiumphosphateKH2PO41365mM10mMNa

HPO

x7H

O

536242PotassiumgluconatePotassiumchlorideMagnesium

chlorideC

H

KOKCl514012040110mM8mM1

mM6117MgCl

x6H

O22NutrientsDithiothreitolGlucose-6-phosphateAdenosinetriphosphate------0.5

mM0.5

mM1

mMFetal

bovine

serum20

aminoacidsbCytidine

5’-triphosphate------1%25

µM50

µMGuanosine5’-triphosphate

---50

µM50